2.2 Les enzymes de la réplication Flashcards
Quels sont les 7 enzymes nécessaire à la réplication?
- ADN gyrase
- hélicases pour séparer les brins d’ADN
- protéine qui empêche les deux brins parentaux
de se réassocier avant d’avoir été répliqués - enzymes pour synthétiser les amorces d’ARN
- ADN réplicase
- enzyme pour enlever les amorces d’ARN
- enzyme pour ligaturer de manière covalente les
fragments d’Okazak
Quelle est la prmière ADN polymérase identifiée chez E.coli?
Pol I
Par qui a été découverte l’ADN polymérase I?
Arthur Kornberg en 1957 grâce à son habileté à incorporer de la thymidine dans l’ADN
Vrai ou faux
ADN Pol I est une réplicase
Faux, elle joue un rôle dans la réplication de l’ADN mais celui-ci n’est pas majeur
L’ADN Pol I est un monomère de ___ aa.
C’est une enzyme ____ : elle copie ___ nt et plus de la matrice sans la quitter
928, processive, 20
Vrai ou faux
L’ADN Pol I est une polymérase fidèle
Vrai
Comment peut être défini le degré de processivité d’une ADN Pol?
le nombre moyen de nucléotides que l’enzyme ajoute à chaque fois qu’elle se lie à une jonction amorce:matrice
Quelle autre activité (autre que polymérase) possède pol I?
En quoi consiste cette activité?
Activité exonucléase 3’->5’ et 5’->3’
Permet de corriger ses fautes
Par quoi peut être expliquer la grande fidélité de la synthèse de l’ADN par Pol I?
Quel est le prix de cette fidélité?
Par son activité exonucléase
3% des nt correctement incorporés sont excisés
Qu’arrive-t-il quand Pol I incorpore un nt erroné à l’extrémité croissante d’un brin d’ADN?
L’activité polymérase est inhibé et l’exonucléase 3’->5’ excise ce nt
Quelle est la fonction de l’exonucléase 5’->3’?
Elle permet à Pol I de se lier à un site de coupure simple-brin sur l’ADN duplex
Pol I coupe près de la cassure en libérant soit des mononucléotide ou des oligonucléotides
Quelle activité exonucléase n’enlève que des mononucléotides?
3’->5’
Vrai ou faux
a) l’exonucléase 5’->3’ se fixe au brin et cause une cassure simple-brin
b) Il y a déplacement de la cassure à la fin du fragments d’Okazaki
c) La fonction polymérase et les fonctions exonucléase sont regroupés sur le même site actif
d) la petite partie de Pol I est responsable de la synthèse et la grande de la dégradation
a) vrai
b) faux, début
c) faux, Sites actif différents
d) faux, Contraire
Ou est localisé le site actif de la polymérase?
Dans la partie inférieure de la forme en pince
Vrai ou faux
Le site actif de l’exonucléase est distinct du site polymérase
Vrai
Vrai ou faux
PolI a une fonction physiologique dans la réparation de l’ADN
Vrai
Quelle expérience a permis de démontrer que Pol I n’est pas une réplicase?
• En 1969, Cairns et De Lucia ont isolé un mutant
de Pol I d’E. coli possédant < 1% de l’activité
polymérase sauvage
• Ce mutant se multiplie à une vitesse comparable à
la souche sauvage, démontrant ainsi que Pol I
n’est pas la réplicase
À quoi peut être sensible un mutant possédant < 1% de l’activité polymérase sauvage (E. coli)?
mutant est très sensible aux rayons UV
et aux agents mutagènes chimiques, suggérant
que Pol I joue un rôle clé dans la réparation
d’ADN
Comment Pol I aide-t-elle à réparer l’ADN endommagé?
Le brin d’ADN contenant une lésion chimique est souvent clivé du côté 5’ de la lésion, ce qui active l’activité exonucléase 5’→3’ de Pol I • En même temps qu’elle excise l’ADN endommagé, Pol I comble la brèche grâce à son activité polymérase
Quelle propriété de Pol I est à la base de plusieurs technique du génie génétique?
Donne un exemple.
Déplacement d’une cassure simple-brin
Réactionde déplacement d’une cassure sert à introduire des nucléotides radioactifs dans de l’ADN in vitro dans le but de préparer des sondes moléculaires
Quelle est la fonction phydiologique de l’exonucléase 5’->3’ de Pol I?
Enlever les amorces d’ARN
Comble aussi les trous simple-brin qui en résultent
Indispensable dans le réplication de l’ADN chez E.coli
Vrai ou faux
a) E.coli possède 3 autres ADN Pol
b) Ces autres enzymes sont présente en quantité plus élevé
c) Pol II, Pol IV et Pol V sont impliquées dans la réparation des lésions d’ADN
D) Pol II est la réplicase de E.coli
a) faux 4
b) Faux, bcp moins abondantes
c) Vrai
d) faux, Pol III
Chez quel(s) enzyme(s) est présente l'activité exonucléase 5'->3'? L'exonucléase 3'->5'?
5’->3’ seulement chez Pol I
3’-.5’ -> I, II, III
Chez quel(s) enzyme(s) est présente la polymérisation 5’->3’?
Pol I