Biomécanique Cellulaire appliquée au Système Respiratoire. Flashcards

1
Q

Quels sont les 3 principaux réseaux de filaments dans la cellule ?

Leurs tailles ?

A
  • Microfilaments d’actine : fibres de stress, elles sont interconnectées entre elles
  • Microtubules : rôle dans la division cellulaire
  • Filaments intermédiaires : lien entre les microfilaments d’actine et les microtubules
  • Microfilament 7nm (diamètre) et sont constitués d’actines globulaires qui vont s’associer du côté + pour faire la polymérisation et se dissocier du coté – pour faire la dépolymérisation.
  • Filaments intermédiaire 10nm
  • Microtubules 25nm
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2
Q

Le cytosquelette est-il une structure dynamique ?

A

Le cytosquelette (CSQ) est une structure dynamique avec un remaniement continuel via une polymérisation/dépolymérisation des microfilaments et des microtubules, ce qui permet aux structures d’actines de créer des réseaux et de changer l’axe du cytosquelette

Le cytosquelette permet donc une connexion entre les structures intracellulaire mais aussi une connexion intercellulaire avec la possibilité d’interagir avec d’autres organites au niveau de la membrane.

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3
Q

Par quelles structures la cellule est-elle attachée à son environnement ?

A

Les filaments d’actine relient la cellule a son substrat et créent un système mécanique. Ils se rejoignent au niveau des ponts d’adhésion focaux : cela permet à la cellule d’adhérer aux autres cellules et à un support. La cellule n’est pas en suspend dans un milieu liquide mais attachée par des points d’adhésion focaux à son environnement.

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4
Q

La strucutre des filaments diffère selon si la cellule est quiescente ou en mouvement :

A
  • Cellule quiescente : filaments intermédiaires (vert) restent autours du noyau, microtubules partent du centrosome (bleu). Filaments d’actine en rouge.
  • En mouvement il y a une forme très différente : les filaments intermédiaires restent autours du noyau mais les filaments d’actine s’organisent de manière différente pour former le lamellipode via un système de polarisation. C’est ce lamellipode qui va donner le sens de direction de mouvement de la cellule. Dans l’exemple si dessous, la cellule se dirige vers la droite.
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5
Q

Le cytosquelette permet une tension interne: (2 expériences)

A

Grâce aux mouvements du cytosquelette la cellule est en tension interne ce qui signifie que tous les éléments à l’intérieur de la cellule vont travailler en permanence pour ramener les cellules vers l’intérieur.

  • Fibroblastes cultivés sur un support souple : on voit un mouvement de plissement du substrat (comme un tissu qu’on rapproche)
  • Cellules épithéliales alvéolaire cultivées sur support rigide : on voit les fibres de stress reliées entre elles et qui relient les cellules et une courbure d’organisation des cellules. Une cellule va ramener les autres cellules vers elle. C’est comme si tout le matériel cellulaire allait vers l’intérieur et permettait une attraction vers le centre. Cela met en évidence qu’il y a des forces biomécaniques qui agissent dans l’environnement à l’intérieur de la cellule mais également à l’extérieur de la cellule et qui vont relier les cellules entre elles grâce à ces filaments
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6
Q

Comment fonctionne la tenségrité de la cellule :

Définition tenségrité ?
Définition du système qui la permet ? (3 mots clés)

A
  • La tenségrité est l’intégrité de la tension c’est-à-dire que la structure tient en autosuffisance de sa tension interne.
  • Les mots clés du système de tenségrité et donc de la tension interne : c’est un système réticulé (avec pleins de câbles dans toutes les directions), spatial (qui va être développé dans les 3 plans de l’espace) et autocontraint.
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7
Q

La cellues est-elle indépendante de son environnement ?

A

La cellule est en auto-équilibre et avec son environnement auquel elle est reliée par des points spécifiques. Autrement dit, la cellule n’est pas seule et elle est en permanence en interaction avec le micro-environnement

En appliquant une force extérieure on peut modifier structure de cellule. Réciproquement, la cellule par modification interne va avoir une influence sur le microenvironnement par modification de la structure globale

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8
Q

La polymérisation nécessite-t-elle une tension ?

A

C’est-à-dire que si cette polymérisation se fait c’est parce qu’il y a une tension qui est exercée sur la cellule. Si brutalement on arrête cette tension il va y avoir un désassemblage.

La cellule a donc une tension interne propre, mais a besoin également d’une intéraction avec l’extérieure et qu’une tension soit appliquée sur la cellule pour qu’elle puisse être active.

Si on relâche toute la structure, la cellule devient quiescente et ne bouge plus. Lorsque la cellule change de forme elle change également de fonction.

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9
Q

La biomécanique a un rôle sur la fonction de la cellule

Rôles/nombre des protéines de jonction ?

A

Les protéines de jonction permettent d’associer les réseaux entre eux et d’associer la membrane aux filaments d’actine ce qui permet la contraction des filaments d’actine et cette structure dynamique. (cette notion peut également tomber à l’examen)

Exemple de variétés d’assemblage grâce aux protéines de liaisons :

  • Protéines de faisceau avec la fimbrine (en vert) qui est une protéine de liaison qui va permettre de créer un réseau parallèle entre les filaments d’actine. C’est ce réseau parallèle qui va être à l’origine de la formation du filopode et permettre par expansion la migration des cellules cancéreuses par exemple
  • Protéines de gel avec un dimère de fimbrine (en vert) : permet une angulation qui participe au contrôle cellulaire

L’organisation de ce faisceau va créer soit des fibres parallèles de tension qui vont permettre la contraction de la cellule soit une organisation en gel qui va participer au contrôle cellulaire.
Donc une organisation en réseaux différents va aboutir à des fonctions différentes de la même cellule

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10
Q

La régulation de l’adhésion de la cellule est sous le contrôle de quelles protéines ?

A

La cellule se détache sous l’influence de RHO GTPase et crée des nouveaux points d’adhésion focaux sous l’influence de RAC.

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11
Q

2 exemples de systèmes actifs capable de générer des forces ?

A
  • Actomyosine :moteur moléculaire de tension interne de la cellule capable de créer des forces. Il est couplé à l’actine
  • dynéine et kinésine : actif dans les cils, couplés aux microtubule).

Ces systèmes actifs nécessitent de l’énergie pour fonctionner : l’ATP (adénosine triphosphate)

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12
Q

Sites d’adhésion focaux:

De quelles structures sont composés les points focaux ?

A
  • Intégrines (protéines transmembranaires qui constituent un lien physique continu entre la matrice extracellulaire et la structure intracellulaire).
  • Protéines de liaison se fixent par centaines à l’intégrine et participent à l’adhésion de la cellule à son environnement.
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13
Q

2 éléments cruciaux pour la formation de points focaux ?

A

Régulation :

  • Mécanique = forces mécaniques
  • Chimique : par l’influence de petite protéines chapeaux qui figent la polymérisation et la cellule.

La construction des points d’adhésion focaux se fait progressivement et ils évoluent d’une structure simple à une structure très organisée, complexe, qui va coupler les intégrines entre elles et les filaments d’actine entre eux. La maturation des sites d’adhésion se fait sous l’influence de forces. Initialement, ils ne résistent qu’à des forces aux alentours du piconewton puis progressivement ils deviennent capable de résister à des forces allant de 10 à 100 nanonewton.

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14
Q

Exemple de la formation de l’endothélium :
Il ne faut pas que la cellule se fasse arrachée par le flux sanguin. Il faut donc qu’elle ait une force importante pour adhérer à l’endothélium. C’est grâce à cette force et à la création de points focaux d’adhésion que l’endothélium est créé et peut résister au flux sanguin. Il faut donc un équilibre afin qu’il y ait assez de force pour que le point focal puisse s’organiser mais pas trop sinon il va lâcher avant la fin de sa maturation. Il faut laisser le temps aux fibres d’adhésion de s’organiser pour résister à l’arrachement.

A
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15
Q

Adaptabilité de la cellule au substrat:

Des cellules, en fonction de l’environnement où elles se trouvent, sont sensibles à la rigidité du substrat et donc à l’environnement biomécanique où elles se trouvent.

La modification du substrat va modifier la forme du cytosquelette ce qui va entrainer une modification de la fonction de la cellule rien qu’en modifiant la matrice

Une cellule isolée est beaucoup plus sensible à la modification du substrat qu’un tissu organisé où il y a une rigidification avec une structure figée car les cellules sont tellement connectées entre elle qu’elles vont former une structure de tenségrité et être moins sensible aux modifications de substrat.

A
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16
Q

Résumé des structures du cytosquelettes (9)

A

Structures du cytosquelette (qui jouent donc un rôle dans la tension interne et le dialogue avec le microenvironnement) :

  • Microtubules
  • Filaments d’actine
  • Filaments intermédiaires
  • Intégrines (protéine transmembranaire faisant le lien entre la matrice extracellulaire et la cellule)
  • Protéines de jonction (lien entre les filaments entre eux permettant la formation du réseau)
  • Protéines chapeau (permettent de figer)
  • Moteurs moléculaires (bras de dynéine, actine, myosine)
  • Points d’adhésion focaux (intégrine + protéines de liaison)
  • RHO et RAC (petites molécules chimiques)
17
Q

Rôles du cytosquelettes dans quelles fonctions cellulaires ?

A

Rôle du cytosquelette dans toutes les fonctions cellulaires :

  • Polarisation de la cellule
  • Forme de la cellule
  • Prolifération (cellules entrent en lien entre elles et se transmettent des signaux de prolifération cellulaire)
  • Mobilité
  • Différenciation
  • Mécano-transduction
  • Ancrage enzymatique
  • Expression de gènes
18
Q

Migration cellulaire et biomécanique

2 éléments faisant varier la vitesse de migration ?

A
  • Rigidité du milieu : faut un bon équilibre entre souplesse et rigidité du substrats qui ne doit être ni trop souple ni trop rigide pour permettre la migration cellulaire, d’où l’aspect en cloche de la courbe de la vitesse de migration cellule en fonction de l’adhésivité du substrat.
  • type cellulaire : La vitesse de migration est également différente en fonction du type cellulaire. Par exemple, les kératinocytes de la peau de poisson doivent migrer vite et donc le substrat doit être en rapport.
    Les fibroblastes n’ont en revanche pas besoin de ne regénérer rapidement et ne vont donc pas avoir la même vitesse de migration que les kératinocytes.
19
Q

Le réseau de cytosquelette est-il partour le même ?

A

Un déséquilibre biomécanique va entrainer une déformation de la cellule et une polarité avec le réseau du cytosquelette qui va être différent en fonction du pôle de la cellule.

La migration est la résultante d’un déséquilibre mécanique avec la création d’une polarité antéro-postérieure.

20
Q

Biomécanique et listeria

A

Au niveau du lamellipode, il y a des protéines CDC42 (protéine spécifiques) et ARP 2-3 qui vont attirer l’actine globulaire pour entrainer la polymérisation et faire pousser la membrane pour faire avancer la cellule. La listeria est capable d’attirer les filaments d’actine de la cellule hôte car elle a son propre réseau ARP 2-3.

=> listeria fait former un lamellipode pour ensuite infecter les cellules voisines

21
Q

Quelle méthode pour mesurer la rigidité cellulaire du cytosquelette ?

A

La Magnetocytométrie (MTC) :

On va mettre des petites billes ferromagnétiques recouvertes d’un peptide synthétique qu’on appelle le RGD. Ce peptide va être reconnu par les intégrines de la cellule. Ces billes vont donc être fixer à la cellule via le cytosquelette. On met ensuite ces cellules dans un champs magnétique. On regarde alors le mouvement des billes fixée à la cellule par le cytosquelette. La bille attachée au cytosquelette d’actine via les intégrines représente une mini matrice qui tourne. La MTC permet d’évaluer le mode d’élasticité (donc le rigidité cellulaire) et de donner une notion d’adhésion. Elles vont tourner si la cellule ne les retient pas et on va mesurer la rotation
Moins la cellule est rigide, plus les billes magnétiques vont bouger.

22
Q

Quelle méthode pour mesurer l’adhésivité cellulaire ?

A

Microscope à forces atomique = spectroscopie de force : évalue l’adhésivité cellulaire

On a un manche relié à une bille qu’on met en contact avec une cellule et qui va s’attacher aux points focaux d’adhésion de cette cellule. On va ensuite venir détacher cette bille. La force qu’il faut pour décrocher la bille (force de rupture) est proportionnelle à la force
Emilie BEQUIGNONBiomécanique cellulaire
d’adhésivité présente au niveau du cytosquelette de la cellule avec un rôle essentiel joué par les intégrines.

23
Q

Différence du module élastique entre macrophage et cellules épithéliales

A

On va avoir une relation entre le champ magnétique qu’on va appliquer à la cellule et le module élastique de la cellule.
Dans le macrophage, le module élastique est constant même si le champ magnétique augmente parce que la rigidité reste identique. La cellule est quiescente et ne va pas bouger.
Pour la cellule épithéliale, le module élastique augmente avec le champs magnétique appliqué, ça veut dire qu’elle va mieux résister à la déformation.
On voit sur la reconstruction en microscopie électronique que les cellules épithéliales ont une tension interne plus importante (on voit les fibres de stress) que les macrophages.
Le module élastique est variable d’un type cellulaire à l’autre

24
Q
A
25
Q

Mécano-transducion :

A

Le microenvironnement peut donc transmettre un message au noyau via ce réseau d’actine d’intégrine. Il y a une signalisation très rapide vers le noyau qui est permise par la mécanique et pas seulement par des molécules chimiques. La vitesse de transmission d’une information par cette voie est de 30m/s c’est-à-dire qu’il faut 1ms pour transmettre une information par cette voie ce qui est beaucoup plus rapide que la translocation ou la diffusion. La voie biomécanique de communication de la cellule avec son environnement est très robuste et permet un dialogue très rapide.