Trabalho 2 Flashcards
Qual objetivo da separação das proteínas por cromatografia?
O objetivo é analisar uma mistura de albumina e hemoglobina e a separação delas através da cromatografia de troca iônica utilizando a celulose.
As proteínas são moléculas……? Explique por quê.
As proteínas são anfotéricas pois possuem seu meio positivo e seu exterior negativo.
A carga efetiva da proteína depende do que?
Da composição de aminoácidos e do PH do meio.
O que é o Ponto Isoelétrico?
É o valor de PH característico para cada proteína que não possui carga total efetiva.
Diga 3 características da Albumina.
Albumina é uma proteína sérica.
Seu peso molecular é 66 241 Da
Seu ponto isoelétrico é 4,9
Diga 3 características da Hemoglobina.
A hemoglobina é uma proteína tetramérica (estrutura quartenária).
É responsável pelo transporte do oxigénio no sangue.
Seu peso molecular é 64 500 Da.
Existem duas hemoglobinas sendo elas: Hb A1: pI 6,9
Hb A2: pI 7,42
Como faz a separação das proteínas?
Através da cromatografia de troca iônica na qual iremos utilizar a DEAE-celulose que entre PH 2-9 se encontra carregada positivamente.
Como atua a DEAE-Celulose?
Ela atua como trocadora de aniões.
Como as proteínas são separadas?
Através da variação do PH ou força iônica (concentração salina) do eluente.
Qual irá passar 1º e em 2º?
A Hemoglobina irá passar primeiro pois ela possui menos afinidade com a celulose e a albumina irá passar em segundo pois possui mais afinidade com a celulose.