Assurance qualité Flashcards
Quand peut survenir une lipémie
Post prandial ou pathologique (syndrome hyperlipémique)
Quel peut être l’impact de la lipémie sur la biochimie
Diminution Na/Cl +/- K; dilution
Quel peut être l’impact de la lipémie sur l’hématologie
Favorise hémolyse
Altère drastiquement morphologie cellules
Principales variations associées aux Greyhound
Augmentation paramètres érythrocytaires et VGM
Comptage plaquettaire et leucocytaire diminué
Augmentation créatinine et SDMA
Diminution T4 totale et libre
Qu’est-ce que les règles de WestGard
Basées sur calcul de la moyenne et de l’écart-type des résultats CQ
Exemple: règle 22ET
* Détection d’une non-conformité si 2 données (N=2) consécutives dépassent
2 écarts-types (L=2 ET) du même côté de la moyenne
=Détection de résultats non-conformes secondaires à une erreur analytique est importante car les résultats des échantillons de vos patients pourraient être significativement erronés
Lorsque détectés, on doit intervenir immédiatement
1. Identifier la cause
2. Procéder à une action corrective (ex: calibration/entretien de l’appareil,
formation du personnel…)
3. Analyser un 2e échantillon, documenter le dossier, aviser le propriétaire si nécessaire
Quoi faire lors de détection de résultats non-conformes
intervenir immédiatement
1. Identifier la cause
2. Procéder à une action corrective (ex: calibration/entretien de l’appareil,
formation du personnel…)
3. Analyser un 2e échantillon, documenter le dossier, aviser le propriétaire si nécessaire
Est-ce que faire un frottis sanguins est obligatoire?
NON (si en santé et paramètres normaux),
mais risque de manquer:
- léger foyer inflammatoire
- cellules/ inclusions atypiques
- microorganismes (microfilaires)
Quand refaire un différentiel leucocytaire?
Après avoir examiné 15 champs à 500x
- présence GR nucléés
- présence neutrophiles immatures
- présence c. atypiques
Appareil indique l’un des changements suivants:
- leucopénie/ neutropénie
- leucocytose marquée
- ..
Quoi faire en présence de GRs nucléés
Nb GR nucléés comptabilisé séparément GBs (Nb GR/100 GB)
Comptage leucocytaire doit être corrigé si +5
Quand appliquer un critère de “réanalyse”
Résultats atypiques/ incompatibles
Détection erreur pré-analytique
Qu’est-ce que l’assurance qualité?
Ensemble des mesures mises en place par un laboratoire afin de
maximiser sa performance et de garantir l’obtention de résultats
précis et fiables
La capacité d’un appareil à effectuer un test ne garantit
pas que les résultats générés soient précis!
De quoi dépend la qualité d’un résultat
- Qualité de l’échantillon
- Appareil utilisé
- Individus opérant l’appareil
Pourquoi l’assurance qualité est importante?
Majorité décisions cliniques basées
sur tests de laboratoire!
Qualité au laboratoire permet d’établir dx
et d’influencer adéquatement décision médicale = meilleurs soins
Quels éléments font partie de la phase pré-analytique?
- Requête/sélection du test
- Prélèvement de l’échantillon
- Transport/réception au laboratoire
Quels éléments font partie de la phase analytique?
- Préparation/manipulation
- Analyse
Quels éléments font partie de la phase post-analytique?
- Vérification résultats + rapport final
- Interprétation -> décision clinique
Quelle phase est la source la plus importante d’erreurs?
Phase pré-analytique (jusqu’à 75%!!)
- Sélection adéquate du test désiré et du type d’échantillon
- Obtenir un échantillon de bonne qualité
- Identification adéquate échantillons
- Réception échantillon au labo
Quelle erreur de la phase pré-analytique peut expliquer une thrombocytopénie sévère?
Résultats de la situation?
Tubulure de l’appareil obstruée par un caillot
= cause fréquente de rejet d’un échantillon !
Conséquences:
Résultat erroné:
* Mauvais diagnostic
* Mauvaise décision médicale (diagnostique et thérapeutique)
* Inquiétude inutile et frustration du propriétaire
* Possible bris de l’appareil ($ à $$$)
* Impossibilité de procéder aux analyses
Comment prévenir la présence du caillot dans la tubulure?
Vérifier la présence d’un caillot dans le tube
* Vérifier la présence d’amas plaquettaires au
frottis sanguin
Quel tube pour biochimie?
Tube sec (rouge!); sans additif
(tube hépariné possible)
Quel tube pour hématologie?
Tube EDTA
(hépariné/ citrate possible)
Quel tube pour urine?
Tube sec (rouge)
Quel tube pour cytologie de liquide?
Cyto: EDTA
Biochimie, culture: tube sec
Quel tube pour test de coagulation
Tube citraté
Quels changements seraient causés par biochimie sur tube EDTA
Hyperkaliémie
Chute calcium, magnésium, ALP
(changements sévères non compatibles avec la vie)
Quelle serait la conséquence d’un tube sous-rempli sur les protéines?
Dilution liquide par EDTA = SURESTIMATION au réfractomètre
(EDTA a très haut index de réfraction)
Pourquoi prélever dans jugulaire
Rapide
Débit + élevé
Moins de risque hémolyse ou caillots
Comment remplir un tube (hémato)
Laisser se remplir, pas forcer
Mélanger en renversant 5x
Min. rempli à 50%
(sinon augmente tonicité = diminution v. cellulaire)
Comment préparer envoi idéal pour biochimie
Idéalement, sérum séparé des c. avant envoi au labo
(échantillon décanté dans tube sec)
Laisser coaguler 30 min T pièce
Centrifuger (10 min 3300 rpm)
Séparer
Conséquence d’une coagulation incomplète (biochimie)
Formation fibrine soluble dans sérum:
- limite V de sérum disponible
- peut bloquer tubulures appareils
Pourquoi utiliser tube citraté pour test coagulation
et précaution à prendre lors prélèvement?
Citrate = chélate calcium = empêche formation caillot
Aucun trauma tissulaire lors prélèvement !
aucun hématome sinon recommencer autre côté
Toujours bien remplir tube
Min. rempli 90%!!
sang:citrate 9:1
Conséquence excès de citrate
Prolongation temps de coagulation
Comment envoyer test de coagulation
Centrifuger
Prélever plasma; tube de plastique sans additif (PAS verre; active cascade de coagulation_ ; identifier plasma citraté
vérifier présence de fibrine (rejet échantillon)
Congeler immédiatement ! envoyer avec de la glace
Comment envoyer tout échantillon au laboratoire externe
Contenant isolé contre gel et chaleur excessive
Liquide: glace pour garder réfrigéré
Contenant sécuritaire
Attention vapeur de formol: empêche fixation par alcool
(transporter échantillons formolés séparément autres échantillons)
Quelles informations donner au laboratoire externe
Toutes informations pertinentes:
- signalement
- nature, méthode, date prélèvement
- localisation anatomique et description macro lésion
- question spécifique, ddx
Impact délai d’analyse de biochimie:
- Glucose
DIMINUÉ:
- métabolisme c. = diminution 5-10% glucose/ heure à T pièce
inhibé par réfrigération
Impact délai d’analyse de biochimie:
- Potassium, phosphore, magnésium
AUGMENTÉS:
Fuite électrolytes GRs en présence ou sans hémolyse
Impact délai d’analyse de biochimie:
- Bicarbonates
DIMINUÉS
Diffusion CO2 vers air (limiter exposition air)
Impact délai d’analyse de biochimie:
- Gap anionique
AUGMENTÉ (hyperK et moins HCO3)
Impact délai d’analyse d’hématologie:
- Sur GR
AUGMENTATION VGM ET HÉMATOCRITE
DIMINUTION CGMH
Gonflement GRs
Aussi hémolyse in vitro
Impact délai d’analyse d’hématologie:
- Sur plaquettes
DIMINUÉS
Dégranulation/ agrégation et gonflement
Impact délai d’analyse d’hématologie:
Sur GB
DIMINUÉS (lyse cellulaire)
Différentiel c. moins précis (gonflement GB_
Impact délai d’analyse sur frotti sanguin:
Formation de petits corps de Döhle (faux toxogramme)
* Dès 4h à température pièce, 8h sur glace et 24h si réfrigéré
Hyposegmentation (faux virage à gauche)
Formation cellules apoptotiques +/- vacuolisation GB
Formation échinocytes
Formation c. fantôme
*Préparer frotti rapidement et envoyer avec tube
Quelles variables sont évaluées lors phase analytique
- Appareil bien entretenu et calibré
- Réactifs entreposés/préparés adéquatement
- Techniques de laboratoire adéquates (ex: pipetage, homogénéisation liquides, erreur de calcul)
- Vérifier présence substances interférentes
- Programme de contrôle de qualité
- Vérifie la performance des tests et la présence d’erreurs analytiques
L’hémolyse peut causer de l’interférence. Quelles en sont les causes.
Fréquent !
Peut être artéfactuelle (in vitro) ou pathologique (in vivo)
* Souvent in vitro (prélèvement traumatique, congélation sang entier, délai
séparation sérum des cellules, lipémie)
* Peut être difficile à différentier (in vivo si patient anémique + hémoglobinurie)
Peut interférer avec certains paramètres biochimiques/hématologiques
* Interférence spectrale, libération contenu des GRs, effet de dilution
Interférence de l’hémolyse sur biochimie
↑ Bilirubine, phosphore (si délai d’analyse), CK, AST, LDH, fer, Mg
* ↑ Potassium
* Seulement chez équin et certaines races canines asiatiques et bovines
* Contact prolongé entre GRs et sérum peut aussi faire ce changement
Interférence de l’hémolyse sur hématologie
↓ comptage GR et Ht -> ↑ CGMH (calculé)
* Contenu en Hgb reste le même (Hgb reste dans le sérum)
* Protéine totale au réfractomètre difficile à lire (ligne floue)
* Cellules fantômes (in vivo ou in vitro)
* Peut causer ↑ plaquettes et VPM (CFs comptées comme plaquettes)
Interférence de l’hémolyse sur l’Électrophorèse des protéines sériques
Peut causer un pic d’apparence monoclonal en région bêta
Comment éviter hémolyse in vitro
Prélèvement sanguin non traumatique
* Aiguille diamètre adéquat (pas trop petit) et éviter pression négative
trop importante
* Éviter de trop mettre d’alcool au site du prélèvement
* Ne pas forcer le sang dans les tubes
* Entreposage adéquat des tubes
* Tube sec: limiter le contact entre GRs et sérum (séparer rapidement)
Quelles sont les causes de lipémie
Peut être post-prandiale ou pathologique (syndrome hyperlipidémique)
En quoi la lipémie interfère avec la biochimie?
↓ Na/Cl +/- K (effet dilution avec certaines méthodes, ex: potentiométrie indirecte)
En quoi la lipémie interfère avec l’hématologie?
Favorise l’hémolyse
* Altère la morphologie des cellules
↑ protéine totale au réfractomètre (lipides ont haut index réfraction lumière)
* ↑ Hgb -> ↑ CGMH (interférence spectrale)
* Utiliser CHCM (mesuré directement dans GR)
* Hgb peut être calculé:
* Possible ↑ plaquettes (particules lipidiques comptées comme des plaquettes)
Comment éviter lipémie
Jeûne de 8-12h, mais parfois impossible à éviter…
* Présentation aux urgences
* Lipémie associée à une maladie (ex.: diabète, hypothyroïdie)
* Ultracentrifugation du sérum permet de ↓ lipémie (14 500 rpm, 10 min)
* Sépare le sérum des lipides (couche lipidique se forme au-dessus)
* Sérum peut être réfrigéré avant
* Dosage triglycérides doit être fait avant, sinon résultat sera faussement ↓
À quoi est associée l’ictère
Condition pathologique
Comment l’ictère interfère sur biochimie?
Peut interférer avec certains analytes
* Ex: ↓ Protéine totale, créatinine
Comment les corps de heinz peuvent influencer l’hématologie?
Grande qté CH (> 50% GRs) peut interférer avec certains paramètres
hématologiques
Hématologie
* ↑ Hgb -> ↑ CGMH (interférence spectrale)
* Utiliser CHCM et Hgb peut être calculée
* Voir section lipémie
Quelles variables sont incluses dans la phase post-analytique?
Ensemble variables associées à la transmission résultats au vétérinaire:
- Transcription résultats (ex: mauvaise valeur transcrite, pas le bon patient)
- Système automatisé permet de limiter les erreurs
- Intervalle de référence adéquat pour l’espèce (… la race, l’âge) : ex. greyhound !!
Comment contrôler les facteurs analytiques
Plusieurs volets doivent être intégrés
* Rédaction des procédures opérationnelles normalisées (PON)
* Formation du personnel
* Validation, maintenance et calibration des appareils
* Programme de contrôle de qualité
* Procédures statistiques
* Procédures non-statistiques (ex: validation résultats, frottis sanguin)
Qu’est-ce qu’un PON
Procédure opérationnelle normalisée (PON)
Documents officiels décrivant l’ensemble des étapes à suivre afin d’effectuer
une procédure
Permet de standardiser les procédures et de s’assurer qu’elles sont adéquatement effectuées par tout le personnel
Exemple
* Comment prélever/préparer ces échantillons pour une analyse spécifique
À quelle fréquence passer les contrôles
Idéalement, 1x/jour si l’appareil est utilisé quotidiennement
* Au minimum 1x/semaine
Permet de rapidement détecter un problème avant que l’on se
questionne sur la validité de résultats cliniques
Moins un appareil est utilisé, plus le CQ devient important
* On a plus de chances de détecter un problème analytique quand un
appareil est fréquemment utilisé
Comment comptabiliser les données de contrôle qualité?
Graphique de Levey-Jennings
- Suivre données de façon séquentielle et
chronologique
- Résultats des contrôles comparés à une moyenne et un écarttype préalablement déterminés ou fournis par le manufacturier
Qu’est-ce que les règles de Westgard
Des « règles de Westgard » sont ensuite appliquées afin de détecter
des erreurs analytiques
* Excellent moyen de détecter des résultats anormaux mêmes si
ceux-ci sont toujours dans les normes
* Détectent les erreurs systématiques (dérive progressive ou
décalage brusque) et les erreurs aléatoires
Basées sur le calcul de la moyenne et de l’écart-type des résultats CQ
Notation NL
* N: nombre de données non conformes
* L: limite statistique à respecter
Exemple: règle 22ET
* Détection d’une non-conformité si 2 données (N=2) consécutives dépassent
2 écarts-types (L=2 ET) du même côté de la moyenne
détection de résultats non-conformes secondaires à une erreur analytique est importante car les résultats des échantillons de vos patients pourraient être significativement erronés
Lorsque détectés, on doit intervenir immédiatement
1. Identifier la cause
2. Procéder à une action corrective (ex: calibration/entretien de l’appareil,
formation du personnel…)
3. Analyser un 2e échantillon, documenter le dossier, aviser le propriétaire si nécessaire
Comment valider les données en hématologie
procédures de CQ « non statistiques » peuvent également
être effectuées
* Validation des paramètres érythrocytaires
* Validation du comptage plaquettaire
* Examen du frottis sanguin
* Détermination des critères de révision par un professionnel medical
* Détermination des critères de réanalyse
Comment valider les données pour paramètres érythrocytaires
Comparaison de l’Ht calculé (GR x VGM/10) vs mesuré (microHt)
* Maximum 3% d’écart
* Exclure une cause non analytique (ex: agglutination)
* Réanalyse, vérifier les contrôles/faire une calibration…
MicroHt est plus précis et peut être utilisé pour calculer CGMH
Au CDVUM: contrôle microHt est fait systématiquement lors d’anémie
Comment valider les données du comptage plaquettaire
Toujours valider une thrombocytopénie!
1. Exclure la présence d’un caillot dans le tube
2. Exclure la présence d’amas plaquettaires au frottis
* Jugé si le comptage est « suffisant »
* Ex: présence de ³ 3 gros amas ou de nombreux petit amas
3. Faire un comptage manuel au frottis (attention: méthode imprécise!)
* Nb Plq par champs à 1000x sur 10 champs (zone de lecture)
* Calculer la moyenne et multiplier par 20 = Nb Plq x109/L
4. En cas de doute, faire un contrôle sur un nouvel échantillon!
Qu’est-ce qu’un frotti sanguin permet de détecter?
lément essentiel d’une formule sanguine complète
Doit être exécuté par une personne qualifiée (technicien ou vétérinaire)
Permet de détecter:
* Pathologies de globules rouges
* Toxogramme et virage à gauche
* Cellules atypiques
* Microorganismes
* Amas plaquettaires
Est-ce une étape obligatoire?
Non si…
* Patient en santé
* Tous les paramètres sont normaux
Cependant, risque de manquer…
* Léger foyer inflammatoire (paramètres leucocytaires peuvent être « normaux »)
* Cellules/inclusions atypiques
* Microorganisme (ex: microfilaires)
Quand refaire différentiel leucocytaire?
Après avoir examiné ~15 champs à 500x
* Présence de GRs nucléés
* Présence de neutrophiles immatures
* Présence de cellules atypiques
L’appareil indique un des changements suivants:
* Leucopénie/neutropénie
* Leucocytose marquée
* Lymphocytose
* Éosinophilie
100 GBs devraient être comptés
pour chaque 10x109/L de GBs
Quoi faire en présence de GRs nuclées?
Nb de GRs nucléés est comptabilisé séparement des GBs
* Façon de rapporter: Nb GRn/100 GBs
Comptage leucocytaire doit être corrigé si ≥ 5 GRs nucléés
* GRs nucléés seront identifiés comme des GBs par l’appareil
Comptage leucocytaire corrigé = GB x 100
100 + GRn
Quels sont les critères de révision
- Arrière-plan atypique
* Matrice extracellulaire abondante (ex: croissants de protéines)
* Possibilité de microorganisme - Critères érythrocytaires
* Présence de pathologie érythrocytaire en quantité significative
* Réticulocytose importante
* Anémie modérée à sévère
* Présence de > 10 GR nucléés/100 GB
Critères leucocytaires
* Neutropénie
* Virage à gauche sévère (> 3x109/L)
* Leucocytose sévère (> 40x109/L)
* Lymphocytose (> 10x109/L)
* Monocytose (> 4x109/L)
* Éosinophilie (> 4x109/L)
* Basophilie (> 1x109/L)
* Présence d’inclusions atypiques
* Présence de cellules atypique
Critères plaquettaires
* Thrombocytose marquée (> 900x109/L)
* Thrombocytopénie (< 100x109/L)
* Présence d’inclusions atypique
Critères de réanalyse
- Résultats atypiques/incompatibles
- Détection d’une erreur pré-analytique
