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{P2} UE2.1 > Biotech : ADN recombinant P2 > Flashcards

Biotech : ADN recombinant P2 Flashcards

1
Q

Qu’est-ce que l’antithrombine III humaine ?

A
  • Anticoagulant
  • Glycoprotéine plasmatique
  • 432 AA
  • PM : 58 200 Da
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Q

Quelle quantité d’antithrombine peut on obtenir dans 1 mL de lait de chèvre ?

A

14 mg

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3
Q

Pourquoi avoir utilisé la chèvre pour produire l’antithrombine recombiné et pas la vache ?

A
  • Quantité suffisante de lait
  • Moins de risque de développer des encéphalopathies spongiformes transmissibles
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Q

Quelles sont les principales étapes de la production d’antithrombine III humaine recombinée ?

A
  • Clonage du gène ATIII
  • Fusion du gène avec promoteur β caséine de chèvre
  • Obtention gène fusion
  • Injection du gène dans les embryon de chèvre
  • Implantation chez chèvres porteuses
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5
Q

Quelles sont les méthodes de purification utilisées pour l’antithrombine III recombinée ?

A
  • Colonne de chromatographie
  • Résine échangeuse d’ion
  • Colonne hydrophobique
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6
Q

Rendement de l’antithrombine III après purification ?

A

55 %

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7
Q

Limites de l’utilisation du lait de chèvre pour produire l’antithrombine III recombinée ?

A
  • Glycosylation ≠ → Obtention d’un acide syalique terminal
  • Présence d’une séquence NANA ET NGNA → Potentiellement création d’AC anti-NGNA si tt réitéré
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8
Q

Qu’engendre la création d’un acide syalique terminal sur l’antithrombine III recombinée ?

A
  • Clairance augmenté
  • Demie vie divisée par 9
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9
Q

Définition d’un AC ?

A

Protéine complexe utilisées par le système immunitaire pour détecter et neutraliser les agents pathogènes de manière spécifique

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10
Q

Caractéristiques des AC ?

A
  • Glycoprotéines
  • Famille des immunoglobuline
  • Forme d’ “Y”
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11
Q

Structure des AC ?

A
  • 2 chaines lourdes + 2 chaines légères
  • Chaque chaine possède :
    • une partie variable
    • une partie constante
  • Liaison entre les chaines légère et lourdes par des pont dissulfures
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12
Q

Quand et par qui à été inventé la première méthode de création des AC monoclonaux ?

A

1975 → Köhler et Milstein : Création de l’hybridome

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13
Q

Qu’est-ce que l’hybridome ?

A

LB fusionné avec des cellules murines du myélome

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14
Q

Pourquoi l’hybridome utilise des cellules de myélome ?

A

Pour obtenir la capacité de multiplication éternelle → création d’AC à l’infini

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15
Q

Par quoi est caractérisée l’évolution des AC totalement murins vers des AC totalement humanisés ?

A

Baisse de l’immunogénicité et augmentation de la durée d’action et de l’efficacité

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16
Q

Quels sont les différents types d’AC monoclonaux développés ?

A

AC :
* Cytotoxiques
* Antagonistes
* Neutralisants
* Utilisés comme vecteur

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17
Q

But des AC cytotoxiques ?

A

Détruire un cible cellulaire

18
Q

Comment fonctionnent les AC cytotoxiques ?

A

Interaction avec le système du complément ou les cellules effectrices → cytotoxicité dépendante du complément

19
Q

Rôle des AC antagonistes ?

A

Fixation sur une molécule membranaire spécifique → inhibition de la liaison du ligand et/ou sa voie de signalisation

20
Q

Quelles sont les cibles de AC neutralisant ?

A

AG solubles ou viraux

21
Q

Quels sont les type d’AC neutralisant existant ?

A

AC neutralisant :
* Les toxines bactériennes
* Des virus (préventif)
* D’autres toxines → venin, digitaliques, ..

22
Q

Autre nom des AC en tant que vecteurs ?

A

AC Immuno-conjugués

23
Q

Utilisation des AC en tant que vecteurs ?

A

Porteur de substances actives

24
Q

Quelles sont les caractéristiques que doivent porter un AG pour être une “bonne” cible pour un AC utilisé comme vecteur ?

A
  • En nb suffisant en surface des cellules
  • Expression de l’AG la + spécifique possible
  • Doit être internalisée par la cellule
25
Quelles sont les différentes parties que l'on retrouve dans les AC immuno-conjugués ?
* AC monoclonal * Linker * Agent cytotoxique
26
Caractéristiques de l'AC monoclonal servant de vecteur ?
Spécifique d'un AG associé à une tumeur
27
Qu'est-ce qu'un linker ?
Relie l'AC à la molécule cytotoxique
28
Que permet le linker ?
Libération de l'agent cytotoxique directement au niveau de la cellule cible
29
Définition d'un vaccin ?
Préparation antigénique induisant une réponse immunitaire spécifique d'un agent pathogène capable de protéger contre l'infection naturelle ou d'en atténuer les conséquences
30
Quelles sont les technologie "ancienne" de production des vaccins ?
* Croissance chez l'animal * Culture chez les bactérie puis inactivation * Croissance sur œufs puis inactivation
31
Quelles sont les limites des vaccins traditionnels (et de leur production) ?
* Prix * Atténuation insuffisante * Réversion possible * Pb de sécurité lors de la préparation * Stockage au frais uniquement * Pb d'allergie
32
Quelles sont les caractéristiques des vaccins recombinants ?
* Délétion des gènes de virulence * Clonage du gène correspondant : → AG pathogéniques viraux ou non pathogéniques bactériens → AG pathogénique dans un vecteur d'expression * Vaccination avec une fraction antigénique
33
Quels sont les différents types de vaccins recombinants ?
* Sous unité vaccinantes ou vaccin sous unité * Vaccins atténués * Vecteurs vaccinants
34
Comment sont produit les vaccins sous-unitaires ?
Utilisation d'une partie de l'organisme du pathogène suffisante pour induire la réponse immunitaire par liaison des AC à ces protéines
35
Avantage des vaccins sous unitaire ?
Pas de particule antigénique supplémentaire
36
Inconvénients des vaccins sous unitaires ?
* Couts * Risque que la protéine utilisée ne soit pas la même in situ
37
Que sont les vaccins vivants atténués ?
Utilisation des gènes virulents délétés ou modifiés
38
Avantage des vaccins vivants atténués ?
Plus efficace que les vaccin inactivés ou sous unité
39
Principe des vaccins vecteurs vivants recombinants ?
Utilisation d'un vecteurs dans lequel sont insérés les gènes du pathogène
40
Quels sont les types de vaccins vecteurs vivants recombinants existants ?
* Vecteur viraux réplicatif * Vecteur viraux non réplicatif * Vecteur bactérien
41
Quel est le but des vaccins vecteurs vivants recombinants ?
Apporter les AG ciblés aux cellules immunitaires
42
Quels sont les moyens de fabrication des vaccins vecteurs vivants recombinants ?
Intégration dans le génome de l'organisme vecteur des gènes codant pour : * le ou les AG pathogènes * Une cytokine améliorant la réponse immunitaire

{P2} UE2.1 (8 decks)

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