Organización y técnicas de cultivo de células y tejidos Flashcards
¿?Qué es un cultivo in vitro
Es un cultivo en medio nutritivo y bajo condiciones estériles
¿En qué se diferencia el cultivo in vitro del hidropónico?
El hidropónico no se realiza en condiciones estériles
¿Qué 6 tipos de cultivos in vitro distinguimos?
- de planta intacta
- de embriones
- de órganos aislados
- de callo
- de células aisladas
- de protoplastos
¿Cómo se realiza y qué aplicación tiene el cultivo de plantas intactas?
Se siembra la semilla y se cultiva directamente. Se utiliza en orquídeas que necesitan para germinar una simbiosis con micorriza.
¿Cómo se realiza y qué aplicación tiene el cultivo de embriones?
Se cultiva el embrión después de retirar la semilla. Se utiliza en cruces donde el embrión es abortivo.
¿Cómo podemos obtener células aisladas?
De callos o de un grupo de células en suspensión, mecánica o enzimáticamente.
¿Cuál es la composición general de un medio de cultivo para cultivo in vitro?
Macronutrientes: NO3⁻, PO4³⁻, K⁺, Ca²⁺, Mg²⁺ Y SO4²⁻
Micronutrientes: Fe²⁺, Cu²⁺, Zn⁺, Mn²⁺, Mo²⁺, Co y I.
Carbohidratos: sacarosa, glucosa y mio-inositol.
Vitaminas: tiamina B1, piridoxina B6, ácido nicotínico y biotina.
A.A.:glicina y glutamina
Reguladores del crecimiento: auxinas, citoquininas y giberelinas.
Soporte inerte (medios semisólidos): agar (0,7 a 1%) y gelrite
¿Cuáles son los factores físico-químicos a tener en cuenta de los medios de cultivo in vitro?
pH, potencial osmótico, TºC, humedad y aireación
¿Cuál es el rango adecuado de pH y qué ocurre cuando salimos de este?
El rango es 4.5-6.5. Si baja demasiado se despolimeriza el agar, auxinas y giberelinas son menos estables, se precipitan HPO4²⁻ y Fe; y disminuye la absorción de iones NH4⁺
¿Qué ocurre si el potencial osmótico del medio es demasiado menor?
Se detiene la elongación celular y el crecimiento por que deja de absorber agua.
¿Cuáles son las temperaturas adecuadas?
Suele ser 3-4ºC más alta in vitro. Suele mantenerse entre 24-26ºC.
Hay plantas que precisan de un termoperiodo. Geófitos primavera y bulbosas 18ºC. Tropicales 28-29ºC.
¿Qué ocurre si la humedad de la cámara es muy baja o muy alta?
SI es muy alta aumenta el número de contaminaciones y si es muy baja puede influir en la pérdida de agua
¿Por qué es importante la aireación?
Debe de entrar aire y salir el etileno
¿Cuáles son los parámetros para el autoclave?
121ºC durante 20min.
¿Qué precauciones hay que tomar con el autoclavado?
Disminuye el rango de pH aproximadamente 0.3-0.5 unidades, hay que tener cuidado con las sustancias termolábiles y mucho tiempo lleva a que el azúcar caramelice.
