ANTICUERPOS ANTINUCLEARES EN INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA Flashcards
¿Cuál es el propósito principal del ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IIFT) en la prueba EUROPattern?
a) Determinar la actividad de la enfermedad reumática
b) Detectar anticuerpos contra antígenos nucleares (ANA)
c) Evaluar la respuesta inmunitaria
d) Identificar infecciones virales
b) Detectar anticuerpos contra antígenos nucleares (ANA)
¿Qué tipo de células se utilizan como sustrato en el ensayo IIFT de ANA?
a) Células HEp-2 y células de hígado de primate
b) Células de pulmón y células de riñón
c) Células de corazón y células de piel
d) Células de riñón y células de estómago
a) Células HEp-2 y células de hígado de primate
¿Para qué tipo de enfermedades se utiliza principalmente el ensayo IIFT para ANA?
a) Enfermedades autoinmunes, particularmente de tipo reumático
b) Infecciones bacterianas
c) Enfermedades cardíacas
d) Desórdenes metabólicos
a) Enfermedades autoinmunes, particularmente de tipo reumático
¿Qué contiene el kit de prueba para 50 determinaciones de ANA?
a) 10 portaobjetos, conjugado de IgG, controles positivo y negativo, sal para PBS, Tween 20, medio de montaje, cubreobjetos, folleto de instrucciones
b) 20 portaobjetos, conjugado de IgG, un control positivo, sal para PBS, solución buffer, guantes, cubreobjetos
c) 5 portaobjetos, conjugado de IgM, controles positivo y negativo, sal para PBS, solución buffer, cubreobjetos
d) 10 portaobjetos, conjugado de IgG, controles positivo y negativo, Tween 20, cubreobjetos
a) 10 portaobjetos, conjugado de IgG, controles positivo y negativo, sal para PBS, Tween 20, medio de montaje, cubreobjetos, folleto de instrucciones
¿Cómo se debe almacenar el kit de ensayo IIFT?
a) Entre +2°C y +8°C
b) A temperatura ambiente
c) A -20°C
d) A +25°C
a) Entre +2°C y +8°C
¿Cuál es la estabilidad garantizada para los portaobjetos y reactivos si se almacenan adecuadamente?
a) 6 meses
b) 12 meses
c) 18 meses
d) 24 meses
c) 18 meses
¿Qué tipo de muestras se pueden utilizar para el ensayo de ANA?
a) Suero humano o plasma (EDTA, heparina, citrato)
b) Muestras de saliva
c) Líquido cefalorraquídeo
d) Orina
a) Suero humano o plasma (EDTA, heparina, citrato)
¿Cuál es el volumen recomendado de muestra diluida que se debe pipetear en cada campo de reacción del portaobjetos?
a) 10 µl
b) 20 µl
c) 30 µl
d) 40 µl
c) 30 µl
¿Durante cuánto tiempo y a qué temperatura se debe incubar el portaobjetos con la muestra diluida?
a) 30 minutos a temperatura ambiente (+18°C a +25°C)
b) 1 hora a +37°C
c) 15 minutos a +4°C
d) 45 minutos a +25°C
a) 30 minutos a temperatura ambiente (+18°C a +25°C)
¿Cuál es la función del conjugado marcado con fluoresceína (FITC) en el ensayo de ANA?
a) Facilitar la unión de los anticuerpos a las células
b) Colorear los antígenos presentes en las células
c) Detectar y hacer visibles los anticuerpos unidos a los antígenos
d) Estabilizar la muestra para el análisis
c) Detectar y hacer visibles los anticuerpos unidos a los antígenos
¿Cómo se deben lavar los portaobjetos después de la incubación con la muestra y el conjugado?
a) Enjuagar con PBS-Tween y sumergir en una cubeta con PBS-Tween durante al menos 5 minutos
b) Lavar con agua destilada durante 2 minutos
c) Sumergir en alcohol durante 5 minutos
d) Secar al aire libre durante 10 minutos
a) Enjuagar con PBS-Tween y sumergir en una cubeta con PBS-Tween durante al menos 5 minutos
¿Qué tipo de luz se utiliza para la evaluación de la fluorescencia en el ensayo de ANA?
a) Luz ultravioleta
b) Luz infrarroja
c) Luz visible
d) Luz de lámpara de vapor de mercurio, 100 W
d) Luz de lámpara de vapor de mercurio, 100 W
¿Qué patrón de fluorescencia se observa típicamente con anticuerpos contra ADN de doble cadena?
a) Homogéneo
b) Granular
c) Centromérico
d) Nucleolar
a) Homogéneo
¿Qué antígenos están asociados con un patrón de fluorescencia nucleolar?
a) ADN de doble cadena
b) Histonas
c) Proteínas ribonucleoproteicas (ENA)
d) RNA polimerasa I y fibrilarina
d) RNA polimerasa I y fibrilarina
¿Qué patrón de fluorescencia es característico de los anticuerpos contra centromeros?
a) Nucleolar
b) Granular
c) Homogéneo
d) Granular típico
d) Granular típico
¿Qué autoanticuerpos generan un patrón de fluorescencia granular en el núcleo?
a) Anti-Sm y anti-U1-nRNP
b) Anti-dsDNA y anti-ssDNA
c) Anti-histona y anti-ciclina
d) Anti-centromero y anti-Scl-70
a) Anti-Sm y anti-U1-nRNP
¿Qué diferencia en el patrón de fluorescencia se observa entre los anticuerpos anti-SS-A/SS-B y los anti-Sm?
a) Los anticuerpos anti-SS-A/SS-B muestran un patrón más débil en el hígado de primate en comparación con las células HEp-2
b) Los anticuerpos anti-Sm no reaccionan en absoluto con el hígado de primate
c) Los anticuerpos anti-SS-A/SS-B generan un patrón homogéneo mientras que los anti-Sm generan un patrón granular
d) No hay diferencia en el patrón de fluorescencia
a) Los anticuerpos anti-SS-A/SS-B muestran un patrón más débil en el hígado de primate en comparación con las células HEp-2
¿Qué patrón de fluorescencia es indicativo de anticuerpos anti-RNP/Sm en las células HEp-2?
a) Granular grueso
b) Nucleolar
c) Centromérico
d) Homogéneo
a) Granular grueso
¿Qué indicación clínica puede estar asociada con un patrón de fluorescencia homogéneo en células HEp-2?
a) Lupus eritematoso sistémico
b) Esclerosis sistémica
c) Síndrome de Sjögren
d) Artritis reumatoide
a) Lupus eritematoso sistémico
¿Cuál es la sensibilidad del ensayo IIFT para la detección de ANA en células HEp-2 según el documento?
a) 81%
b) 90%
c) 100%
d) 75%
c) 100%
¿Cuál es la especificidad del ensayo IIFT en hígado de primate para la detección de ANA?
a) 97%
b) 100%
c) 85%
d) 90%
a) 97%
¿Cuál es la tasa de concordancia entre la evaluación visual y la evaluación automatizada por EUROPattern?
a) 80%
b) 94%
c) 99.4%
d) 75%
c) 99.4%
¿Cuál es la prevalencia de ANA en pacientes con lupus eritematoso sistémico (LES)?
a) 20-40%
b) 50-70%
c) 80-100%
d) 10-20%
c) 80-100%
¿Qué tipo de lupus se asocia frecuentemente con anticuerpos contra histonas?
a) Lupus neonatal
b) Lupus inducido por medicamentos
c) Lupus discoide
d) Lupus subagudo
b) Lupus inducido por medicamentos
¿Qué autoanticuerpo es altamente específico para la esclerosis sistémica limitada?
a) Anti-centromero
b) Anti-dsDNA
c) Anti-histona
d) Anti-SS-A
a) Anti-centromero
¿Qué autoanticuerpo es más común en el síndrome de Sjögren?
a) Anti-RNP
b) Anti-Sm
c) Anti-SS-A
d) Anti-Scl-70
c) Anti-SS-A
¿Qué tipo de patrón de fluorescencia es común en pacientes con polimiositis y dermatomiositis?
a) Granular
b) Nucleolar
c) Centromérico
d) Homogéneo
b) Nucleolar
¿Qué prevalencia tienen los anticuerpos anti-Scl-70 en la esclerosis sistémica difusa?
a) 25-75%
b) 5-20%
c) 50-90%
d) 10-30%
a) 25-75%
¿Cuál es la dilución recomendada de las muestras de suero para la evaluación cualitativa de ANA?
a) 1:10
b) 1:50
c) 1:100
d) 1:500
c) 1:100
¿Qué debe hacerse con las muestras diluidas antes de la incubación en el ensayo IIFT?
a) Deben incubarse inmediatamente
b) Deben refrigerarse durante 24 horas
c) Deben agitarse durante 2 minutos
d) Deben mezclarse a fondo, por ejemplo, con vórtex durante 4 segundos
d) Deben mezclarse a fondo, por ejemplo, con vórtex durante 4 segundos
¿Qué tipo de pipeta se recomienda para aplicar el conjugado en el ensayo IIFT?
a) Pipeta de vidrio
b) Pipeta de serología
c) Pipeta multicanal
d) Pipeta de paso (stepper pipette)
d) Pipeta de paso (stepper pipette)
¿Cuál es el rango de dilución estándar inicial para la medición cuantitativa de ANA?
a) 1:50
b) 1:100
c) 1:200
d) 1:500
b) 1:100
¿Cómo se define el título de anticuerpos en la evaluación cuantitativa?
a) Es la concentración de anticuerpos en la muestra original
b) Es la dilución de muestra en la cual la fluorescencia específica es apenas identificable
c) Es la cantidad total de anticuerpos en la muestra
d) Es la dilución en la cual la muestra muestra la mayor fluorescencia
b) Es la dilución de muestra en la cual la fluorescencia específica es apenas identificable
¿Qué debe hacerse si la muestra control positiva no muestra un patrón de fluorescencia específico?
a) Continuar con la evaluación
b) Repetir el ensayo
c) Usar una nueva muestra control
d) Ajustar la concentración del conjugado
b) Repetir el ensayo
¿Qué significa un resultado negativo en el ensayo IIFT para ANA a una dilución de 1:100?
a) No se detectaron anticuerpos contra antígenos nucleares en la muestra
b) La muestra contiene una baja concentración de anticuerpos
c) La muestra es positiva para otro tipo de anticuerpos
d) La prueba fue realizada incorrectamente
a) No se detectaron anticuerpos contra antígenos nucleares en la muestra
¿Qué prevalencia de ANA se observa típicamente en pacientes con artritis reumatoide?
a) 20-40%
b) 40-60%
c) 60-80%
d) 80-100%
a) 20-40%
¿Qué enfermedad se asocia con una alta prevalencia de anticuerpos contra U1-nRNP?
a) Lupus eritematoso sistémico
b) Esclerosis sistémica
c) Síndrome de Sjögren
d) Síndrome de Sharp (MCTD)
d) Síndrome de Sharp (MCTD)
¿Qué tipo de anticuerpos son comunes en el lupus inducido por medicamentos?
a) Anticuerpos contra histonas
b) Anticuerpos contra centromeros
c) Anticuerpos contra proteínas ribosomales
d) Anticuerpos contra nucleosomas
a) Anticuerpos contra histonas
¿Qué autoanticuerpo se asocia con mayor frecuencia con el lupus neonatal?
a) Anti-dsDNA
b) Anti-Sm
c) Anti-SS-A
d) Anti-Scl-70
c) Anti-SS-A
¿Cuál es la prevalencia de anticuerpos anti-Sm en pacientes con lupus eritematoso sistémico (LES)?
a) 5-40%
b) 60-80%
c) 20-50%
d) 10-20%
a) 5-40%
¿Cuál es la referencia recomendada para la evaluación positiva de ANA en células HEp-2?
a) Un patrón homogéneo en una dilución de 1:50
b) Una dilución de 1:100
c) Un patrón granular a 1:200
d) Un patrón nucleolar a 1:500
b) Una dilución de 1:100
¿Qué prevalencia de ANA se observó en donantes de sangre sanos utilizando células HEp-2?
a) 12.5%
b) 25%
c) 4.5%
d) 50%
a) 12.5%
¿Qué prevalencia de ANA se observó en donantes de sangre sanos utilizando hígado de primate?
a) 12.5%
b) 25%
c) 4.5%
d) 50%
c) 4.5%
¿Cuál es la concordancia entre la evaluación visual y la evaluación automatizada con EUROPattern en términos de especificidad?
a) 85%
b) 95%
c) 97.5%
d) 99.4%
c) 97.5%
¿Qué es la técnica TITERPLANE desarrollada por EUROIMMUN?
a) Un método para estandarizar los análisis inmunológicos aplicando muestras o anticuerpos marcados a los campos de reacción de una bandeja de reactivos
b) Un tipo de microscopía avanzada para la evaluación de fluorescencia
c) Una técnica para la preparación de muestras de suero
d) Un proceso para medir la concentración de anticuerpos en el plasma
a) Un método para estandarizar los análisis inmunológicos aplicando muestras o anticuerpos marcados a los campos de reacción de una bandeja de reactivos
¿Qué ventaja tiene la técnica TITERPLANE en comparación con las cámaras de humedad convencionales?
a) No es necesario usar una cámara de humedad, ya que los líquidos están confinados en un espacio cerrado
b) Permite la incubación a temperaturas más bajas
c) Reduce el tiempo de incubación a la mitad
d) Incrementa la precisión de la pipeta
a) No es necesario usar una cámara de humedad, ya que los líquidos están confinados en un espacio cerrado
¿Cuántas muestras se pueden incubar simultáneamente utilizando la técnica TITERPLANE?
a) Solo una muestra a la vez
b) Hasta 50 muestras
c) Hasta 200 muestras
d) Hasta 500 muestras
c) Hasta 200 muestras
¿Qué patrón de fluorescencia es típico para los anticuerpos contra histonas en la HEp-2?
a) Patrón homogéneo
b) Patrón granular fino
c) Patrón nucleolar
d) Patrón citoplasmático
a) Patrón homogéneo
¿Qué patrón de fluorescencia mostrarían los anticuerpos anti-fibrilarina en la HEp-2?
a) Granular, nucleolar
b) Granular, citoplasmático
c) Homogéneo, nuclear
d) Puntiforme, centromérico
a) Granular, nucleolar
¿Qué antígenos corresponden a un patrón de fluorescencia nuclear homogéneo?
a) ADN de doble cadena, histonas
b) Histonas, proteínas de centromero
c) U1-nRNP, proteínas Scl-70
d) RNA polimerasa I, fibrilarina
a) ADN de doble cadena, histonas
¿Qué patrón de fluorescencia es típico de los anticuerpos contra centromeros?
a) Granular típico
b) Homogéneo
c) Nucleolar
d) Citoplasmático
a) Granular típico
¿Qué patrón de fluorescencia es esperado en una muestra positiva para anticuerpos anti-SS-A/SS-B?
a) Patrón granular
b) Patrón homogéneo
c) Patrón citoplasmático
d) Patrón nucleolar
a) Patrón granular
¿Cómo deben manejarse las muestras de paciente y los controles en el ensayo IIFT?
a) Como materiales potencialmente infecciosos
b) Como desechos no peligrosos
c) Como reactivos comunes
d) Como sustancias químicas
a) Como materiales potencialmente infecciosos
¿Qué agente tóxico está presente en algunos reactivos del ensayo IIFT?
a) Mercurio
b) Sodio azida
c) Cloroformo
d) Formaldehído
b) Sodio azida
¿Qué debe hacerse si se observa contaminación en la solución de PBS-Tween?
a) Desechar la solución y preparar una nueva
b) Filtrar la solución y reutilizarla
c) Calentar la solución para eliminar la contaminación
d) Agitar la solución vigorosamente para disolver la contaminación
a) Desechar la solución y preparar una nueva
¿Qué tipo de muestras no mostró interferencias en los resultados del ensayo IIFT?
a) Muestras hemolíticas, lipémicas e ictéricas
b) Muestras con alto contenido de glucosa
c) Muestras con bajo pH
d) Muestras con alto contenido de sales
a) Muestras hemolíticas, lipémicas e ictéricas
¿Qué condición podría afectar la estabilidad de los portaobjetos antes de su uso en el ensayo IIFT?
a) Almacenamiento a temperatura ambiente
b) Exposición a la luz solar directa
c) Almacenamiento en un congelador
d) Uso inmediato después de sacarlos del refrigerador
d) Uso inmediato después de sacarlos del refrigerador
¿Cuál es el efecto de la luz solar directa en el conjugado marcado con fluoresceína (FITC)?
a) Degrada la fluorescencia
b) Mejora la intensidad de la fluorescencia
c) No tiene efecto
d) Aumenta la estabilidad del reactivo
a) Degrada la fluorescencia
¿Qué patrón de fluorescencia sería característico en una muestra con anticuerpos anti-Scl-70?
a) Granular fino
b) Homogéneo
c) Puntiforme citoplasmático
d) Granular nucleolar
a) Granular fino
¿Qué patrón de fluorescencia es generado por anticuerpos contra nucleosomas en células HEp-2?
a) Homogéneo
b) Granular
c) Nucleolar
d) Citoplasmático
a) Homogéneo
¿Qué patrón de fluorescencia esperarías en una muestra con anticuerpos contra Mi-2?
a) Granular
b) Homogéneo
c) Nucleolar
d) Citoplasmático
d) Citoplasmático
¿Qué patrón fue reconocido con una mayor sensibilidad por EUROPattern en comparación con la evaluación visual?
a) Granular
b) Homogéneo
c) Nucleolar
d) Citoplasmático
a) Granular
¿Cuál fue el patrón con menor sensibilidad en la evaluación visual en comparación con EUROPattern?
a) Homogéneo
b) Granular
c) Centromérico
d) Nucleolar
c) Centromérico
¿Qué control se utiliza para verificar la ausencia de anticuerpos antinucleares en el ensayo IIFT?
a) Control positivo
b) Control negativo
c) Control de especificidad
d) Control de fluorescencia
b) Control negativo
¿Qué debe hacerse si el control negativo muestra un patrón de fluorescencia específico en el ensayo IIFT?
a) Continuar con la evaluación, ya que es normal
b) Repetir el ensayo, ya que indica un problema
c) Ajustar la dilución de la muestra
d) Usar otro reactivo de control
b) Repetir el ensayo, ya que indica un problema
¿Qué indica la ausencia de fluorescencia específica en el control positivo?
a) Un problema en el ensayo que requiere repetición
b) Un resultado normal y esperado
c) Que el ensayo es negativo para ANA
d) Que la muestra es defectuosa
a) Un problema en el ensayo que requiere repetición
¿Cuál es la intensidad de fluorescencia máxima en el sistema de EUROIMMUN?
a) 3
b) 4
c) 5
d) 6
c) 5
¿Qué tipo de reproducibilidad fue evaluada con 10 lotes diferentes en el ensayo IIFT?
a) Intra-ensayo
b) Inter-lote
c) Inter-ensayo
d) Intra-lote
b) Inter-lote
¿Qué rango de medición inicial se utiliza en el ensayo IIFT de EUROIMMUN?
a) 1:10
b) 1:100
c) 1:1000
d) 1:10,000
b) 1:100
¿Qué porcentaje de sensibilidad se encontró en la evaluación de patrones centroméricos con EUROPattern?
a) 90%
b) 95%
c) 97%
d) 100%
d) 100%
¿Qué valor de corte se recomienda para considerar positivo un resultado de ANA en células HEp-2?
a) 1:10
b) 1:50
c) 1:100
d) 1:500
c) 1:100
¿Qué prevalencia de ANA se considera normal en una población sana?
a) 50%
b) 25%
c) 12.5%
d) 5%
C) 12.5%
¿Qué prevalencia de ANA en hígado de primate se considera dentro del rango normal para donantes de sangre sanos?
a) 4.5%
b) 10%
c) 25%
d) 50%
a) 4.5%