PRINCÍPIOS DAS TÉNCNICAS LABORATORIAIS Flashcards
Quais os cuidados que devemos ter na hora de coletar uma amostra?
-Identificação do paciente/rotulagem da amostra; data e horário da coleta
-Dispositivos de coleta e tubos apropriados
-Amostras NÃO devem ser coletadas acima de um acesso intravenoso com medicação
-Cuidado com tempo excessivo de torniquete 🡪 hemoconcentração
-Lise celular (calibre inadequado de agulha, punção de veias de pequeno calibre/frágeis,
agitação exagerada dos tubos, temperatura no transporte)🡪 falsa elevação de potássio
-Atraso na entrega das amostras 🡪 continuidade do metabolismo celular (p. ex.: baixos
níveis séricos de glicose).
Quais as possíveis técnicas analíticas?
-Espectrofotometria
-Fluometria
-Quimioluminescência
-Citometria de fluxo
-Eletroforese
-Cromatografia
-Espectrometria de massa
-Imunoensaio e imunoquímica
-Imunofluorescência
-Western Blot
Aparelho com o
qual é possível identificar a
composição e concentração de uma solução com base na quantidade de luz que ela absorve e transmite, usado em para quantificar bilirrubina total e ácido úrico presente na urina.
Espectrofotometria
A medição da luz de fluorescência emitida para determinar a concentração de um analito, usado nos testes de fenilcetonúria, hipotireoidismo e fibrose cística:
Fluorimetria
Uma reação química gera energia luminosa, que pode ser medida usado em perícia criminal
Quimioluminescência
Obs:luminol usado na reação
Mensura as propriedades de células suspensas em um meio líquido
Para serem analisadas, as partículas devem estar em suspensão como células
individuais
Utilizada para contar e classificar células ( ex: células sanguíneas no hemograma)
Exemplo: Granulócitos, monócitos e linfócitos são separados de acordo com o tamanho e
o padrão de granularidade. Granulócitos (núcleos irregulares) dispersam mais luz para a
lateral que os linfócitos (núcleos esféricos)
Usado em HEMOGRAMA
Citometria de Fluxo
- Podemos separá-las de acordo com sua migração em um campo elétrico caso elas
tenham tamanhos diferentes,
-Utiliza-se uma matriz, na qual a separação ocorre 🡪 quanto maior a proteína, menos ela
se move nesse meio gelatinoso (agarose, poliacrilamida)
-Também utilizada no
sequenciamento de DNA
Eletroforese
Serve para separar compostos conforme sua afinidade química (interação entre fase móvel, fase estacionária e o analito)
Usado na quantificação de hemoglobina HbA1
Cromatografia
Identifica e determina a composição elementar e a estrutura de compostos
Realiza análise quantitativa de compostos selecionados
Usado para identificar hiperplasia adrenal congênita.
Espectrometria de massa
Um anticorpo ou um antígeno é
utilizado como reagente para detectar o analito de interesse
Imunoensaios
PERMITE A DETECÇÃO E LOCALIZAÇÃO DE ANTÍGENOS EM CÉLULAS E TECIDOS
UTILIZANDO ANTICORPOS ESPECÍFICOS MARCADOS COM FLUOROCROMOS
Utilizada para
diagnóstico
sorológico de
doenças
infecciosas e
autoimunes
Imunofluorescência
Técnica imunoenzimática para quantificar Ac ou Ag
- Um reagente é imobilizado na fase sólida e o outro é ligado a uma enzima
Diagnóstico de infecções: pode ser usado para detectar a presença de anticorpos específicos em casos de infecções virais, como HIV, hepatite B e hepatite C.
Elisa
- Técnica imunoenzimática para detectar proteínas
- Proteínas são separadas pelo tamanho por eletroforese –> transferidas para uma membrana de nitroceulose
(onde ficam imobilizadas)–> ensaio imunoenzimático
Alta especificidade para HIV
Western Blot
A quantidade de luz absorvida por uma determinada solução depende da concentração do soluto
espectrofotometria
Radiações eletromagnéticas são caracterizadas por suas frequência e comprimento de onda Dentre as radiações, qual possui menor frequência?
Infravermelho
