Aplicaciones de micro arreglos de DNA, RNA Y proteínas Flashcards
Los micro arreglos son una metodología que permite la identificación de
Moléculas de AND O ARN mediante hibridacion en una estructura de vidrio o silicona
Principio de los micro arreglos
Hibridacion
Q es la hibridacion
Unión de 2 cadenas complementarias de ADN
Consiste en que distintos fragmentos de DNA X HIBRIDACION y x complementariedad de base se unen
Micro arreglos
Fundamento de micro arreglos
Hibridacion de ac nucleicos AND O ARN
-Principio de complementariedad
La detección es por
Fluorescencia BN marcadas
Se va obtener señal en donde haya hibridacion V O F
V
PERMITE LA LECTRURA DE MILES DE VARIANTES EN UN SOLO ENSAYO V o f
V
Tipos
ADN
ARN
Metilacion
Proteínas
Tipo de micro arreglo de ADN
SNPs: se detectan variantes genéticas especificas
Tipo de micro arreglo ARN
Análisis de expresión genética
Se realiza el cDNA, EL RNA es muy inestable
Tipo de micro arreglo de metilacion
Análisis y comparación de sitios de metilacion CpG
TIPO DE microarreglo de proteínas
Análisis de proteínas mediante la utilización de ac específicos
Se distribuyen en
Oligonucleotidos sobre una estructura de silicona(portaobjetos)
15-25 nucleotidos
Cuantas copias contiene un oligonucleotido
Miles
A los oligos se le agregan
Fragmentos de DNA derivado de librerías
Las variantes se analizan de manera simultánea V o f
Verdadero
El resultado se ve reflejado por
Fluorescencia
Las librerías son
Colecciones de clonas de DNA
Para generar las librerías se necesitan
Células del organismo a estudiar(leucocitos)-> extracción de DNA
Los cortes son con
Enzimas de restricción(digestión controlada)
Se van a generar fragmentos de restricción de distint tamaño que se
Translapan
Ya que esta el fragmento digerido se
Une al vector y se clona en bacterias o levaduras
Para cortar se necesita
Modificación de concentración y tiempo
