système modification et restriction (suite)

Question 1

à quoi sert dam?

Answer 1

définir les brins mères et filles après la réplication ADN

Question 2

Quelle séquence est reconnue par dam?

Answer 2

GATC, méthyl le A

Question 3

Quelle séquence est reconnue par dcm?

Answer 3

CC(A/T)GG méthyl le C interne

Question 4

ces deux méthyltransférases interfèrent avec quoi?

Answer 4

le clivage de l’ADN par des enzymes de restrictions

Question 5

Action de Dam sur les enzymes de restrictions

Answer 5

enzyme peut être bloquée (complètement ou partiellement) ou non.

Question 6

Pourquoi seulement une partie de l’activité de l’enzyme peut être bloquée par dam/dcm ?

Answer 6

Parce que la séquence reconnue par les méthyltransférases n’est fait pas totalement partie de la séquence reconnue pas les enzymes de restrictions

Question 7

Quelles sont les différents effets de la méthylation par dam?

Answer 7

même activité que leur méthyltransférase propre
pas affecté par une méthylation du A
affecte seulement un sous-groupe de l’enzyme

Question 8

Quelle est l’impact du système de modification sur le génie génétique?

Answer 8

Lorsque l’on veut couper avec une certaines enzymes soumises au méthylations de dcm ou dam, faut faire pousser le plasmide dans souche dam (mutant dam ne possède pas la protéine)

Question 9

Action de MrcA MrcBC Mrr (endonucléase)

Answer 9

clive ADN méthylé qui cherche a s’introduire dans E.coli

Question 10

séquence reconnue par McrA, McrBC et Mrr

Answer 10

McrA = mCG
McrBC = GmC et AmC
hémi-méthylation (double ou simple brin)
Mrr = mA

Question 11

Quelle est l’impact du système de restriction?

Answer 11

protège contre l’ADN étranger (ceux des phages)