Transcription de l'ADN Flashcards
Réplication
ADN -> ADN
Transcription
ADN -> ARN
Traduction
ARN -> protéine
Résultat de la transcription
La transcription génère un polymère de ribonucléotides qui est synthétisé par une ARN polymérase
- L’ARN polymérase synthétise l’ARN de 5’ à 3’
- L’ARN polymérase synthétise une copie complémentaire du brin matrice (qui est lu de 3’ à 5’)
- L’ARN a la séquence du brin d’ADN codant mais avec des ribonucléotides au lieu de désoxyribonucléotides, et de U au lieu de T
Structure de l’ARN
À cause des interactions entre ses bases, l’ARN a une structure secondaire et tertiaire
Pseudoknot
Appariement de bases entre deux régions simple-brin de boucles
Progression de l’ARN polymérase sur l’ADN
Déroulement de l’ADN au fur et à mesure de la synthèse d’ARN par l’ARN polymérase
Reformation de la double hélice en arrière de l’ARN polymérase
Hétéroduplex
Courte région d’hélice hybride ADN/ARN formée transitoirement (environ 9 nucléotides)
Caractéristiques des ARN polymérases
- L’ARN polymérase synthétise l’ARN en copiant un brin matrice d’ADN
- Transcrit de 5’ à 3’ (brin matrice de l’ADN doit être lu de 3’ à 5’)
- Ne nécessite pas d’amorce
- Crée des liens phopshodiesters entre les nucléotides en son site actif
Précision de la transcription
La transcription n’a pas à être aussi précise que la réplication d’ADN puisque les erreurs ont une durée de vie limitée correspondant à la durée de vie du transcrit
Site d’initiation de la transcription
Promoteur
Séquences pour la terminaison
Terminateur
Sigma
Facteur (protéine) nécessaire à l’initiation de la transcription qui permet la sélection du promoteur du gène à transcrire
Il y a plusieurs facteurs sigma chez les procaryotes, chacun ayant sa propre spécificité de séquence
Tous interagissent avec l’ARN polymérase et sont responsables de la reconnaissance de la séquence promotrice sur l’ADN
Facteur (protéine) sigma chez les procaryotes
Le facteur sigma s’associe à la polymérase pour former le complexe d’initiation de la transcription avant de se lier au promoteur et est relâché quelques 10 nucléotides après initiation de la transcription
ARN polymérase durant l’initiation et la terminaison
L’ARN polymérase est recrutée au niveau du promoteur et est relâchée de l’ADN au niveau d’un signal de stop
Séquence consensus (séquence canonique concept)
Ordre calculé des nucléotidiques (acides nucléiques) ou acides aminés (protéines), trouvés à chaque position dans un alignement de séquences
Représente les résultats d’alignement de séquences multiples dans lesquels des séquences apparentées sont comparées les unes aux autres
Des pourcentages des motifs de séquences similaires sont ainsi calculés pour chaque position
Nature du signal d’initiation (promoteur procaryote typique)
Les facteurs sigma bactériens reconnaissent une paire de courts motifs (séquences) conservés appelés boîtes -10 et -35 à cause de leur distance du site d’initiation de la transcription
La position de cette séquence consensus dicte le brin à utiliser ainsi que le sens de la transcription
Séquence consensus des promoteurs
Séquence idéale obtenue par analyse statistique des fréquences des bases à chaque position
Plus la séquence d’un promoteur est similaire à la séquence consensus (idéale) plus grande sera l’affinité du facteur sigma et plus grande sera l’efficacité d’initiation de la transcription = promoteur plus fort
Repère pour l’assemblage du complexe d’initiation de la trancription
La séquence TATAAT (-10) située environ 10 paires de bases en amont du site d’initiation de la transcription
Reconnaissance moléculaire entre l’ARN polymérase et le facteur sigma
Liaisons chimiques faibles (non covalentes)
- Forces de Van der Waals
- Ponts hydrogène
- Liens ioniques
- Interactions hydrophobes
Étapes de la formation du complexe d’initiation de la transcription (facteur sigma)
1) Le facteur sigma s’associe à l’ARN polymérase avant la transcription. Ce complexe ira se fixer sur le promoteur
2) Le contact de l’ARN polymérase avec le promoteur entraine l’ouverture locale de la double hélice d’ADN (bulle de transcription)
3) Initiation de la synthèse d’ARN à 50 ribonucléotides par seconde
4-5) Relâchement du facteur sigma après la synthèse d’une chaîne de plus ou moins 10 ribonucléotides et élongation
6) Rencontre du signal de terminaison: il s’agit de la forme que prend l’ARN grâce aux appariements locaux (intramoléculaires). Lorsque l’ARN se met sous cette forme, cela indique à l’ARN polymérase qu’elle doit être relâchée
7) L’ARN polymérase se détache, libérant l’ARN.
L’ARN polymérase peut ensuite aller retrouver un facteur sigma pour enclencher une nouvelle transcription
Nature du signal de terminaison chez les procaryotes
À l’extrémité 3’ de l’ARN néo-synthétisée se trouve le signal de terminaison de la transcription encodée par l’ADN
La séquence d’ARN transcrite du signal de terminaison permet la formation d’une tige-boucle (hairpin) qui crée une contrainte au niveau du complexe de l’ARN polymérase
Cela favorise le détachement de l’ARN polymérase
Séquence en tige-boucle
Riche en G-C suivi d’une série de U qui cause la terminaison de la transcription chez les procaryotes
Trois ARN polymérases qu’utilisent les cellules eucaryotes
ARNm, ARNr, ARNt, petits ARM
ARNm
Codent pour les protéines (ARN polymérase II)
ARNr
Composent les ribosomes (ARN polymérase I)
ARNt
Servent d’adaptateur lors de la synthèse protéique (ARN polymérase III)
Petits ARN
Utilisés dans différents processus cellulaires (ARN polymérase III)
snRNA, snoRNA
Nature du signal d’initiation de polymérase II chez les eucaryotes
La boite TATA situé environ 25 paires de bases en amont du site d’initiation de la transcription sert de point de repère pour l’assemblage du complexe d’initiation de la transcription
Complexe d’initiation de la transcription avec l’ARN polymérase II
Des facteurs généraux de la transcription reconnaissent et se lient à la séquence de la boite TATA
Facteurs généraux de la transcription
Reconnaissent et se lient aux séquences conservées des promoteurs eucaryotes d’ARN polymérase I
Aussi appelés Basal Transcription Factors