Aspects biochimiques de l’hématologie II

Question 1

Qu’est-ce que sont les réticulocytes? Combien de temps s’éjournent-ils dans la moelle ?

Answer 1

Sont les précurseurs immédiats des GR et contiennent de l’ARN résiduel (permet synthèse de nouvelle molécules d’hémoglobine

Séjournent environ 1-2 jours dans la moelle et sont libérés dans la circulation, puis après un autre 1-2 jours, ils perdent ce qu’ils leurs restent d’ARN → GR matures.

Question 2

Qu’est-ce qui amplifie la mort des érythroblastes dans la moelle?

Answer 2

Lors de différents types d’anémies: Thalassémie majeure et anémie mégaloblastique

Question 3

Indique moi les informations suivantes sur les globules rouges :
Temps de maturation
Production par jour
Concentration dans le sang
Durée de vie

Answer 3

Temps de maturation : 3-5 jours
Production par jour : 250 x 10^9 Gr/jour
Concentration dans le sang : 4-5 x 10^9 GR/mL
Durée de vie : 90-120 jours
Forme :

Question 4

Qu’elle forme a le globule rouge et pourquoi?

Answer 4

disque biconcave (forme de beignet) afin de maximiser leur surface (30% de plus qu’une cellule sphérique) et augmenter l’échange des gaz avec les tissus.

Question 5

Comment est régulé la synthèse des GR? Comment produisent-ils de l’énergie? Combien est-ce qu’il contient de molécules d’hémoglobines?

Answer 5

Synthèse : En fonction de la pO2, les reins régulent la synthèse de GR via la production d’érythropoïétine.

Énergie : GR produisent de l’ATP (processus anaérobique) via le cycle d’Embden-Meyerhof, donc ne consomme pas l’O2 transportée.

Hémoglobines : Un GR contient environ 250 x 10^6 molécules d’Hb, donc transporte environ 2 x10^9 de molécules d’O2 c.-à-d.8 atomes / groupement hème.

Question 6

Qu’est-ce que l’hémoglobine?

Answer 6

L’Hb est une protéine tétramérique (unité principale et active du GR).

Question 7

Qu’elle est la composition normale d’une hémoglobine d’un adulte?

Answer 7

~97% d’HbA : composé de 2 chaînes béta et 2 chaînes alpha
~1,5 – 3,6% d’HbA2 : composé de 2 chaînes alpha et 2 chaînes delta
<1% d’HbF : composé de 2 chaînes alpha et 2 chaînes gamma

Question 8

Quelle type d’hémoglobine a plus d’affinité avec l’oxygène?

Answer 8

Alpha2gamma2 (HbF)

Question 9

Ou est produit l’hémoglobine dans le GR? Qu’elle est l’étape limitante? Qu’est-ce qui la stimule et comment est-elle inhibée?

Answer 9

Dans la mitochondire

Étape limitante : conversion de la glycine et de l’acide succinique en ALA (delta-aminolevulinic acid ou acide delta-aminolevulinique) par la ALA synthétase en présence de vitamine B6

Stimulation : érythropoïétine
Inhibition : Inhibée par l’Hb elle-même

Question 10

Qu’elles sont les étapes de synthèse de l’hémoglobine?

Answer 10

Question 11

Est-ce qu’on a plus de risque d’avoir des complications à cause d’une béta ou d’une alpha thalassémie??

Answer 11

Béta thalassémie puisque possède seulement 2 gènes (chromosome 11) pendant qu’alpha on a 4 gènes (chromosome 16)

Question 12

Quels sont les fonctions de l’hémoglobine?

Answer 12

La forme biconcave des GR favorise l’échange d’O2 et de CO2 a/n des poumons ou des tissus avec l’Hb

Hb se sature en O2 a/n des capillaires pulmonaires, car :
* La pression partielle en O2 est augmenté
* L’affinité de l’Hb pour l’O2 est augmenté

L’Hb libère l’O2 a/n des tissus, car :
* La pression partielle en O2 est diminué
* L’affinité de l’Hb pour l’O2 est diminué

Question 13

Est-ce qu’on a des conséquences plus importantes si on a des délétions au niveau du gène alpha-1 ou alpha-2?

Answer 13

Alpha-2 puisqu’il est seulement responsable de 70% des chaînes. Gènes alpha-1 fait moins de chaînes (30%)

Question 14

Qu’elle est la structure de l’hème (alpha2béta2) ? Est-ce qu’il possède du fer 2+ ou 3+ ?

Answer 14

*Est liée à chacune des 4 globines

*A un anneau porphyrine lié à un atome de Fer qui lie de façon réversible
une molécule d’O

Fer2+ : Forme active de l’Hb humaine. On parle d’oxy-Hb (Interaction
réversible avec O2)

Fer3+ :On parle de mét-Hb (Interaction impossible avec O2, donc impossibilité de libérer l’O2 aux tissus! Liaison avec ‘‘-OH-’’. Taux normal de 1 à 2% chez l’humain sain)

Question 15

Est-ce que le Fer2+ ou Fer3+ ont des liaisons réversibles ou irréversibles avecà l’O2?

Answer 15

Fer2+ = réversible

Fer3+ = irréversible, en fait, ne se lie pas à l’O2

Question 16

Qu’elle équilibre respecte le transport de CO2 aux tissus?

Answer 16

Respecte l’équation d’Henderson-Hasselbalch

Question 17

Qu’elles sont les 2 conformations de l’Hb? Sous qu’elle conformation se retrouve l’oxy et la désoxyhémoglobine?

Answer 17

Conformations : ‘R’’ et la ‘‘T’’

1) L’oxy-Hb est la forme relaxe (R) d’Hb : affinité de l’Hb augmente pour l’O2

2)La désoxy-Hb est la forme tendue (T) d’Hb et est caractérisée par des liens électrostatiques entre des globines :
* Son affinité dininue pour l’O2
* Son affinité augmente pour la 2,3-DPG qui à son tour diminue davantage l’affinité de l’hème pour l’O2

Question 18

La forme R et T se retrouve majoritairement ou dans le corps?

Answer 18

Forme R = poumons puisque oxy

Forme T = tissus périphérique puisque désoxy

Question 19

Comment est régulé l’affinité de l’hémoglobine pour l’O2?

Answer 19

1)Les liens électrostatiques sont brisés quand une molécule d’O2 se lie à l’Hb, ce qui génère de l’oxy-Hb (forme R)
2) La liaison d’une molécule d’O2 à l’Hb → augmente l’affinité des autres sites pour l’O2
(comparativement à la forme T) → ce phénomène de ‘‘tout ou rien’’ est appelé :
coopérativité

Donc, + tu as d’o2 et plus tu as de l’affinité à l’O2 (va jusqu’à 4 O2 pour une hémoglobine)

Question 20

Nomme moi des facteurs qui augmentent et diminuent l’affinité de l’O2

Answer 20

Augmente :
* Augmentation pH
* Diminution pCO2
* diminution 2,3-DPG
* Diminution température

Diminution :
* Diminue pH
* Augmentation pCO2
* Augmentation 2,3-DPG
* Augmentation température

Question 21

Qu’est-ce que l’effet de Bohr?

Answer 21

Courbe de l’effet du pH ou de la pCO2 sur l’affinité de l’O2 pour l’Hb :
* A) dans les tissus
* B) dans les poumons

Déplacement de la courbe :
* Vers la droite : On diminue l’affinité de l’Hb pour l’O2
* Vers la gauche : On augmente l’affinité de l’Hb pour l’O2

Question 22

Que fait le 2,3 DPG? Par quoi est-il synthétisé? Est-ce qu’elle augmente ou diminue la P50?

Answer 22

Synthèse : Produit lors de la glycolyse (voie de Rappoport-Luebering), s’accumule dans le GR et s’insère entre les 2 chaînes béta

Rôle : Sa liaison à l’Hb favorise et stabilise la conformation ‘‘T’’ et diminue l’affinité de l’O2 à l’Hb, donc favorise la libération de O2

P50 : La P50 est augmenté en présence de 2,3 DPG. La concentration de cette dernière est augmenté quand il y a une diminution d’O2 (ex: hypoxie ou anémie)

Question 23

Quels types d’anomalies peuvent affecter les globules rouges?

Answer 23

1) Anomalies pouvant affecter le métabolisme du GR
* Mutations des gènes associées aux enzymes de la glycolyse

2) Anomalies pouvant affecter l’intégrité du GR
* Anomalie des protéines structurales membranaires ou intracellulaires

3) Anomalies pouvant affecter l’Hb:
* Mutations de gènes des chaînes de l’Hb
* Anomalie pouvant affecter de façon qualitative et quantitative l’activité de l’Hb
* Carence en cofacteur impliqué dans la synthèse de l’Hb

Question 24

Nomme moi des conséquences cliniques d’anomalies assocées aux GR avec un exemple.

Answer 24

• Troubles anémiques : diminue de l’Hb ce qui entraîne fatigue, pâleur, faiblesse, etc.
• Hémolyse : destruction des GR survenant précocement (<120 jours)
• Drépanocytose ou ‘‘Sickle Cell’’ (anémie falciforme) : polymérisation de l’HbS (variant d’Hb) suite à une désoxygénation (Hypoxie !!!)
• Polycythémie :augmentation du nb de GR
  1) Polycythémie vraie : rare trouble de croissance de la moelle osseuse.
  2) Polycythémie secondaire : réponse à un apport d’O2 limité attribuable au
  tabagisme et à un séjour à haute altitude.
• Cyanose : coloration bleutée que prend la peau et les muqueuses lorsque le
  sang contient plus de 5% d’Hb désoxygénée.

Question 25

Qu'est-ce que des hémoglobinopathies?

Answer 25

* Maladies héréditaires de la formation de l’Hb * Déficits génétiques variables de la synthèse des chaînes alpha, béta, delta ou gamma

Question 26

Nomme moi les 2 types d'hémoglobinopathies. Décrit moi et donne 2 exemples

Answer 26

Thalassémies (hémoglobinopathies quantitatives) : Groupe de maladies héréditaires caractérisées par la diminution ou l'absence de production d'une ou plusieurs des quatre chaînes formant l'Hb des Gr * Thalassémie-béta : diminution synthèse de chaîne béta * Thalassémie-alpha : Diminution synthèse de chaîne alpha * Thalassémie-gamma : diminution synthèse de chaîne gamma Variants de l'hémoglobine (hémoglobinopathies qualitatives ou structurelles) :Modifications héréditaires structurelles de chaînes isolées d’Hb * Drépanocytose : HbSS * Hémoglobinose SC : HbSC * Hémoglobinose C : HbCC etc...

Question 27

Qu'elles sont les conséquences d'une thalassémie?

Answer 27

Anémie pouvant être assez importante pour avoir recourt à des transfusions sanguines. * La gravité de ces différentes formes de thalassémies dépend du type d’anomalie (dépend du nb de gènes affectés).

Question 28

Qu'est-ce que des alpha-thalassémies? Elles affectent la synthèse de quoi? Comment compenser ce manque?

Answer 28

Définition : Se caractérisent par un déficit de chaîne de globine-alpha dans l’Hb Synthèse : Elles affectent la synthèse des 3 sortes d’Hb : HbA, HbA2 et HbF Compensation :Puisque toutes contiennent la chaîne alpha ; dans ces cas la vie n’est possible que grâce à la formation de quantités importantes d’Hb anormales ne se composant que des chaînes dont la synthèse n’est pas entravée (rare). Ex: * L’HbH (béta4) * L’Hb Bart's (gamma4)

Question 29

Nomme moi des désordres des alpha-thalassémies, le génotype, le VGM, s'il y a présence d'anémie et à quoi ressemble l'électrophorèse?

Answer 29

Question 30

Qu'est-ce que des beta-thalassémies? Elles affectent la synthèse de quoi?

Answer 30

Définition : Les β-thalassémies se caractérisent par l’absence de la chaîne β de l’Hb Synthèse : seule la synthèse de l’HbA est entravée

Question 31

Nomme moi les 3 types de béta-thalassémie et des caractéristique cliniques des patients

Answer 31

La thalassémie hétérozygote (béta / béta0) ou thalassémie mineure * Bien portants * Pas anémiques * GR augmenté * Exceptionnellement, une splénomégalie de petite taille peut être palpée sous le grill costal La thalassémie intermédiaire (béta+/ béta+) : formes atténuées de béta-thalassémies homozygotes. Ces formes sont caractérisées par : * Bonne tolérance à l'anémie * Activité normale * Croissance staturo-pondérale (N) chez l'enfant * Patients peuvent mener une existence (N) sans être transfusés * Les thalassémies intermédiaires représentent 5-10 % de l'ensemble des béta-thalassémies homozygotes La béta-thalassémie homozygote majeure (béta0/ béta0) : * Anémie microcytaire sévère (30-70 g/L) * Déformations morphologiques * Hypertrophie de la lignée érythroblastique * Splénomégalie * Hépatomégalie * Surcharge en fer * Parfois, des complication de lithiases biliaires

Question 32

Comment traiter une b-thalassémie homozygote majeure?

Answer 32

1) Le traitement conventionnel (i.e. la transfusion sanguine, la chélation du fer, la splénectomie) 2) La transplantation médullaire (moelle osseuse)

Question 33

Nomme moi des désordres des beta-thalassémies, le génotype, le VGM, s'il y a présence d'anémie et à quoi ressemble l'électrophorèse?

Answer 33

Question 34

À quel moment pouvons-nous considérer la présence d’une thalassémie chez un patient?

Answer 34

1. Le nb de GR est plus grand ou égale à la limite supérieure de la normale. 2. Le VGM est < à ce qui est prévu par rapport à la [Hb]. 3. L’indice de déviation du volume érythrocytaire (IDVE), les réticulocytes et la ferritine sont normaux. 4. Présences de certaines cellules (ex.: ¢ cibles, ¢ en faucille, sphérocytes, ovalocytes, ¢ avec corps d’Howell jolly, etc.)

Question 35

Qu’est-ce qu'une maladie falciforme ?

Answer 35

Ensemble de maladies héréditaires dont les plus fréquentes sont l’anémie falciforme et la S/béta-thalassémie. En général, le terme maladie falciforme est utilisé pour décrire un groupe d’anomalies sanguines génétiques des GR caractérisés par une prédominance de l’HbS

Question 36

Est-ce que la maladie falciforme est répendue?

Answer 36

OUI, elle est plus répandue que toute autre maladie génétique

Question 37

qu'elle est la mutation de l'anémie falciforme?

Answer 37

Mutation ponctuelle d’un codon de la chaîne de globine béta sur le chromosome 11 Pour l’Hb S : acide glutamique → valine (acide aminé en position 6) = + hydrophobe

Question 38

Est-ce que les mutants de chaîne béta positivement chargé constitue la majorité de l'Hb total chez un hétérozygote?

Answer 38

Non, au contraire. De plus, sont d’avantages réduits en présence d’alpha-thalassémie

Question 39

Quel est le % d'HbS présent en fonction du nombre de gène alpha actif?

Answer 39

4 = 35-45% 3= 30-35% 2= 25-30% 1 = 17-25%

Question 40

Quels sont les maladies falciformes les plus fréquentes et donne en 2 qui sont plus rares

Answer 40

Fréquent : HbS et béta-Thalassémie (bétao ou béta+) ou HbC Plus rares : Hb SO-Arab ; HbSD ; HbSE ; HbS-Lepore

Question 41

Quel est le mécanisme du HBs en relation avec l'O2?

Answer 41

* Lorsque déoxygénée, l’HbS polymérise et le GR se déforme * La déformabilité du GR est diminué ce qui provoque une vaso-occlusion * diminue de la distribution O2 * Hémolyse chronique

Question 42

Est-ce qu'il existe différentes varités de syndromes falciformes? Donne des exemples.

Answer 42

Oui, Exemple : HBSC, dépranocytose HbS/B0-thalassémie, dépranocytose HbS/B+-thalassémie, Dépranocytose, HbS/1alpha-thalassémie, dépranocytose avec persistance héréditaire de l'HbF (HPFH)

Question 43

Parle moi de la maladie de dépranocytose HbS/B0-thalassémie

Answer 43

* Patients atteints de la béta0-thalassémie drépanocytaire ont une maladie grave, mais qui peut être moins sévère que la maladie HbSS. * Cette variante est plus fréquente dans les régions grecque et méditerranéenne que dans la population afro-américaine. * Absence d’HbA à l’électrophorèse (sauf si pt transfusé). * Se distingue de la maladie HbSS par la présence de GR hypochromes et microcytaires et par l’augmentation des taux d’HbA2 * Prise en charge similaire à celle des individus atteints de drépanocytose (HbSS).

Question 44

Fait moi un tableau en disant + ou - des proportion de chacun des Hémoglobines en fonction des différentes drépanocytoses ainsi que b-thal et normal.

Answer 44

Question 45

Parle moi de la maladie de l'HbSC

Answer 45

* Personnes atteintes exposées aux mêmes complications que celles atteintes de la maladie HbSS (mais fréquence réduite). * Anémie légère et splénomégalie peut être la seule découverte à l’examen physique. * Frottis sanguin montre (cellules cibles, cellules repliées, parfois de drépanocytes, parfois des cellules contenant des cristaux d’Hb). * HbS et HbC équimolaire à l'électrophorèse.

Question 46

Parle moi de la maladie de dépranocytose HbS/B+-thalassémie

Answer 46

* Patients atteints de la béta+-thalassémie drépanocytaire ont une maladie moins grave que la maladie HbSS. * Gravité de la maladie est inversement proportionnelle à la quantité d’HbA présente (varie de 5 à 30%). * Frottis montre la présence de GR microcytaires hypochromiques et les taux d’HbA2 sont augmenté. * Prise en charge individualisée en fct de l’évolution clinique du pt.

Question 47

Parle moi de la maladie de dépranocytose Dépranocytose, HbS/1alpha-thalassémie

Answer 47

* Manifestations cliniques et degré d’anémie dans l’alpha-thalassémie falciforme généralement moins sévères que la forme HbS/Béta0-thalassémie. * Niveaux d’HbA2 augmente en fonction du nb de délétions des gènes de globine alpha.

Question 48

Parle moi de la maladie de la dépranocytose avec persistance héréditaire de l'HbF

Answer 48

* Personnes atteintes ne sont pas anémiques * Ne souffrent pas d’épisodes vaso-occlusifs * Peuvent avoir des taux d’HbF aussi élevés que 35%.

Question 49

Qu'on tendance à faire les HbS en absence d'O2?

Answer 49

les HbS ont tendance à s’agréger entre elles en déformant le GR qui devient ainsi falciforme

Question 50

Nomme moi quelques signes et symptomes cliniques de la drépanocytose

Answer 50

Pulmonaire : * Syndrome thoracique aigu * Dyspnée chronique * Asthme * Hypertension pulmonaire * Maladie thromboembolique veineuse * Fibrose pulmonaire * Trouble respiratoire du sommeil Peau : * Ulcères aux jambes * Syndrome myofasciale Foie : * Aspléniefonctionnelle: risque d’infections sévères * Surcharge en fer (transfusion) * Calculs biliaires * Toxicité médicamenteuse (hydroxyurée) * Maladies hépatiques (aigu ou chronique) secondaires à une infection au VHC * Syndrome thoracique aigu * Dyspnée chronique * Asthme * Hypertension pulmonaire * Maladie thromboembolique veineuse * Fibrose pulmonaire * Trouble respiratoire du sommeil * Ulcères aux jambes * Syndrome myofasciale Grossesse : * Complications fœtales : avortement spontané, restriction de croissances intra-utérine, mort in utero, faible poids à la naissance * Complications maternelles : synd. thoracique aigu infections urinaires, endométrite, prééclampsie, pyélonéphrite Pénis : * Priapisme * Impuissance Vue : * Rétinopathies prolifératives * Hémorragies rétiniennes (petites tâches couleurs saumon) * Décollement de la rétine * Perte de la vue Coeur : * Cardiopathies non spécifiques * Augmentation du débit cardiaque * Infarctus aigu du myocarde * Insuffisance cardiaque Vasculaire : * Vaso-occlusions (c’est LA marque des complications aigus des crises drépanocytaires) * Douleurs ’’insuportables’’ aux extrémités, à la poitrine et au dos * Hypertension Rein : * Insuffisance rénale * Hématuries indolores * Protéinuries * Choliques rénales * Diabète néphrogénique * Carcinome médullaire rénal Cerveau : * Complications neurologiques * AVC / ICT * Compression ou infarctus de la moelle épinière * Dysfonctionnement vestibulaire * Surdité de perception * Troubles psychosociaux

Question 51

Nomme moi 3 traitements pour l'anémie falciforme :

Answer 51

* Enseignement aux parents/professionnels * Acide folique * Antibioprophylaxie/vaccination * Hydroxyurée * Transfusions sanguines : ponctuelles vs chroniques * Greffe de cellules souches hématopoïétiques (GCSH) * Thérapie génique * Traitements expérimentaux

Question 52

C'est quoi le mode d,action de l'hydroxylurée? Quel est sa limite?

Answer 52

Stimule la synthèse d’HbF. * Cela permet de compenser la mutation survenue a/n de la chaîne béta lors de la drépanocytose. Ainsi, le transport de l’O2 s’effectue normalement et le risque d’anoxie liée à la drépanocytose est limité. Limite : l’augmentation du taux d’HbF est modérée et il se pourrait que la molécule intervienne par d’autres biais, comme une limitation de la réaction inflammatoire.

Question 53

Qu'est-ce que l'hémoglobinose C? Est-ce qu'il est fréquent?

Answer 53

Mutation ponctuelle du codon de la chaîne de globine béta sur le chromosome 11 glutamate → lysine Deuxième variant le plus étudié après l’HbS

Question 54

Symptomes des patients avec hémoglobinose C

Answer 54

Hétérozygotes HBAC : * asymptomatiques * peuvent présenter une microcytose modérée avec une résistance osmotique accrue Homozygotes HbCC: présentent souvent une hémolyse compensée avec splénomégalie individus avec une HbC/béta0thalassémie : forme plus sévère et peut s’apparenter exceptionnellement à une béta-thalassémie intermédiaire hétérozygotes HbS/C : présentent une anémie hémolytique faible à modérée associée à des vaso-occlusions.

Question 55

Quelles sont les manifestation de l'hémoglobinose C? Qu'est-ce qu'on voit sur frottis?

Answer 55

peu de manifestation rapportées, sauf pour la présence de splénomégalie presque constante. Hétérozygote : asymptomatique et le taux d’Hb est normal. Frottis généralement normal à l’exception d’une légère anisocytose et de cellules cibles Frottis : * Petites flèches noires : cellules cibles (30 à 100%) * Grosse flèche : crystal d’HbC * GR normocytaires

Question 56

Qu'est-ce que le C-Harlem?

Answer 56

C-Harlem est un état pathologique qui a la même mobilité électrophorétique que l'HbC sur l'électrophorèse alcaline. Mais cette molécule, semblable à l'HbSS, peut se polymériser lorsqu'elle est désoxygénée et a donc une évolution clinique similaire à celle de la drépanocytose.

Question 57

Qu'est-ce que l'hémoglobinose E?

Answer 57

* Mutation ponctuelle du codon de la chaîne de globine béta sur le chromosome11 * Pour l’Hb E : acide glutamique → lysine * parfois classée parmi le hémoglobinopathies thalassémiques à cause d'un nouveau site d'èpissage

Question 58

Symptomes des patients avec hémoglobinose E

Answer 58

Hb AE : normal OU microcytose isolée OU légère anémie microcytaire; pas de suivi particulier * Hb EE : idem à Hb AE, asymptomatique, Dxd Hb E/βthal mineur * Hb Eβthal : tableau clinique variable, peut se comporter comme une β-thalassémie majeure

Question 59

Quelles sont les manifestation de l'hémoglobinose E? Qu'est-ce qu'on voit sur frottis?

Answer 59

Dans les cas d’hémoglobinose E, on retrouve rarement de l’anémie, ainsi que des évidences d’hémolyses. La FSC ressemble généralement à celle d’un patient ayant un trait béta-thalassémique. Frottis : * Flèches bleues : cellules cibles * Flèches jaunes : fragments de GR * Flèche noire : GR microcytaire

Question 60

Qu'est-ce que l'hémoglobinose H?

Answer 60

HbH parfois nommée : Fast Hemoglobin (fait réf. à sa vitesse de migration, par rapport à l’HbA, lors d’un test électrophorétique) Il a augmentation de l’affinité de l’Hb pour l’O2

Question 61

Symptomes des patients avec hémoglobinose H

Answer 61

Anémie hémolytique variable (modérée à sévère) hypochromique avec splénomégalies Crises anémique généralement causées par : * Infections * Médicaments oxydants * Hyperthermie * Grossesse

Question 62

À quoi ressemble HbH au frottis?

Answer 62

Présence de GR (allure de balles de golf) Présence de petites inclusions suite à la précipitation d’HbH ayant réagi avec le colorant Flèches bleues : cellules cibles * Flèches jaunes : fragments de GR * Flèche noire : GR microcytaire

Question 63

Qu'est-ce que des hémoglobines instables ? Qu'est-ce que cela cause? Nomme 2 exemples

Answer 63

Hémoglobinopathies caractérisées par la présence dans les GR d’une Hb instable par anomalie de la structure primaire Causes : responsable d’anémie hémolytique provoquée par les stress oxydatifs. L’Hb se dénature et précipite en amas dans les GR. Formation de corps d’inclusions prenant l’aspect de corps de Heinz Exemples : * Hb Genova * Hb Köln * Hb Bristol * Hb Seattle

Question 64

Comment est pris en charge les hémoglobinopathies au Québec?

Answer 64

Programme québécois de dépistage néonatal sanguin (PQDNS)

Question 65

Comment sont dépistés les hémoglobinopathies au PQDNS? Nomme moi quelques formes dépistés au PQDNS

Answer 65

Dépistage par chromatographie de l’hémoglobine (HPLC) et confirmation par électrophorèse capillaire. Formes dépistés : * Hb SS * Hb SC * Hb S beta° thalassémie * Hb S beta+thalassémie * Hb SD-Punjab * Hb SO-Arab * Autres formes sévères et cliniquement significatives: référence à un centre désigné

Question 66

Est-ce qu'un status de porteur est automatiquement donné aux parents lorsque les confirmations sont faites?

Answer 66

Non, divulgation sur demande actuellement privilégiée par le comité consultatif

Question 67

Quels sont les recommandations pour faire un diagnostique d'hémoglobinopathies?

Answer 67

Tests Préliminaires : *FSC, Bilan martial, Bilirubine, LD, Haptoglobine * Électrophorèse capillaire ouélectrophorèse sur gel en milieu alcalin(pH 9.2) * Tests de falciformation / Solubilité * Dosage quantitatif de l’HbA2 * Dosage qualitatif et quantitatif de l’HbF Identification des vairants d'Hb : * Électrophorèse capillaire ouélectrophorèse sur gel en milieu acide(pH 6.0 - 6.2) * Test de séparation des chaînes de globines par focalisation isoélectrique

Question 68

Comment sont vraiment fait les diagnostiques d'hémoglobinopathies?

Answer 68

Tests de soupçons : * FSC * Évaluation de l’HbH * Dosage du fer, de la transferrine et de la ferritine * Électrophorèse sur gel, capillaire ou HPLC: * Variants d’Hb * Dosage quantitatif de l’HbF et HbA2 Tests définitifs : * Évaluation de la structure des variants de l’Hb : * Test moléculaire (séquençage de l’ADN) * LC/MS (MALDI-TOF) * Détection de mutations (Thalassémies): * Test moléculaire (séquençage de l’ADN)

Question 69

Nomme moi des méthodes pour évaluer les hémoglobines

Answer 69

Méthodes électrophorétiques : Sur gel Électrophorèse capillaire HPLC

Question 70

Qu'elles sont les étapes de séparation des h'émoglobines pour faire de l'électrophorèse?

Answer 70

1) Isolement et lavage des GR à partir d’un prélèvement sur sang total. 2) À partir d’une solution hémolysante, on effectue la libération de l’Hb. 3) En électrophorèse capillaire, il y aura aspiration de l’hémolysatpar le système (Il faut se souvenir que les méthodes par gel ne sont pas soumises au même principe d’aspiration et de migration) 4) ) Les protéines (ici l’Hb) seront soumis à un courant électrique afin de favoriser la séparation des différents types d’Hb. La séparation de celles-ci se fera en fonction des charges de chacune des Hb (électroendosmose) 5)Le temps de sortie de chaque Hb dépendra de la charge de chacune * Permet la séparation des formes normales, des formes atypiques * Possibilité d’obtenir des pics composés à partir de chaînes normales (ex. : HbH, Hb Bart’s)

Question 71

Est-ce que différents types d'hémoglobines peuvent migrer au même endroit?

Answer 71

Oui

Question 72

Avantages de l'électrophorèse capillaire pour séparer les hémoglobines? inconvients?

Answer 72

Avantages : * Bonne performances pour doser les principales Hb, ainsi que les fractions mineures (HbA2 et F). * Technique ayant moins d’interférences associées aux différents variants d’Hb. * Bonne séparation entre l’HbA2 et l’HbC comparativement à l’approche par HPLC. inconvénients : * Peut nécessiter une autre technique de confirmation (électrophorèse capillaire, séquençage d’ADN).

Question 73

Dans l'électrophorèse capillaire ou gel, l'échantillon migre en fonction de quoi?

Answer 73

charge, de la taille de la molécule, de la force ionique, du pH du tampon et de la nature du support.

Question 74

Qu,elle est la particularité des gels?

Answer 74

Peuvent se faire en tampon acide ou alcalin

Question 75

Pourquoi les hémoglobines migrent à des endroits différents?

Answer 75

Les variants de l’Hb sont dus a des mutations de certains acides amines entrainant des charges de surface différentes et donc des mobilités différentes en électrophorèse.