3.1. Técnicas de separación de proteínas Flashcards
Las técnicas de separación/fraccionamiento de proteínas se dividen en (2):
Electroforéticas
Cromatografías
Técnicas de identificación de proteínas (3)
Espectrometría de masas
Bases de datos (teórica)
Herramientas bioinformáticas
¿Qué es la proteómica top-down?
Se extraen las proteínas y se estudian de forma masiva tal y como son
¿Qué es la proteómica bottom-up?
Se extraen las proteínas, se rompen en péptidos y se obtiene información espectral de los péptidos para reconstruir la información de vuelta a nivel de proteína
Desventajas de la proteómica bottom-up (2)
Aumento de la complejidad de la muestra
Interferencia de proteínas
Ventajas de la proteómica bottom-up (2)
Los equipos y técnicas funcionan mejor con moléculas pequeñas
Existen flujos de trabajo bien definidos
Las proteínas se digieren con la proteasa ___
Tripsina
Técnicas de fraccionamiento más comunmente utilizadas (3)
Electroforesis
Isoelectroenfoque
Electroforesis bidimensional
¿Qué es el isoelectroenfoque?
Se emplea un gel en el que se moviliza un gradiente de pH para separar las proteínas en función de su punto isoeléctrico (a cierto pH dejan de migrar porque su carga es 0)
¿Qué es la electroforesis bidimensional?
Se realiza primero un isoelectroenfoque en una dirección y luego se hace una electroforesis perpendicular al isoelectroenfoque. Primero separa por PI y luego por tamaño