extraction et dosage des acides nucléiques ⭐️⭐️

Question 1

extraction et dosage des acides nucléiques ⭐️⭐️ à partir de quelles cellules ?

Answer 1

toutes les cellules ⭐️ sauf les globules rouges

Question 2

parmi les critères de choix de la technique on a la qualité d’acide nucléique extrait

Answer 2

vrai ⭐️

Question 3

principales étapes de l’extraction des acides nucléiques

Answer 3

1)Lyse des cellules et dissociation des nucléosomes

2)Dénaturation protéines / complexes nucléoprotéiques

3)Inactivation nucléases

4)Purification des acides nucléiques ADN ou ARN⭐️

Question 4

2) extraction par phénol/chloroforme =

Answer 4

déprotéinisation ⭐️

Question 5

3)précipitation alcoolique de l’ADN ⭐️
=> ADN sous forme ..

Answer 5

solide : pelote d’ADN ⭐️

«Après la lyse des globules blancs, l’élimination des protéines et la mise en contact avec une solution d’alcool, on obtient la formation de la pelote d’ADN.»

Question 6

technique de référence au phénol-chloroforme ⭐️⭐️ : étapes

Answer 6

1️⃣Lyse des cellules ⭐️

2️⃣Extraction au phénol-chloroforme

3️⃣Précipitation alcoolique de l’ADN ⭐️

4️⃣Dissolution dans l’eau (DNAse-free or RNAse-free ⭐️ bien suuur)

5️⃣Dosage ⭐️

Question 7

autres techniques d’extraction de l’ADN génomique

Answer 7

✔️kits commercialisés ⭐️

✔️automates

✔️FTA cards

Question 8

proportions d’ARN dans une cellule

Answer 8

• ARN: 80-85% de l’ARN total
• ARNt: 15-20%
• ARNm: 1-5% ⭐️⭐️

Question 9

extraction des ARN totaux : ARNm d’intérêt en … proportion

Answer 9

faible

Question 10

analyse de la qualité de l’ARN sur …

Answer 10

bioanalyseurs ⭐️⭐️

=> analyse rapport ARNr 18S/ARNr 28S

idéalement pic 28S > pic 18S

Question 11

dosage des acides nucléiques par fluorimétrie

Answer 11

mesure de la fluorescence => détermine concentration et quantité en acides nucléiques

(pas à apprendre par cœur juste sache le)

Question 12

dosage des AN : technique la plus utilisée ⭐️

Answer 12

dosage des AN par spectrophotométrie ⭐️⭐️⭐️

Question 13

dosage des AN par spectrophotométrie ⭐️⭐️⭐️ : rapport DO 260/ DO 280 doit être compris entre ..

Answer 13

1,7 et 2 ⭐️

psk 280nm : dosage des protéines pouvant contaminer l’échantillon

Question 14

dosage des AN par spectrophotométrie ⭐️⭐️⭐️ : pour 1 unité de DO à 260nm : ADN double brin = … μg/mL

Answer 14

50

Question 15

dosage des AN par spectrophotométrie ⭐️⭐️⭐️ : pour 1 unité de DO à 260nm : ADN simple brin = … μg/mL

Answer 15

33

Question 16

dosage des AN par spectrophotométrie ⭐️⭐️⭐️ : pour 1 unité de DO à 260nm : ARN = … μg/mL

Answer 16

40