Obtención plantas libres de enfermedades Flashcards
¿Cómo se trasmiten los patógenos de generación en generación?
Bulbos, tubérculos, rizomas, esquejes…
¿Quién y con qué descubrió que los meristemos estaban libres de partículas víricas?
White con el virus del mosaico del tabaco
¿Cuáles fueron las 1º plantas saneadas mediante cultivo de meristemos?
Cultivos de Dahlia por Morel y Martin en 1952
¿Qué son los meristemos?
Grupos de células indiferenciadas que retienen la capacidad de dividirse durante todo el ciclo de vida de una planta
¿Qué 3 propósitos tiene el cultivo de meristemos?
- Posibilitan la micropropagación de distintas especies
- Constituyen el explanto ideal para liberar de patógenos in vitro
- Ampliamente utilizados como explantes para la criopreservación y conservación de germoplasma
¿Qué hipótesis existen para explicar la ausencia de virus en meristemos?
La hipótesis hormonal, de la competencia, mecánica, enzimática y de los inhibidores
¿En qué se basa la hipótesis hormonal?
Altas concentraciones de de auxinas y citoquininas propias de las células meristemáticas (años 50)
¿En qué se basa la hipótesis de la competencia?
Existe competencia en el meristemo entre la producción de partículas víricas y la multiplicación celular
¿En qué se basa la hipótesis mecánica?
Falta elementos vasculares en el tejido meristemático y casi ausencia de plasmodesmos
¿En qué se basa la hipótesis de los inhibidores?
Presencia de inhibidores naturales
¿Qué hipótesis para explicar a ausencia de virus en meristemos son más plausibles?
La hipótesis de la competencia y la mecánica
¿Cómo es la composición del medio nutritivo para cultivo de meristemos?
- Medio sólido (a veces medio líquido con puentes de papel
- pH 5,4-6.0
- Sacarosa 2%
- Vitaminas: B1, piridoxina, ácido nicotínico y ácido pantoténico
- Fitorreguladores a bajas concentraciones (0,1-0,5 mg/L)
¿Qué podemos decir de los medios nutritivos para cultivo de meristemos?
Que son complejos y cada especie vegetal tiene requerimientos diferentes
¿Qué fitorreguladores se suelen emplear en cultivo de meristemos y para qué?
Auxinas y citoquininas para estimular la división celular; y GA3 a veces para la elongación del vástago
¿En qué condiciones de TºC y luz se cultivan los meristemos?
Entre 21-25ºC (plantas bulbosas requieren TºC más baja) y con luz fluorescente)
¿A qué se debe el bajo éxito del cultivo de meristemos <10%?
- No erradicación de virus
- Pérdidas de material por contaminación del medio
- Desecación, necrosis o degeneración del meristemo durante o tras el aislamiento
- Utilización de medio nutritivo inadecuado
- Problemas relacionados con la dormición de las yemas de donde se toman los meristemos
¿Cómo y para qué se hace un tratamiento térmico?
En casos difíciles y cuando hay más de un virus presente.
Tratamiento a 35-38ºC entre 10 días y un mes. A veces se tratan los bulbos o tubérculos a 37-38ºC durante un mes antes de iniciar el cultivo.
¿Cuáles son los pasos para la obtención de plantas libres de virus en patata?
- Obtención explantes
- Brotación de tallos en vericulita + tratamiento térmico
- Desinfección de brotes
- Disección de ápices
- Siembra
- Crecimiento
- Planta libre de virus
¿Cómo y para qué se hacen microinjertos de meristemos?
En especies leñosas donde el cultivo directo de meristemos a veces es imposible. Cuando es muy pequeño se puede microinjertar en una plántula libre de virus que se cultiva in vitro (a veces tras un retratamiento térmico)
¿Mediante qué métodos podemos comprobar si una plántula se encuentra libre de virus?
Plantas testigo, microscopía electrónica, ELISA y PCR
¿En qué se basa la comprobación con plantas testigo?
Se hace un frotis con savia de la planta sobre las hojas de una planta testigo que previamente hemos frotado con carborundo
¿Qué desventajas presenta el uso de plantas testigo y microscopía electrónica?
Plantas testigo–> Tiempo e instalaciones de cultivo
Microscopía electrónica–> Poco usado por ser caro y no frecuente el equipo y material necesario
¿Cuál es el método de comprobación de que la planta se encuentra libre de virus más usado?
PCR
