Visualización del SN post mortem

Question 1

Que es el aumento del microscopio

Answer 1

Como de grande aparece una estructuralista con respecto a su tamaño real

Question 2

Cual es el aumento predeterminado con el que vienen los microscopios desde la fabrica

Answer 2

10x

Question 3

Capacidad de ver separadas dos estructuras que realmente están separadas

Answer 3

Poder de resolución

Question 4

Cuales son los tipos de microscopios (estudiados en clase)

Answer 4

• Microscopio de luz: usa fotones
• Microscopio eléctrico: usa electrones (puede ser de barrido o de transmisión)

Question 5

Que símbolo representa el poder de resolución en la formula de Rayleigh

Answer 5

El epsilon: ε

*Ej: si ε es 1 metro, las cosas tienen que estar separadas 1 metro para distinguir que están separadas

Question 6

Que microscopio tiene mejor resolución y por que

Answer 6

El microscopio eléctrico, ya que la longitud de onda de los electrones (y por tanto de ε) es menor que la longitud de onda de los fotones

Question 7

Cuales son los procesos de preparación del tejido

Answer 7

Fijación, inclusion y corte

(La inclusion no es obligatoria)

Question 8

En que consiste la fijación

Answer 8

Consolidar los enlaces moleculares mediante sustancias químicas para que las proteínas no se degraden

Question 9

Cuales son los métodos principales de la fijación

Answer 9

• Inmersión: introducir el organo completo en formol
• Perfusión: se mete una cánula a nivel del corazón y se va liberando el formol, se abre una vía para que salga la sangre, y el formol sustituye la sangre

Question 10

En que consiste la inclusión

Answer 10

Se rodea el organo de una sustancia como plástico o cera para conservar la estructura del SN lo mas próximo posible a como estaba antes de la muerte

Question 11

En que consiste el corte

Answer 11

Cortar el organo en secciones tan finas que puedan ser atravesadas por la luz del microscopio

Question 12

Con que se suelen hacer los cortes

Answer 12

• Microtomo: congelación
• Criostato: congelación (la cuchilla también esta en la cámara a 20-30 dardos bajo cero)
• Vibratomo: sin congelación (la cuchilla vibra y saca cortes de tejido fresco, se suele usar para ME)

Question 13

Que tipos de tinción inespecífica hay

Answer 13

Tinción de somas, tinción de fibras y tinción de Golgi (somas y fibras)

Question 14

Tinción basófila que se une a estructuras acidas. Colorea el ARN de las neuronas y la glia que se encuentra en el soma

Answer 14

Tinción de somas

Question 15

Cual es la tinción de somas mas comun

Answer 15

Tinción de Nissl

Question 16

Tinción que marca la mielina mediante la plata para que se tiña de negro; la sustancia blanca queda más oscura que la sustancia gris

Answer 16

Tinción de fibras (Gallyas)

Question 17

Tinción que solo tiñe el 5-10% de las neuronas (no se conoce muy bien su mecanismo)

Answer 17

Tinción de Golgi

Question 18

Cuales son los tipos de tinción específica

Answer 18

• Técnicas histoquímicas
• Técnicas inmunohistoquímicas
• Hibridación in situ

Question 19

Técnica que se basa en realzar una reacción química sobre el tejido

Answer 19

Tecnica histoquímica

*Estudiar mejor con videos

Question 20

Que es necesario para que una técnica histoquímica funcione

Answer 20

Que la enzima siga activa

Question 21

Técnica que busca visualizar la presencia de una enzima

Answer 21

Tecnica inmunohistoquímica

*Estudiar mejor

Question 22

Cuales son los tipos de técnicas inmunohistoquímicas

Answer 22

Tecnica directa e indirecta

Question 23

Cuando 1 único anticuerpo se une a la proteína de interés y genera 1 señal

Answer 23

Tecnica inmunohistoquímica directa

Question 24

Cuando un 1 único anticuerpo se une a la proteína de interés y 100 anticuerpos secundarios se unen a 1 anticuerpo primario, se generan 100 señales

Answer 24

Tecnica inmunohistoquímica indirecta

Question 25

Técnica que busca detectar el material genético a partir del cual se codifica la proteína de interés

Answer 25

Hibridación in situ

Question 26

Que detecta la hibridación in situ

Answer 26

El ARNm que codifica la proteina especifica

Question 27

Cuales son los pasos de la hibridación in situ

Answer 27

1. Identificar el gen que codifica la proteina
2. Generar la secuencia complementaria en el lab y marcarla para visualizarla
3. Añadir la secuencia complementaria al corte para que se una al gen de interés

Question 28

En que consisten los estudios con trazadores en animales

Answer 28

En inyectar el trazador en el cerebro y esperar a que este se desplace hasta los núcleos diana. Su objetivo es conocer como se conectan los núcleos y cuales son los movimientos de las neuronas

Question 29

Que tipos de trazadores hay

Answer 29

Anterógrados, retrógrados y bidireccionales

Question 30

Trazador captado por el soma que llega a las terminales sinápticas por transporte axonico

Answer 30

Anterógrado

Question 31

Trazador captado pro las terminales sinápticas que llega hasta el soma por transporte axónico

Answer 31

Retrogrado

Question 32

Trazador que puede ir del soma a las terminales o al revés

Answer 32

Bidireccional

Question 33

Trazador que pasa de neurona en neurona y permite conocer la ruta que conecta los núcleos de interés

Answer 33

Trazador transináptico

Question 34

Tecnica que consiste en sustituir los enlaces moleculares del cerebro por un gel transparente

Answer 34

CLARITY

Question 35

Por qué es util la tecnica CLARITY

Answer 35

Porque permite visualizar de una manera distinta lo que se busca teñir