Variation de la réponse pharmacologique Flashcards
Criteres qui definissent une liaison specifique ?
Nb de sites de liaison est fini et celui de liaisons non-specifique est infini
- Affinité
- Saturabilité
- Réversibilite
- Stereospecifité
Liaison specifique permet de calculer le Kd
Qu’est ce que le Kd?
Agoniste inverse complet inhibe completement la reponse
Concentration de radioligand requise pr occuper 50% de la population totale des recepteurs.
Plus la valeur de Kd est petite, meilleure est l’affinite du ligand pr le site de liaison specifique.
Mecanismes de modulation des recepteurs
3 mecanismes?
- Defauts pre-receptoriels (tt ce qui va jouer avec la reponse)
Modification de la structure moleculaire de l’hormone, Presence d’Ac anti-recepteur,
Presence d’Ac anti-hormone
- Defauts receptoriels
Absence de recepteurs,
Diminution/Augmentation du nombre de recepteurs sur la surface membranaire,
Diminution de l’affinité du ligand pr le recepteur (dans le cas ou le recepteur a eu des modifications et pas le ligand!!!)
- Defauts post-receptoriels
Perturbations post-receptorielles
Cycle de prot G et recepteur
Activation basale —> liaison de l’hormone et echange de nucleotides —-> G beta et gamma se dissocie de G alpha et activation des effecteurs —-> GDP remplacé par GTP (concentration de GTP dans la cellule est plus elevee donc cest elle qui prend la place) —> Hydrolyse du GTP —-> Reassociation des s-u
et le cycle recommence
Recepteur beta adrenergique a longue chaine d’aa (7 domaines transmembranaires)
- A quoi servent qqes uns?
aa impliqués dans le 7 e domaine d’une prot. G sont ceux qui sont les plus impliqués avec les antagonistes, favorise certaine interaction avec antagonistes
3e boucle INTRACELLULAIRE importante pr le couplage avec prot. G (donc changement de ca va changer de Gs à Gi)
- Jaune: Liason avec la prot G( ont une certaine affinite avec (sont tous intracellulaire)
- Rouge: Ser/Thr qui peuvent etre phosphorylees
Desensibilisation
3 etapes?
- Decouplage
- Sequestration
- Regulation negative
Desensibilisation heterologue
Activation du recepteur 1 induit l’activation d’une kinase qui va phosphoryler un substrat et l’empecher d’avoir son action.
Etapes?
Exemples de desensibilisation?
Chaque proteine kinase a un site consensus different pr les phosphorylations.
- Stimulation des cellules avec un agoniste ou un activateur des proteines kinases
- Arret de la reaction (ajoute un volume important generalement froid)
- Preparation membranaire (isolation des membranes)
- Stimulation des recepteurs avec un agoniste
- Mesure de la reponse (ex. prod. d’AMPc) (reponse va diminuer)
C’Est un autre recepteur qui va desensibiliser un autre type de recepteur.
Beta2AR et beta1AR
FRP envoie kinases pr phosphoryler C5aR mais pas PAFR ou LTBR
PAFR ou LTBR phosphorylent FRP par contre.
- Desensibilisation homologue?
- Recepteur A2A adenosine: Recepteur sauvage, tronqué et muté?
- Conclusion?
s-u beta gamma de la prot G va souvent aller chercher la GRK qui va phosphoryler le recepteur.
Mm type de recepteur phosphorylé par le GRK (doit etre dans une conformation active OU par un agoniste)!!
- C’est le recepteur lui meme dans une conformation ACTIVE qui ne peut plus produire une reponse aussi importante (arrestine)
- Sauvage: desensibilisation
Tronqué: desensibilisation; adenylate cyclase, liaison agoniste OK, donc tt ce quon a perdu (tronqués) ne semble pas etre essentiel pour les fonctions ici
Muté: Desensibilisation a court terme affectee.
L’aa muté (T298) est tres important pr la desensibilisation!!
- Le recepteur peut se desensibiliser. La T298 est importante dans la desensibilisation.
Desensibilisation homologue
- Dans une conformation active, que se passe t il avec un agoniste, et un antagoniste?
- GRK peut interagir avec bcp de prot. Que peut -il faire?
- Agoniste: Unduit la reponse avec effecteur, et a la longue, association avec arrestine puis diminution de la prot G.
Antagonsite: aucun signal
- Peut bloquer recepteurs, peut favoriser interaction avec clathrine, etc.
Donc oui agit sur recepteur mais ya dautres choses qui peuvent decouler de ces interactions.
Desensibilisation homologue
Autres consequences dune desensibilisation?
Ex. SRC activé car recepteur PGE2 est phosphorylé, donc il y a une desensibilisation, mais activation SRC augmente la migration de la cellule et la metastase.
Echaffaudage present!
Internalisation des recepteurs
- Lipid raft?
- Comment ca se passe ?
- Voies d’internalisation? Voies favorisées?
- Microdomaine de la membrane plasmique riche en cholesterol et en sphingolipides.
Il se caracterise par sa faible densité (flottabilité sur un gradient de densité) et son insolubilité dans des detergents doux (detergent resistant membrane)
- Presence d’agoniste, recepteur migre vers des lipid rafts
Active certaines voies et migre vers des vesicules de clathrine.
Ou juste un des deux.
- L’internalisation peut survenir dans des vesicules non tapissees ou par la combinaison de deux ou plusieurs voies mentionnees.
ex. beta1AR internalisation via des lipid rafts et vesicules tapissees de clathrine
beta1AR-P par PKA= vesicules de clathrine
beta1AR-P par GRK = lipid rafts
Voies favorisées dependemment de quelle proteine est activee!
Internalisation des recepteurs
Microdomaine lipidique/Caveolae
- Agit comme quoi ?
- Role?
- Calveoline peut faire quoi?
- Que pourrait faire un changement de la voie d’internalisation?
- Agit comme endroit dans lequel les recepteurs accomplissent une tache de signalisation specifique (presence de molecules specifiques)
- Protection des recepteurs contre une internalisation rapide
- Peut reguler l’activite constitutive des recepteurs
- Pourrait affecter la destination finale du recepteur.
Internalisation des recepteurs
- Dans un cas ou les ligands restent juste a la surface, qui ne rentrent pas dans la cellule.. Qu’est ce qui se passe ?
- Roles de beta arrestine?
- Vont juste marquer les recepteurs a la surface.
Recepteurs beta 1 ne sequestrent pas moins que les recepteurs beta 2 a part sils sont mutés
Un recepteur internalisé naura pas la mm reponse que normalement.
- Beta arrestine empeche reponse et sert aussi de molecule dechaffaudage pr approcher phosphodiesterase qui va degrader l’AMPc , donc chercher la molecule necessaire pr degrader le plus rapidement 2nd msgr, aussi adaptateur pr proteine comme clathrine
Internalisation des recepteurs
- Regulation negative?
- Ubiquitination?
- Ubiquitine?
- Que permet l’ajout de plsrs ubiquitines sur un recepteur?
- Qu’est ce qui est egalement necessaire pr la degradation des recepteurs?
- Comment est ce que la beta arrestine peut reguler d’autres types de recepteurs (IGF-R1)?
- Apparait apres plusieurs heures de stimulation
ya des recepteurs degradés (down regulation)
- Role dans le devenir du recepteur: Degradation ou recyclage
- Molecule de 8kDa (76aa) qui s’ajoute a un residu Lysine de la proteine
- Permet son ciblage vers la degradation
- L’ubiquitination de la beta-arrestine
- En servant d’adaptateur pr la E3 ubiquitine ligase Mdm2 au recepteur IGF-R1 (insulin growth factor)
Internalisation des recepteurs
- Augmentation du nb de recepteurs. Comment?
- Que fait un antagoniste?
- Transplantation (transplantation cardiaque augmente beta2AR)
En presence d’un antagonsite (agoniste inverse).
- Va augmenter le nb de recepteur a la surface membranaire!
