Interactions ligands-recepteurs Flashcards
Recepteur ? Caracteristiques ?
Ont une “poche” dans laquelle le ligand vient se fixer avec des interactions tres specifiques.
Sont typiquement des proteines qui medient l’action des substances endogenes comme les: ?
A l’exception de certaines molecules agissant par exemple sur le pH (antiacide), l’osmose ou des chelateurs de metaux lourds.
ex. Recepteurs incorporés a la membrane
Proteine qui active un effecteur en presence d’un agoniste
Incorporees dans des membranes, associees a des membranes, associees a dautres structures telles que l’ADN et sont solubles.
- Neurot., les hormones, etc
- enzymes inhibés par agents pharmacologiques
- proteines de transport comme la Na/K ATPase
- Proteines structurales comme la tubuline
- Definition d’un ligand?
Toutefois, ce ne sont pas ttes les substances biologiquement actives qui interagissent avec un recepteur (anesthesique gazeux).
- Comment pouvons nous classer les ligands ?
Ligand va induire changement intracellulaire qui va envoyer reponse a la cellule
- Substance biologiquement active qui exerce son action en agissant via un recepteur (drogues, hormones, neurot., toxines,etc.)
- De differentes facons: soit en terme d’affinité, soit en termes de mode d’action.
Mode d’action
- Agoniste ?
- Antagoniste?
- Agoniste partiel?
- Agoniste inverse?
Ca prend une certaine affinite entre agoniste et recepteur pr qu’il y ait une certaine activité!
- Induit une reponse biologique lorsqu’il se lie a son recepteur
- Se lie au recepteur, mais incapable d’induire une activation
- Capable d’induire un effet, mais moins efficace qu’un agoniste
- Reduit la reponse de base
- Comment etudie t on la relation entre les ligands et le recepteurs?
stimulus initial (agoniste-recepteur) –> systeme amplificateur (prot. G) –> systeme effecteur (adenylate cyclase) –> Effet
- Qu’implique l’etude de la liaison specifique des ligands? Et les etudes fxnelles des recepteurs et caracterisation des ligands?
- signal d’entree –> transduction, amplification, modulation –> signal de sortie
Affinité –> activité
- Recepteurs purifiés, fragments membranaires et cellules isolees.
Fragments membranaires, cellules isolees, organes isolés, organisme entier.
Dependemment si on veut isoler un recepteur ou aller plus en general.
Comment separe-ton les ligands marqués(radioactifs) qui sont liés des ligands marqués non liés?
- Centrifugation
- Dialyse
- Chromatographie
- Filtration
Etudes de liaison?
- Connaitre l’affinite du ligand pr un recepteur
- Connaitre le nb de sites de liaison
- Stoïchiometrie de la liaison
- Identification des sous-types de recepteurs
- Determination de la qte relative de chaque sous-type
etc.
Quels sont les criteres definissant une liaison specifique?
- Reversibilité
- Afiinité
- Saturabilité
- Stereospécificité
Criteres de reversibilité
- La plupart des mediateurs physiologiques et des meds agissent de facon reversible. De quoi sont constituées les forces de liaison qui interviennent entre le ligand et le recepteur?
- Liaisons non covalentes?
- Par des liaisons de Van der Waals, des liaisons hydrogenes (pont hydrogene) et des liaisons ioniques.
Des liaisons de plus grande energie s’opposeraient a la reversibilite de la liaison et on ne veut pas ca ! - Forces electroniques, liaison hydrogene, forces de Van der Waals et liaisons hydrophobes.
- Liaison reversible?
- Liaison quasi reversible?
- Liaison irreversible?
En augmentant rapidement le volume de la rxn, il y aura retour a l’equilibre, mais le nb de complexes ligand-recepteur sera plus faible
- La plupart des ligands physiologiques et pharmacologiques.
Possible de changer dynamique de la rxn. Ex. si rxn se fait ds un volume de 1ml, une fois l’etat d’equilibre atteint, il y aura autant de ligands qui se fixent aux recepteurs que de ligands qui s’y detachent.
Si augmente le volume de la rxn, sans changer le nb de recepteurs ou la qte de ligands, le temps qu’un ligand libre vienne s’associer a un recepteur va augmenter. Il y aura moins de ligands associés a un recepteur a tt moment. Apres certain temps, nouvel etat d’equilibre sera atteint.
- Composés toxiques, ex: venim
- Surtt utilisée dans un contexte d’etudes structurales
Criteres d’affinité?
Affinite forte?
Ligand radioactif qui lie recepteur. Avec ajout de ligand non radioactif, moins de ligans radioactifs vont lier le recepteur jusqua un minimum.
Probabilite qu’un ligand occupe un recepteur a un moment donné. Ce ligand peut etre un agoniste ou un antagoniste.
Plus l’affinite d’un ligand est forte pour un recepteur, plus il y a de probabilite qu’il produise un effet via son interaction avec ce recepteur.
En general, lorsque l’affinite d’un ligand pr un recepteur est forte, plus la concentration du ligand dans le corps est faible.
Si affinite dun certain ligand non radioactif plus grande que l’autre ?
On aura besoin de moins de ligand avec une plus grande affinite pour deplacer 50% du ligand non radioactif
Determination de la quantite de chaque sous-type
Dans ce cas, affinite= affinite du ligand froid pr le ligand radioactif.
Premiere chute est due au fait que le ligand non radioactif a deplacé le ligand radioactif.
Le premier qui est deplacéc’est celui qui a la plus petite affinité
Sil y a pas daffinite pr un certain ligand, celui ci nest juste pas deplacé.
Liaison specifique vs non specifique
definition de chacun
Les liaisons specifiques correspondent a une interaction entre le ligand et le recepteur. Le nombre de recepteurs et donc saturable.
Si le ligand se fixe a un endroit different d’un recepteur, ce sera une liaison non specifique. Le nombre de sites non specifiques est non-saturable.
Criteres de saturabilité
Nombre fini de sites de liaison (aka recepteurs)
Par opposition, le nb de sites de liaison non specifique est virtuellement infini (non saturable)
Courbe de saturation
Deux series de tubes ?
- Liaison totale: augmentation croissante de ligand radioactif
- Liaison non specifique: Mms concentrations croissantes de ligand radioactif, mais avec une quantite bcp plus importante de ligand froid
Permet de connaitre le nb de sites de liaison
