vragen h4 Flashcards
flowcytometrie in 2 zinnen
de cellen worden door een laserstraal geleid en hun reflectie & fluorescentie worden gemeten. hierbij krijgt men dan info over hun grote (forward scatter), vorm & inhoud (side scatter) -> type cel, dit wordt uitgezet in een diagram
ACAS & AFLAS
= adaptive cluster analysis system
-> aanwezigheid atypische lymfo & blasten
= adaptive flagging algorithm based on shape recognition
=> clusters die gevormd worden op basis van cel gegroepeerd
voor & nadelen manueel & automatische bepaling Hb
- manueel= goedkoop, maar foutenerror door ingesloten plasma & lange centrifugetijd
- automatisch = duurder maar houdt rekening met ingesloten plasma
4 principes celtellingen
1) impedantie
2) colorimetrie
3) lichtverstrooiing & fluorescentie
4) lichtverstrooiing & conductiviteit
impedantie
- gepateerd proces van coulter
-> gebasserd op coulter principe - verandering & verhoging elektrische weerstand
- door vaccuum & passage van cel door telbuis
- als cel passerd -> een grafiek
- hoogte signaal = volume cel
1) apparaat waarin glazen buis met zeer kleine opening (telbuis) in suspensie bloedcellen
2) door vaccuum suspensie opgezogen
3) elektrische weerstand aangeleng tussen 2 elektroden: 1 in cel suspensie, 1 in telbuis
-> elektrolytenoplossing (suspensie bloedcellen) zorgt voor geleiding stroom
=> 2d histogram
colorimetrie (vroeger KCN -> SLS methode)
- Hb ref methode (manueel)
- RBC lyseren in 1:500 verdunning
1) Hb gebonden met Fe2+ geoxideerd door K3
-> Fe(CN)6 -> metHb (Fe3+)
2) metHb + KCN -> stabiel rood cyaan-Hb complex -> 546 nm - extinctie absorptie max is rechtstreeks evenredig (=) hoeveelheid Hb
- nadelen:
-> KCn = toxisch
-> trage reactie (na 6 min stabiel compl)
-> geen meting sulfHb
lichtverstrooiing & fluorescentie
telling WBC, differentiatie WBC, plaatjes & erytrocyten
- flow cytometrie : meting in flow
-
- polymethine als bijkomende kleurstof
- kleuring DNA/RNA in kern & RNA in cytoplasma
- celvolume, intracellulaire comp., celact, cytoplasma act
- hydrodynamische focussering = cellen in flow cell
- laser = ceherent & monochromatisch
- voorwaarts = volume & grootte
- side scatter = interne structuur (granulen, kernvorm)
lichtverstrooiing & conductiviteit
= een diffirientiele telling door VCS technologie door 3 probes
- direct current (impedantie)
-> cel volume
- radio frequency alternating current (conductiviteit)
-> interne structuur & opaciteit
- laser light scatter
-> vorm, reflectie, structuur
wat is flagging
- een fout die de machine opmerkt & de laborant moet controleren. is een trigger om actie te ondernemen als mens als de q-flag groter is dan 100 verdacht.
-> neg = geen abnormaliteit
-> pos = min 1/39 abnormaliteiten
–> diff = abnormale celtelling
–> morf = morfologische abnormaliteit gedetecteerd
–> count = abnormale celtelling
-> error
–> funct = analyse error
–> result = onbetrouwbaar resultaat
–> delta = abnormale delta check
–> action = bijkomende meting geeft meer info