PCR Flashcards
Qué es una PCR
técnica de laboratorio que permite la producción rápida de millones de una parte de ADN, para estudiar a mayor detalle.
INGREDIENTES PARA UNA PCR
Muestra ADN
Primers
Nucleotidos
Taq plimerasa
Mezcla buffer
Tubo PCR
Termociclador
Proceso de una PCR
Desnaturalización - se separan las cadenas
Reconocimiento - los primers se unen a la base
Extensión - se sintetiza la nueva hebra
TAQ POLIMERASA
Produzca nuevas cadenas de ADN mediante el uso de las cadenas existentes como molde. Se llama así por la bacteria tolerante al calor de la que se aisló (Thermus aquaticus).
Cebador para PCR
Pedazos cortos de ADN de cadena sencilla, de unos 20 nucleótidos. En cada PCR se usan dos cebadores diseñados para flanquear la región blanco (la región que debe ser copiada).
Los cebadores se unen al molde mediante ….
complementariedad de bases.
DESNATURALIZACIÓN 96°
Se calienta para separar las cadenas, proporciona moldes de cadena sencilla.
TEMPLADO 55 a 65°C
Se enfría para que cebadores se unan a su complemento en el molde de cadena simple.
EXTENSIÓN 72°
Se eleva temperatura para que TAQ POLI extienda cebadores y sintetice nuevas cadenas de ADN.
ELECTROFORESIS EN GEL
Técnica, una corriente eléctrica impulsa fragmentos de ADN a través de una matriz de gel y los fragmentos de ADN se separan según su tamaño.
Se incluye un estándar, o marcador de peso molecular, para que determine el tamaño de los fragmentos en la muestra de PCR.