PRACTICA 1 Flashcards
- En el proceso de purificación de ADN genómico desarrollado en la práctica de laboratorio, ¿cómo se analiza si el ADN ha resultado fragmentado durante el proceso?
a. Midiendo la absorbancia de la preparación a 260 nm en un espectrofotómetro.
b. Mediante precipitación con sales y etanol, y posterior centrifugación.
c. Observando el tamaño de la madeja durante la etapa de precipitación.
d. Midiendo la absorbancia de la preparación a 280 nm en un espectrofotómetro.
e. Observando el tamaño del ADN mediante su electroforesis en un gel de agarosa teñido con RedSafe.
e. Observando el tamaño del ADN mediante su electroforesis en un gel de agarosa teñido con RedSafe.
¿Cuál de los siguientes enunciados relativos a la lisis selectiva de eritrocitos es CIERTO?
a. Los eritrocitos son lisados para obtener su ADN.
b. Los eritrocitos son lisados mediante enzimas específicas.
c. Los eritrocitos son lisados mediante su exposición a un tampón de lisis hipotónico.
d. El tampón de lisis de eritrocitos contiene detergentes.
e. Los eritrocitos son lisados mediante desnaturalización térmica a 85ºC.
c. Los eritrocitos son lisados mediante su exposición a un tampón de lisis hipotónico.
¿Cómo es la pureza de una preparación de una muestra de ADN cuya absorbancia a 260 nm es 0,08, y a 280 nm es 0,044? (el cociente da 1,8)
a. Adecuada.
b. Inadecuada.
c. Contiene demasiados lípidos.
d. Este ADN presenta alto grado de degradación.
e. No podemos estimar la pureza de esa preparación de ADN.
a. Adecuada.
Respecto a la lisis de leucocitos realizada en la práctica de purificación de ADN genómico, ¿cuál de los siguientes enunciados es FALSO?
a. La lisis de los leucocitos provoca la liberación del ADN del núcleo.
b. La lisis de leucocitos se realiza mediante choque osmótico con un tampón hipotónico.
c. Los leucocitos se aíslan del resto de componentes sanguíneos antes de lisarlos.
d. La agitación excesiva del lisado de leucocitos puede producir fragmentación del ADN.
e. Los leucocitos se lisan mediante el empleo combinado de detergentes y calor.
b. La lisis de leucocitos se realiza mediante choque osmótico con un tampón hipotónico.
¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre la purificación del ADN genómico humano mediante el empleo de disolventes orgánicos es CIERTA?
a. El ADN genómico se localiza en la fase orgánica (fenol).
b. Los lípidos se localizan en la fase acuosa.
c. El ADN genómico precipita en presencia de fenol y se localiza en la interfase, entre la fase acuosa y la orgánica.
d. El ADN genómico se localiza en la fase acuosa junto con las sales y los azúcares.
e. Las proteínas se localizan en la fase orgánica junto con los lípidos.
d. El ADN genómico se localiza en la fase acuosa junto con las sales y los azúcares.
Respecto a la etapa final de precipitación del ADN genómico dentro del proceso de purificación de ADN genómico, ¿cuál de las siguientes afirmaciones es FALSA?
a. El ADN aparece como una densa madeja de hilos blanquecinos.
b. La alta concentración de sales y en etanol frío provocan la precipitación del ADN.
c. El ADN precipitado puede ser disuelto posteriormente para su utilización.
d. La precipitación del ADN genómico permite separarlo de otros componentes celulares hidrosolubles.
e. El ADN genómico precipita por su incubación a altas temperaturas en presencia de una solución hipotónica.
e. El ADN genómico precipita por su incubación a altas temperaturas en presencia de una solución hipotónica.
La pureza de una preparación de ADN genómico se analiza determinando la relación entre la absorbancia a 260 nm y 280 nm en un espectrofotómetro, pero también se puede medir la relación entre 230 nm y 260 nm. ¿Cuál de los siguientes es el contaminante que podemos determinar mediante esta última relación?
a. Proteínas.
b. Lípidos
c. Azúcares.
d. Hemoglobina.
e. Agarosa.
c. Azúcares. (y fenol)
Cuál de los siguientes listados de pasos en el protocolo estandar de purificacion de ADNg es correct?
a) obtención de las células-purificación-cuantifiación-resuspensión
b)purificación-lisis celular-cuantificación-resuspensión
c) obtención de las celulas-lisis celular-purificación-cuantificación
d) obtención de las células-purificación-resuspensión-control calidad
e) todo incorrecto
c) obtención de las celulas-lisis celular-purificación-cuantificación
si necesitases purificar ARNm a partir de una muestra de sangre que deberías tener en cuenta?
a) la muestra de sangre debe congelarse el dia de antes de ralizar la purificación del ARNm
b) la lisis de los leucocitos debe realizarse por digestión con enzimad
c) los leuccitos deben serparase del resto de celulas sanguíneas antes de comenzar la purificación
d) la muestra de sangre debe ser tratada con glicerol antes de comenzar la purificación
c) los leuccitos deben serparase del resto de celulas sanguíneas antes de comenzar la purificación
´¿Cuál de los siguientes factores no es importante para diseñar un protocolo de purificación de ADNg?
a) la naturaleza de la muestra
b) el número de muestras
c) la cantidad de ADNg necesaria para los estudios genéticos posteriores
d) la naturaleza de la mutacion buscada
e) todo correcto
d) la naturaleza de la mutacion buscada