hybdridation moléculaire Flashcards
hybridation moléculaire : nécessité d’une sonde d’au moins combien de nucleotides ?
au moins 20
principaux types de sondes
✔️ADNc ⭐️⭐️
✔️oligonucleotides
✔️ribosondes ⭐️⭐️: sondes ARN
hybridation moléculaire : nécessité d’une sonde et ..
d’un marquage 👍
radioactif ou non radioactif (ex : fluo)
hybridation moléculaire :
✔️hybridation …
✔️hybridation …
✔️hybridation …
✔️hybridation en milieu liquide ⭐️
✔️hybridation in situ (ex : FISH ⭐️)
✔️hybridation sur membranes ⭐️
hybridation sur membranes : necessite ..
• Southern-Blot : hybridation …
• Northern-Blot : hybridation …
• Western-Blot : hybridation …
nécessite support solide = membrane de Nylon ou nitrocellulose ⭐️
• Southern-Blot : hybridation sonde ADN/ADN cible
• Northern-Blot ⭐️: hybridation sonde ADN/ARN cible ⭐️
• Western-Blot : hybridation Anticorps/ Protéines cibles
southernblot application en diagnostic
• Pour risque de maladie chez un enfant en comparant avec les profils des parents⭐️
puces à ADN ⭐️ technique :
✔️Extraction à partir d’un échantillon puis …
✔️Marquage du matériel génétique d’intérêt
✔️Incubation avec une puce à ADN
• Présence de sondes hybridées sur … et ajout de l’échantillon d’ADN
• Variation du signal lumineux selon l’hybridation entre l’échantillon et les sondes fixées
✔️extraction puis amplification PCR ⭐️
✔️marquage
✔️incubation
• présence de sondes hybridées sur le support ⭐️⭐️
puces à ADN ⭐️ applications
• Analyse de l’expression génique ⭐️⭐️⭐️
• Détection de mutations et polymorphismes
• Détection d’anomalies chromosomiques ⭐️
• Etude d’interaction ADN/Protéines