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{P2} UE2.1 > Biotech : ADN recombinant P2 > Flashcards

Biotech : ADN recombinant P2 Flashcards

1
Q

Qu’est-ce que l’antithrombine III humaine ?

A
  • Anticoagulant
  • Glycoprotéine plasmatique
  • 432 AA
  • PM : 58 200 Da
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Q

Quelle quantité d’antithrombine peut on obtenir dans 1 mL de lait de chèvre ?

A

14 mg

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3
Q

Pourquoi avoir utilisé la chèvre pour produire l’antithrombine recombiné et pas la vache ?

A
  • Quantité suffisante de lait
  • Moins de risque de développer des encéphalopathies spongiformes transmissibles
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Q

Quelles sont les principales étapes de la production d’antithrombine III humaine recombinée ?

A
  • Clonage du gène ATIII
  • Fusion du gène avec promoteur β caséine de chèvre
  • Obtention gène fusion
  • Injection du gène dans les embryon de chèvre
  • Implantation chez chèvres porteuses
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5
Q

Quelles sont les méthodes de purification utilisées pour l’antithrombine III recombinée ?

A
  • Colonne de chromatographie
  • Résine échangeuse d’ion
  • Colonne hydrophobique
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6
Q

Rendement de l’antithrombine III après purification ?

A

55 %

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7
Q

Limites de l’utilisation du lait de chèvre pour produire l’antithrombine III recombinée ?

A
  • Glycosylation ≠ → Obtention d’un acide syalique terminal
  • Présence d’une séquence NANA ET NGNA → Potentiellement création d’AC anti-NGNA si tt réitéré
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8
Q

Qu’engendre la création d’un acide syalique terminal sur l’antithrombine III recombinée ?

A
  • Clairance augmenté
  • Demie vie divisée par 9
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9
Q

Définition d’un AC ?

A

Protéine complexe utilisées par le système immunitaire pour détecter et neutraliser les agents pathogènes de manière spécifique

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10
Q

Caractéristiques des AC ?

A
  • Glycoprotéines
  • Famille des immunoglobuline
  • Forme d’ “Y”
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11
Q

Structure des AC ?

A
  • 2 chaines lourdes + 2 chaines légères
  • Chaque chaine possède :
    • une partie variable
    • une partie constante
  • Liaison entre les chaines légère et lourdes par des pont dissulfures
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12
Q

Quand et par qui à été inventé la première méthode de création des AC monoclonaux ?

A

1975 → Köhler et Milstein : Création de l’hybridome

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13
Q

Qu’est-ce que l’hybridome ?

A

LB fusionné avec des cellules murines du myélome

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14
Q

Pourquoi l’hybridome utilise des cellules de myélome ?

A

Pour obtenir la capacité de multiplication éternelle → création d’AC à l’infini

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15
Q

Par quoi est caractérisée l’évolution des AC totalement murins vers des AC totalement humanisés ?

A

Baisse de l’immunogénicité et augmentation de la durée d’action et de l’efficacité

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16
Q

Quels sont les différents types d’AC monoclonaux développés ?

A

AC :
* Cytotoxiques
* Antagonistes
* Neutralisants
* Utilisés comme vecteur

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17
Q

But des AC cytotoxiques ?

A

Détruire un cible cellulaire

18
Q

Comment fonctionnent les AC cytotoxiques ?

A

Interaction avec le système du complément ou les cellules effectrices → cytotoxicité dépendante du complément

19
Q

Rôle des AC antagonistes ?

A

Fixation sur une molécule membranaire spécifique → inhibition de la liaison du ligand et/ou sa voie de signalisation

20
Q

Quelles sont les cibles de AC neutralisant ?

A

AG solubles ou viraux

21
Q

Quels sont les type d’AC neutralisant existant ?

A

AC neutralisant :
* Les toxines bactériennes
* Des virus (préventif)
* D’autres toxines → venin, digitaliques, ..

22
Q

Autre nom des AC en tant que vecteurs ?

A

AC Immuno-conjugués

23
Q

Utilisation des AC en tant que vecteurs ?

A

Porteur de substances actives

24
Q

Quelles sont les caractéristiques que doivent porter un AG pour être une “bonne” cible pour un AC utilisé comme vecteur ?

A
  • En nb suffisant en surface des cellules
  • Expression de l’AG la + spécifique possible
  • Doit être internalisée par la cellule
25
Q

Quelles sont les différentes parties que l’on retrouve dans les AC immuno-conjugués ?

A
  • AC monoclonal
  • Linker
  • Agent cytotoxique
26
Q

Caractéristiques de l’AC monoclonal servant de vecteur ?

A

Spécifique d’un AG associé à une tumeur

27
Q

Qu’est-ce qu’un linker ?

A

Relie l’AC à la molécule cytotoxique

28
Q

Que permet le linker ?

A

Libération de l’agent cytotoxique directement au niveau de la cellule cible

29
Q

Définition d’un vaccin ?

A

Préparation antigénique induisant une réponse immunitaire spécifique d’un agent pathogène capable de protéger contre l’infection naturelle ou d’en atténuer les conséquences

30
Q

Quelles sont les technologie “ancienne” de production des vaccins ?

A
  • Croissance chez l’animal
  • Culture chez les bactérie puis inactivation
  • Croissance sur œufs puis inactivation
31
Q

Quelles sont les limites des vaccins traditionnels (et de leur production) ?

A
  • Prix
  • Atténuation insuffisante
  • Réversion possible
  • Pb de sécurité lors de la préparation
  • Stockage au frais uniquement
  • Pb d’allergie
32
Q

Quelles sont les caractéristiques des vaccins recombinants ?

A
  • Délétion des gènes de virulence
  • Clonage du gène correspondant :
    → AG pathogéniques viraux ou non pathogéniques bactériens
    → AG pathogénique dans un vecteur d’expression
  • Vaccination avec une fraction antigénique
33
Q

Quels sont les différents types de vaccins recombinants ?

A
  • Sous unité vaccinantes ou vaccin sous unité
  • Vaccins atténués
  • Vecteurs vaccinants
34
Q

Comment sont produit les vaccins sous-unitaires ?

A

Utilisation d’une partie de l’organisme du pathogène suffisante pour induire la réponse immunitaire par liaison des AC à ces protéines

35
Q

Avantage des vaccins sous unitaire ?

A

Pas de particule antigénique supplémentaire

36
Q

Inconvénients des vaccins sous unitaires ?

A
  • Couts
  • Risque que la protéine utilisée ne soit pas la même in situ
37
Q

Que sont les vaccins vivants atténués ?

A

Utilisation des gènes virulents délétés ou modifiés

38
Q

Avantage des vaccins vivants atténués ?

A

Plus efficace que les vaccin inactivés ou sous unité

39
Q

Principe des vaccins vecteurs vivants recombinants ?

A

Utilisation d’un vecteurs dans lequel sont insérés les gènes du pathogène

40
Q

Quels sont les types de vaccins vecteurs vivants recombinants existants ?

A
  • Vecteur viraux réplicatif
  • Vecteur viraux non réplicatif
  • Vecteur bactérien
41
Q

Quel est le but des vaccins vecteurs vivants recombinants ?

A

Apporter les AG ciblés aux cellules immunitaires

42
Q

Quels sont les moyens de fabrication des vaccins vecteurs vivants recombinants ?

A

Intégration dans le génome de l’organisme vecteur des gènes codant pour :
* le ou les AG pathogènes
* Une cytokine améliorant la réponse immunitaire

{P2} UE2.1 (8 decks)

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