Semaine 3 Flashcards

1
Q

Qu’est-ce que l’avidité?

A

Somme de la force des interactions, prend en compte la valence (exemple IgM pentamérique)

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Q

Qu’est-ce que l’affinité?

A

Force de l’interaction (constante de dissociation)

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3
Q

En quoi consistent essentiellement les Ac dans le répertoire naïf?

A

IgM

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4
Q

Quel(s) Ac est/sont impliqué(s) dans la réponse primaire?

A

IgM

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5
Q

Quel(s) Ac est/sont impliqué(s) après re-stimulation?

A

IgG, IgA, IgE

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6
Q

Quel(s) Ac a/ont une faible affinité?

A

IgM

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7
Q

Quel(s) Ac a/ont une forte affinité?

A

IgG, IgA, IgE

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8
Q

Nommer les deux mécanismes impliqué dans la diversité après rencontre de l’antigène?

A

Hypermutation somatique; HMS (somatic hypermutation, SHM, affinity maturation) augmentation de l’affinité

Commutation isotypique; CI: IgM à IgG, IgA, IgE
(class switch recombination, CSR)
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9
Q

Pour les hypermutations somatique, où s’accumulent normalement les mutations?

A

Les régions hypervariables (CDR1, CDR2, CDR3)

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10
Q

Donner des caractéristique des hypermutations somatiques.

A
  • Un deuxième mécanisme de modification du génome

• Mutations ponctuelles dans les régions V

• Une mutation par région V par division cellulaire
= 10^6 plus fréquent que le taux de mutagenèse normal

• Dépend de la transcription
des gènes Ig (ciblage !)

• Mécanisme dépend de
la protéine AID

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11
Q

Par quel(s) méchanisme(s) est contrôlée l’expression différentielle des Ig?

A
  • Épissage alternatif (IgM, IgD)

* Commutation isotypique (IgG, IgA, IgE)

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12
Q

Qu’est-ce que la commutation isotypique? Donner des caractéristiques.

A

• IgG, IgA, IgE uniquement après CI
• Troisième mécanisme de recombinaison et de modification de l’ADN chromosomique
• Mécanisme différent de la recombinaison V(D)J (pas d’implication des protéines RAG !)
• CI dépendante d’une réponse immunitaire
active (organes lymphoïdes secondaires, réaction du centre germinatif, interaction avec cellules T auxiliaires + cytokines)

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13
Q

Combien d’isotypes ont les humains pour les IgG?

A

4

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14
Q

Combien d’isotypes ont les humains pour les IgA?

A

2

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15
Q

Vrai ou faux. La commutation isotypique est dépendante de la transcription des gènes Ig (promoteurs Ig et S)

A

Vrai

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16
Q

Le type de CI est régulé par quelle type de molécule?

A

Cytokines (cellule T)

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17
Q

Quel est le méchanisme de la protéine AID? (Commutation isotypique)

A

• AID induit des cassures simple
-brin (nicks) dans l’ADN dans les régions S
• Le morceau d’ADN entre les deux régions S est enlevé

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18
Q

Vrai ou faux. La commutation isotypique est indépendante de la protéine AID.

A

Faux, strictement dépendante d’AID

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19
Q

Quelle(s) cellule(s) a/ont une mémoire immunitaire?

A

Les cellules B ayant subit une commutation isotypique

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20
Q

Que sont les IgY?

A

Ac produit dans du jaune d’oeuf.

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21
Q

Quels sont les avantages des IgY

A
  • production dans les oeufs
  • quantité; (~20 x plus qu’un lapin)
  • distance évolutive
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22
Q

Que sont les Bursa de Fabricius (B cells) chez le poulet?

A
  • Les cellules B du poulet possèdent seulement un élément VH et Vl fonctionnel, tous les autres sont des pseudogènes.
  • Le réarrangement V(D)J initial est toujours le même, générant le même récepteur
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23
Q

Comment se diversifient les cellules Bursa de Fabricius?

A
  • conversion génique; CG (gene conversion; GC) à partir des pseudogènes
    • Un quatrième mécanisme de modification du génome !
    • Strictement dépendent de l’AID
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24
Q

Qui a identifié l’enzyme AID?

A

T. Honjo (1999)

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25
Q

Quelle est l’importance de AID?

A

• essentielle pour:
– hypermutation somatique (HMS)
– Commutation isotypique (CI)
– Conversion génique (CG)

• Mutations dans gène AID:
– Immunodéficience héréditaire (primaire)
HIGM2 (hyper IgM syndrome type 2)
• Surexpression de AID: Développement de
tumeurs
– mutations ponctuels dans oncogènes
– translocations chromosomiques
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26
Q

Qu’est-ce que le HIGM2 (hyper IgM syndrome type 2).

Donner les effets.

A
  • Maladie autosomique récessive dans le gène codant pour AID
  • Développement normal d’un répertoire de cellules B naïves, mais :
  • Pas de HMS
  • Pas de CI et donc pas de mémoire immunologique
  • Infections et réponses IgM primaires à répétions à taux d’IgM élevé, réduction très sévère des taux d’IgG, IgA, IgE
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27
Q

Que fais APOBEC3G

A

Détruit le génome de certain virus comme le VIH

28
Q

Quelle est la réponse du VIH à APOBEC3G

A

Production de HIVvif qui détruit APOBEC3G

29
Q

Quel est le mécanisme d’action d’AID? (Hypermutation somatique)

A

Lors de la transcription, AID change le C en U sur une région de l’ADN simple brin. Ce U est ensuite réparé et remplacé par un T ce qui entraine une mutation (HMS).

Si le U n’est pas reconnu, la UNG reconnait le U et l’enlève se qui donne un site abasique (pas de base). La réparation du site abasique donne 3 chance sur 4 de faire une mutation (HMS).

Si le site abasique n’est pas réparé, APE fait un bris simple brin de l’ADN. La réparation de ce brin entraine la conversion génique ou la commutation isotypique.

30
Q

Une mutation de UNG entraine quelle maladie?

A

HIGM5

31
Q

Comment préparer un antisérum?

A

Injection d’un antigène (3-5x) avec un adjuvant, on récolte le sang et on garde seulement le sérum

32
Q

Qu’est-ce qu’un adjuvant?

A

Un agent qui stimule la réponse immunitaire innée et qui active la réponse adaptative.

33
Q

Vrai ou faux. Si l’antigène est complètement pur, un antisérum contient 1 type d’AC

A

Faux, un antisérum contient normalement plusieurs type d’Ac.

34
Q

Quels sont les avantages des Ac polyclonaux? Les sources?

A
  • Bon, pas cher, rapide
  • Toujours utilisés beaucoup en recherche
  • sources: lapin, poule
35
Q

Qu’est-ce qu’un Ac secondaire?

A

Un Ac qui reconnait un autre Ac. Souvent étiquetté avec des radionuclides, des enzymes et des chromophores)

36
Q

Les IvIg (IgG intra-veineux) doivent être injectés combien de fois pour traiter des immunodéficiences des cellules B

A

1x/mois

37
Q

Qu’est-ce que la maladie du sérum?

A
  • Réaction systémique contre une forte dose d‘anticorps d’une autre espèce
  • Génération des complexes immuns
  • Explication; les Ig d’une espèce sont très immunogéniques lorsqu’injectés dans une autre espèce (surtout à répétition)
38
Q

Quelles sont les limitations des antiséra (antisérum)

A
  • hétérogènes
  • Les quantités sont limitées
  • Non-reproductibles
39
Q

Comment faire des hybridomes?

A
  1. Immuniser une souris
  2. Prélever la rate (cellule B HPRT +)
  3. Prendre des myelomes (cellules immortelles) HPRT -
  4. Fusionner les 2 types de cellules pour faire des hybrides.
  5. Les cell. B meurent spontanément
  6. Pour les myelomes, ont fait une sélection HAT. Le HAT rend la survie des cellules dépendantes de l’expression du gène HPRT (HPRT +)
  7. Clonage des hybridomes par dilution limite sur une plaque
40
Q

Quels sont les avantages des hybridômes?

A
  • 1) Une seule spécificité. Chaque hybridome produit qu’un seul type d’anticorps.
  • 2) Quantité illimité d’anticorps. Les hybridomes sont immortalisés comme des cellules tumorales.

• 3) Mêmes des antigènes complexes (avec multiples
épitopes) mènent a des anticorps pures. Un anticorps monoclonal reconnaît qu’un seul épitope.

41
Q

Quels animaux sont généralement utilisé pour faire des hybridômes

A
  • Souris
  • Rat (pour Ac. de souris)
  • Hamster (pour Ac. de souris)
  • lapin (rare)
  • Humain (problème de l’immunisation)
42
Q

Vrai ou faux : les anticorps thérapeutiques doivent absolument être humains

A

Vrai

43
Q

Qu’arrive-t-il si un anticorps thérapeutique n’est pas humain?

A

Maladie du sérum

44
Q

Vrai ou faux : les anticorps primaires d’un individu non-immunisés ont normalement une affinité assez forte pour être utile

A

Faux

45
Q

Pourquoi utiliser l’humanisation des anticorps?

A

Pour éviter la maladie du sérum

46
Q

Quelle est la nomenclature des anticorps thérapeutiques de souris?

A
  • omab
47
Q

Quelle est la nomenclature des anticorps thérapeutiques chimériques?

A

-ximab

48
Q

Quelle est la nomenclature des anticorps thérapeutiques humanisés?

A

-zumab

49
Q

Quelle est la nomenclature des anticorps thérapeutiques humains?

A

-umab

50
Q

Dans quel contexte les anticorps de souris sont-ils utilisés?

A

En rejet de greffes

51
Q

Que sont les anticorps chimériques?

A

Anticorps avec la partie constante humaine et partie variable de souris

52
Q

Que sont les anticorps humanisés?

A

Que les boucles CDR sont d’origine animale, sinon c’est tout humain

53
Q

Quelle est l’apparence d’un phage antibody?

A

Protéine gIII du phage avec un domaine Fab ajouté

54
Q

Quel est l’avantage d’utiliser un phage antibody?

A

Le génome du phage code pour l’anticorps

55
Q

Comment se fait la sélection de phages antibody?

A

D’abord des lavages, puis plusieurs amplifications avec des bactéries pour finalement obtenir des bactériophages purs

56
Q

Que sont les souris humanisées?

A

Souris qui produisent des anticorps humains

57
Q

Comment peut-on produire des souris humanisées?

A

Transfert des locus avec les gènes humains de la production d’immunoglobulines dans la souris

58
Q

Vrai ou faux : il existe des souris humanisées

A

Vrai - utilisées pour faire des antivenins

59
Q

Que serait l’utilité des antibody-antibiotic drug conjugate (AAC)?

A

Cible l’ag de façon plus efficace, tue même staph aureus résistant aux antibiotiques

60
Q

Quels sont les intérêts de modifier en génie génétique des anticorps (ex : Fab3, tetrabody, scFV…)

A
  • Multivalence
  • Différentes tailles
  • Élimination rapide par les reins si en dessous de 50 kDa
61
Q

Les Bi-specific T cell engagers relient quelles 2 molécules?

A

CD19 (cellules B)

CD3 (CD3)

62
Q

Quel est le rôle des bi-specific T cell engagers?

A

Rapprocher les cellules B et T - utilisation surtout dans les tumeurs de cellules B

63
Q

Que sont les nanobodies?

A

Anticorps de soit une seule chaîne légère, soit une seule chaîne lourde

64
Q

Que sont les avantages et inconvénients d’utiliser des anticorps polyclonaux?

A

+ : bon, pas cher, rapide

- : multiple spécificités, quantité limitée, non renouvelable

65
Q

Que sont les avantages et inconvénients d’utiliser des anticorps monoclonaux?

A

+ : monospécifique, quantité illimitée

- : plus laborieux, plus cher