Sonde moléculaire

Question 1

Qu’est-ce qu’une sonde?

Answer 1

C’est un composé qui a une affinité spécifique pour la molécule que l’on veut détecter ou quantifier

Question 2

Qu’est-ce qu’un traceur?

Answer 2

Permet la détection de la sonde de manière stable, sensible et spécifique

Question 3

Est-ce que le traceur est présent naturellement dans l’échantillon à analyser?

Answer 3

Non

Question 4

Est-ce que le traceur modifie l’affinité de la sonde pour sa cible?

Answer 4

Non

Question 5

Quel type de molécule peut détecter et quantifier la sonde?

Answer 5

ADN, ARN, Protéines,etc.

Question 6

Quelles sont les applications d’une sonde moléculaire de type anticorps?

Answer 6

• Buvardage western
• Détection ÉLISA
• Microscopie à fluorescence

Question 7

Qu’est-ce qu’est un anticorps?

Answer 7

Immunoglobulines IgG, IgE ou IgM

Question 8

Qu’est-ce que le paratrope et la région Fc sur un anticorps?

Answer 8

Paratrope = région variable qui fixe l’épitope

Région Fc = domaine constant des chaînes lourdes

Question 9

Quelles sont les 3 types de traceurs?

Answer 9

• Isotopes
• Enzymes
• Fluorochromes

Question 10

Que contient un atome? Le noyau?

Answer 10

Atome : Noyau + électrons

Noyau : Neutrons + protons

Question 11

Vrai ou Faux? Tous les atomes d’un même élément possèdent le même nombre de protons.

Answer 11

Vrai. Le nombre de proton est le numéro atomique.

Question 12

Vrai ou Faux? Tous les atomes d’un même élément qui possèdent le même nombre de proton ont les mêmes propriétés chimiques et nucléaires.

Answer 12

Faux, ils les même propriétés chimiques mais pas nucléaires.

Question 13

De quoi dépend la stabilité du noyau?

Answer 13

Dépend du ratio N/Z
N = Nombre de neutrons
Z = Nombre de protons
S’il y a trop ou pas assez de neutrons, l’atome est instable et émettra un rayonnement radioactif pour se stabiliser

Question 14

Vrai ou Faux? La désintégration de l’atome est un processus qui dépend des conditions environnementales

Answer 14

Faux. C’est un processus qui ne dépends PAS des conditions environnementales

Question 15

Le noyau instable se transforme comment ?

Answer 15

En éjectant 2 neutrons et 2 protons

Question 16

Vrai ou Faux? La majorité des traceurs radioactifs instables utilisés en biochimie sont des émetteurs de rayonnement Bêta -.

Answer 16

Vrai

Question 17

Quelles sont les 3 types de rayonnement radioactif?

Answer 17

• Bêta
• Gamma
• Rayons X

Question 18

Pourquoi les rayonnements radioactifs sont très énergétiques ?

Answer 18

Car ils sont de longueurs d’ondes courtes

Question 19

Placer en ordre du moins pénétrant au plus pénétrant les rayonnements suivants : Bêta, Alpha, Gamma

Answer 19

Alpha, Bêta, Gamma

Question 20

De quelle façon est liée l’enzyme à la sonde?

Answer 20

De façon covalente

Question 21

Vrai ou Faux? L’intensité de la couleur en colorimétrie est proportionnelle à la quantité de sonde fixée à la cible.

Answer 21

Vrai

Question 22

Quelles sont les 2 formes que peuvent prendre le produit coloré

Answer 22

Soluble : pour la détection en milieu liquide

Insoluble : pour la microscopie

Question 23

Vrai ou Faux? 1 enzyme peut avoir plusieurs substrat

Answer 23

Vrai.

Question 24

Nommer les 3 enzyme utilisées en colorimétrie

Answer 24

HRP (peroxydase du raifort)
Phosphatase alcaline
B-galactosidase

Question 25

Qu'est-ce qu'un fluorophores (fluorochrome) ?

Answer 25

Molécule émettant de la fluorescence

Question 26

Qu'est-ce que la fluorescence?

Answer 26

Émission de lumière par une substance absorbant des radiations et les émettant à des longueurs d'ondes plus grandes

Question 27

Qu'est-ce que la phosphorescence?

Answer 27

Émission de lumière continue après que l'illumination ait cessée

Question 28

Vrai ou Faux? L'émission est toujours à une longueur d'ondes plus élevée que celle utilisée pour l'excitation

Answer 28

Vrai

Question 29

À quoi servent les filtres de bandes passantes étroites?

Answer 29

Permettent l'excitation et la mesure de la fluorescence émise dans des grammes étroites de longueurs d'ondes. Permet de détecter le signal de fluorescence original d'une molécule

Question 30

Vrai ou Faux? La détection de plusieurs traceurs ce fait en une étape.

Answer 30

Faux. L'image est reconstruite à partir de plusieurs images, chacune ayant été obtenue par excitation/émission à des paires de longueurs d'ondes différentes

Question 31

Pourquoi le spectrofluorimètre est nécessaire?

Answer 31

Pour connaître la longueur d'ondes des pics d'absorption et d'émission

Question 32

Vrai ou Faux? Certaines molécules émettent de la fluorescence sans être couplé à une autre molécule de reconnaissance.

Answer 32

Vrai, ce ne sont donc pas des sondes.

Question 33

Nommer des applications des sondes fluorescentes.

Answer 33

- Cytométrie en flux - Hybridation de puces à ADN - Microscopie à immunofluorescence - FRET

Question 34

Étant donné que les sondes pour les acides nucléiques étaient souvent radioactif, il y a eu développement d'alternatives non radioactives. C'est nouvelles sondes sont liés à quoi?

Answer 34

À la digoxigénine (retrouvé naturellement chez les plantes)

Question 35

Est-ce que les sondes d'acides nucléiques sont sensibles ou non sensible? Est-ce qu'elles sont spécifiques ou non spécifiques?

Answer 35

Sensibles + spécifiques

Question 36

Associez les traceurs suivants à la méthode de détection plausible : a) Phosphatase alcaline b) 32P c) Cy3 d) 13C 1) Autoradiographie 2) Spectromètre de masse 3) Spectrophotomètre 4) Fluorimètre

Answer 36

a) Phosphatase alcaline - Spectrophotomètre b) 32P - Autoradiographie c) Cy3 - Fluorimètre d) 13C - Spectromètre de masse

Question 37

Associez les techniques suivantes au type d’anticorps généralement employé : a) Comptage de cellules par FACS b) « Western blot » c) Microscopie à immunofluorescence d) ELISA 1) Anticorps couplé à un traceur radioactif 2) Anticorps couplé à une enzyme 3) Anticorps couplé à un traceur fluorescent

Answer 37

a) Comptage de cellules par FACS - Anticorps à un traceur fluorescent b) « Western blot » - Anticorps couplé à une enzyme c) Microscopie à immunofluorescence -Anticorps à un traceur fluorescent d) ELISA -Anticorps couplé à une enzyme

Question 38

Vrai ou Faux? a) L’utilisation de la peroxydase du raifort (HRP) génère toujours une coloration verte en ELISA ? b) La chimioluminescence est moins sensible que la colorimétrie en immunobuvardage de type Western. c) L’immunofluorescence permet de localiser des protéines dans une cellule. d) Les traceurs isotopiques employés en RMN sont généralement des isotopes stables. e) Le 14C est un émetteur de rayons gamma.

Answer 38

a) Faux b) Faux c) Vrai d) Vrai e) Faux

Question 39

Quelles sont les deux principales méthodes de couplage d’un traceur à une molécule pour fabriquer une sonde ?

Answer 39

1- Conjuguaison chimique | 2-Synthèse biochimique

Question 40

Un ELISA nécessite habituellement deux types d’anticorps (un anticorps primaire et un anticorps secondaire). Lequel de ces deux anticorps est normalement conjugué à un traceur ?

Answer 40

Anticorps secondaire