secuenciacion de proteinas y cristalografia Flashcards
patron de difraccion
veremos en la pantalla regiones brillantes y oscuras, en un patron complicado que no puede verse e n un lente
las distancias de las manchas son
inversamente proporcional a las distancias en la red real
las emisiones de varios e experimentan interferencia de diferentes direcciones
A: interferencia constructiva, en la pantalla aparece una mancha
B: interferencia destructiva, en la pantalla no hay señal
la amplitud de las ondas se incrementa cuando se encuentran en fase
los electrones de la macromolecula en estudio emiten a su vez
rayos x
los electrones oscilan conforme
pasa la onda
los rayos x
tiene longitudes de onda comparables a las distancias atomicos a 10 picometros
se produce al someter una carga e a una aceleracion
resolucion
distancia minima a la cual el equipo puede mostrar 2 puntos como entidades separadas
la resolucion depende de
la longitud de onda de la luz
a menor longitud de onda de luz hay
mayor resolucion
un haz de luz de una longitud de onda determinada
no puede utilizarse para examinar detalles estructurals mas pequeños que su propio longitud de onda
cristalografia de rayos x
metodo para determinar la estructura tridimensional de una macromolecula mediante el analisis del patron de difraccion de los rayos x por un compuesto cristalino
deteccion de iones e interpretacion
se detecto el flujo ionico y se transmite a la computadora, donde se registra en forma de un espectro de masas
el espectro de masas evidencia
el no. de componentes en la muestra y el peso molecular de cada componente
en la interpretacion se pueden
determinar cofactores unidos a iones mtalicos o modificaciones covalentes
trampa de iones
los iones son atrapados aplicando una rqdiofrecuencia en la direccion radial y un potencial continuo repulsivo en la lente de salida
los iones salen de la trampa mediante un voltaje auxiliar
quadrupulo
cuatro barras metalicas de seccion circular o hiperbolica, rectas y paralelas
por pares alternos se aplica un potencial constante V que origina un movimiento lateral oscilant de los iones
TOF-TOF
se puede abrir y cerrar rapidamente la compuerta d paso entre el primer tubo y el TOF tube. el aislamiento no funciona cuando espectro demasiado congestionado
TOF
las muestras de iones se acelera antes de entrar al tubo de tiempo de vuelo
los iones mas pesados se desplazan mas lento, el tiempo que tardan en atravesar el tubo nos dice su masa
analizadores de masas
TOF
TOF-TOF
trampa de iones
quadrupolo
sistema den ionizacion
-ESI (electrospray ionization)
muestra en fase liquida
-MALDI
muestra en fase solida
espectrofotometria de masas
- sistema ionizacion
- analizador de masas
- detector de iones
sistema de ionizacion
vaporizacion e ionizacion a partir de moleculas neutras
analizador de masas
separacion de los iones en funcion de su relacion
detector de iones
deteccion de los iones formados y registro adecuado de infor
