Tema 10. Aplicación de técnicas enzimohistoquímicas Flashcards
define enzimas
biocatalizadores que aumentan la velocidad de las reacciones químicas en los organismos vivos sin ser consumidos.
que proporciona el centro activo
la especificidad a la enzima.
nombra enzima sintetizada por arn
ribozima
define catalizador
cualquier molécula que acelera reacción química
explica el proceso de reacción enzimática
el sustrato se une a la enzima específicamente, formando el complejo enzima-sustrato, después la enzima transforma el sustrato en producto mediante una reacción química, formando el complejo enzima-producto.
Finalmente, la enzima libera el producto, quedando libre para catalizar otra reacción.
cuando añadimos productos en tinciones, ¿Qué tipo de microscopía necesitamos?
óptica, porque son compuestos que dan coloración
nombra mecanismos para producir complejo enzima sustrato:
- MODELO LLAVE CERRADURA (Fischer 1894)
- MODELO DEL AJUSTE INDUCIDO (Koshland 1958)
MODELO LLAVE CERRADURA (Fischer 1894)
actúa como si fuese un puzzle, por geometría, el sustrato específicamente se une al centro activo de la enzima
MODELO DEL AJUSTE INDUCIDO (Koshland 1958)
la enzima sufre un cambio morfológico cuando recibe el sustrato para que puedan encajar
nombra los tipos de enzimas
OXIDO-REDUCTASAS
TRANSFERASAS
HIDROLASAS
LIASAS
ISOMERASAS
LIGASAS
OXIDO-REDUCTASAS
Catalizan (aceleran) reacciones de óxido-reducción.
Los electrones pasan de una molécula a otra.
TRANSFERASAS
Catalizan la transferencia de radicales o grupos funcionales de unas moléculas a otras.
Se va a transferir parte de una molécula a otra.
HIDROLASAS
Catalizan reacciones hidrolíticas.
Reacción donde el agua fragmenta moléculas para dar otras.
LIASAS
Catalizan rupturas moleculares no hidrolíticas, rompiendi 2bles enlaces para dar lugar a moléculas más sencillas
y permiten la adición de grupos funcionales a moléculas con un 2ble enlace.
ISOMERASAS
Catalizan reacciones de isomerización
define isómero
misma forma molecular (misma cantidad átomos pero distinta distribución) con distinta estructura. espejo
LIGASAS
Catalizan la unión de moléculas mediante ATP.
Participan en reacciones donde participa el ATP para unir moléculas
Procesamiento de la muestra para la conservación de la actividad enzimática (para no cargármela).
¿Qué factores se deben tener en cuenta?
- Muestra fresca, incluida en medio de congelación y cortada con criostato. (muestras congeladas)
- Muestra fresca, sin necesidad de inclusión y cortada con vibratomo.
->Temperatura y pH óptimos para la actividad enzimática.
nombra enzimas usadas en histoquímica enzimática
Hidrolasas
Oxidorreductasas
nombra tipos Hidrolasas
- FOSFATASA ALCALINA
- ESTERASA DE CLORO ACETATO DE NAFTOL AS-D
FOSFATASA ALCALINA
sustrato
Naftol AS-MX + sales de diazonio.
ESTERASA DE CLORO ACETATO DE
NAFTOL AS-D
sustrato
Naftol AS-D + sales de diazonio.
para qué se utilizan las sales de diazonio de la fosfatasa alcalina y ESTERASA DE CLORO ACETATO DE
NAFTOL AS-D
para dar color
FOSFATASA ALCALINA
interpretación
Tiñe el producto final de rojo.
ESTERASA DE CLORO ACETATO DE
NAFTOL AS-D
interpretación
Tiñe el producto final de rojo escarlata y el núcleo de azul.
FOSFATASA ALCALINA
USO
Identificación de lesiones isquémicas o el deterioro de
órganos.
ESTERASA DE CLORO ACETATO DE NAFTOL AS-D uso
Diagnóstico de patologías uterinas y del tracto urinario
que ocurre con la reducción de flujo sanguíneo
da lugar a lesiones isquémicas.
en esta lesion aparece mucha fosfatasa alcalina, mucho rojo
qué ocurre con la fosfatasa alcalina si hay deterioro de órganos
que habrá poca, por tanto se identificará fácil, habrá poco rojo
nombra tipos Oxidorreductasas
MIELOPEROXIDASA
LACTATO DESHIDROGENASA
MIELOPEROXIDASA sustrato
H2O2 + diaminobencidina
LACTATO DESHIDROGENASA sustrato
Lactato + nitroazul de tetrazolio.
MIELOPEROXIDASA interpretación
Tiñe el producto final de negro-marrón.
LACTATO DESHIDROGENASA interpretación
Tiñe el producto final de azul.
MIELOPEROXIDASA uso
Identificación de células
inflamatorias.
LACTATO DESHIDROGENASA uso
Evaluación de la viabilidad celular y actividad metabólica.
nombra enzimas que participan en reacciones donde se transfieren electrones
MIELOPEROXIDASA
LACTATO DESHIDROGENASA
