PCR

Question 1

Etapas

Answer 1

3 Etapas:
Desnaturação - separa fitas
Aumenta temperatura para quebrar ligação de hidrôgenio

Anelamento - especifica região a ser copiada
2 primers - um foward um reverse
Primers são pequenos - 20 bases
Diminuindo temperatura primers grudam na fita
Usados muitos primers para fitas de dna nao voltarem a se juntar

Extensão - colocar DnA polimerase nas partes com primers e elas se movem adicionando bases
Copia DNA
Usada Taq polimerase para aguentar mais temperatura

Question 2

A cada passo numero de fitas dobra

Question 3

Ingredientes

Answer 3

DNA template
Primers
Nucleotídeos
Polimerase
Buffer - sal e íons

Question 4

Base para outras técnicas

Answer 4

Colocar em eletroforese para ver tamanho
Colocar DNA em bactérias
Sequenciar DNA

Question 5

Tamanho máximo

Answer 5

1 a 5 KB

Question 6

Rápida, sensível e robusta

Answer 6

Multiplica trechos bem pequenos de DNA
Capta DNA em amostra degradada
Utilizada em inestigação forense

Question 7

Número de cópias limitado

Question 8

qPCR/PCR em tempo real

Answer 8

Adiciona molécula fluorescente a DNA
Conforme o DNA é multiplicado no PCR a fluorescencia aumenta
Monitora quant de DNA produzida e compara c quant inicial
Mede numero de cópias, expressão genica
Pode ser a partir do RNA ou DNA
Treshold - nível onde quant de material genético passa a ser significante