hybdridation moléculaire Flashcards

1
Q

hybridation moléculaire : nécessité d’une sonde d’au moins combien de nucleotides ?

A

au moins 20

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2
Q

principaux types de sondes

A

✔️ADNc ⭐️⭐️

✔️oligonucleotides

✔️ribosondes ⭐️⭐️: sondes ARN

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3
Q

hybridation moléculaire : nécessité d’une sonde et ..

A

d’un marquage 👍

radioactif ou non radioactif (ex : fluo)

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4
Q

hybridation moléculaire :
✔️hybridation …
✔️hybridation …
✔️hybridation …

A

✔️hybridation en milieu liquide ⭐️
✔️hybridation in situ (ex : FISH ⭐️)
✔️hybridation sur membranes ⭐️

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5
Q

hybridation sur membranes : necessite ..

• Southern-Blot : hybridation …

• Northern-Blot : hybridation …

• Western-Blot : hybridation …

A

nécessite support solide = membrane de Nylon ou nitrocellulose ⭐️

• Southern-Blot : hybridation sonde ADN/ADN cible

• Northern-Blot ⭐️: hybridation sonde ADN/ARN cible ⭐️

• Western-Blot : hybridation Anticorps/ Protéines cibles

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6
Q

southernblot application en diagnostic

A

• Pour risque de maladie chez un enfant en comparant avec les profils des parents⭐️

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7
Q

puces à ADN ⭐️ technique :

✔️Extraction à partir d’un échantillon puis …

✔️Marquage du matériel génétique d’intérêt

✔️Incubation avec une puce à ADN
• Présence de sondes hybridées sur … et ajout de l’échantillon d’ADN
• Variation du signal lumineux selon l’hybridation entre l’échantillon et les sondes fixées

A

✔️extraction puis amplification PCR ⭐️

✔️marquage

✔️incubation
• présence de sondes hybridées sur le support ⭐️⭐️

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8
Q

puces à ADN ⭐️ applications

A

• Analyse de l’expression génique ⭐️⭐️⭐️

• Détection de mutations et polymorphismes

• Détection d’anomalies chromosomiques ⭐️

• Etude d’interaction ADN/Protéines

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