principaux outils d’analyse Flashcards
principaux outils d’analyse : méthodes
separatives
electrophorese / électrophorèse capillaire
electrophorese capillaire : avantage pour les patients avec…
avec peu d’ADN isolable : personnes immunodéprimées, ADN tumoral circulant ⭐️
enzymes nucleases : rôle ⭐️⭐️
coupure des liaisons phosphodiesters ⭐️
hydrolyses
enzymes de restriction =
enzyme produite par les bactéries ⭐️⭐️⭐️
enzyme de restriction mécanisme d’action :
sur quel AN ?
sites de restriction = ?
ADN double brin
sites de restriction = séquences courtes palindromique ⭐️
enzyme de restriction types de coupure : extrémités ..:
extrémités franches => sites l’un face à l’autre
extrémité cohésives => sites PAS l’un face à l’autre
nuclease-CAS9 caractéristiques
• Système CRISPR-Cas9
• Système de défense immunitaire de la bactérie⭐️
• Ciseaux moléculaires
• Outil précis⭐️, simple et universel
• Modification de la séquence⭐️ ou de la régulation de l’expression des gènes de n’importe quelle cellule ⭐️
• Technique d’édition du génome ⭐️
cas9= …
guidée par ..
cas9 = nuclease ⭐️⭐️
qu’idée par un petit fragment d’ARN ⭐️
oligonucléotides de synthèse définition ⭐️⭐️⭐️
petite molécule simple brin d’ADN ⭐️⭐️⭐️ ou d’ARN⭐️⭐️⭐️ de synthèse ⭐️⭐️⭐️
oligonucléotides de synthèse utilisation sous forme de sondes ⭐️⭐️
quelle technique ?
libraries pour …
sondes ⭐️⭐️ => hybridation moléculaire ⭐️⭐️
libraries pour NGS ⭐️⭐️⭐️ = séquençage haut débit
oligonucléotides de synthèse utilisation sous forme d’amorces ⭐️
quelles techniques ?
PCR ⭐️⭐️⭐️
RT-PCR ⭐️⭐️⭐️
techniques de séquençages ⭐️⭐️⭐️
electrophorese gels utilisés
gel d’agarose
gel de polyacrylamide