systèmes de restriction et de modification Flashcards
Quels nucléosides peuvent être modifiés?
adénine et cytosine
E.coli K12 composition des modifications
1,5 % adénines et 0,75% cytosine sont modifiées sous l’action des méthyltransférases
Quels sont les trois types de systèmes?
restriction-modification, restriction, modification
Quelles protéines sont codés chez ecoK et de quel type s’agit-il ?
restriction-modification de type I. HsdR (enzyme de restriction) HsdS et HsdM (méthyltransférase dimérique associée à HsdR). système de destruction de l’ADN étranger
Quelles sont les enzymes de restriction-modification de type II?
Enzymes de restriction de type II (EcoRI, EcoRII, EcoRV)
méthytransférases associés a l’enzyme de restriction
Quelles sont les enzymes de modification de l’ADN?
méthyltransférases (méthylases) Dam et Dcm
Quelles sont les enzymes de restriction de l’ADN?
endonucléases McrA, McrB et Mrr
toutes les souches E.coli possèdent les 3 types
faux
Quel est la fonction biologique des enzymes de modification et de restriction
modification: protège l’organisme contre la digestion de son génome par sa propre enzyme de restriction
restriction: clivage d’ADN dangereux
Que fait la méthyltransférases?
transfert un groupement méthyl à l’adénine ou la cytosine. elle reconnaît la même séquence que son enzyme de restriction associée.
Est-il possible de retrouver des enzymes de restrictions seules?
non, elle viennent toujours avec leur méthylase! Ceci empêche le clivage de son propre génome
Quelle est l’exception au système R-M ?
enzyme DpnI, clive seulement la séquence GATC si le A est méthylé.
Comment introduire de l’ADN dans E.coli?
endonucléases doivent être inactivées. ceci ce fait pas l’obtention de mutants de délétion.
