OBSERVATIONS MICROSCOPIQUES DES MICROORGANISMES Flashcards
Quel type de microscope (photonique/optique ou électronique) permet un plus grand agrandissement?
Le microscope électronique puisque la longueur d’onde des électrons est plus petite que celle des protons, donc diminue la limite de résolution, donc permet un plus grand agrandissement.
PHOTONIQUE: De quoi sont composés les microscopes photonique?
De plusieurs systèmes de lentilles: un condensateur, un objectif et un oculaire.
PHOTONIQUE: Vrai ou faux. Le condensateur modifie l’agrandissement de l’image?
Faux. Seul l’objectif et l’oculaire modifient l’agrandissement de l’image.
PHOTONIQUE: Comment obtenir l’agrandissement total d’une image?
Objectif x Oculaire = Agrandissement.
PHOTONIQUE: Quels sont les facteurs limitants du microscope photonique et sur lesquels pouvons nous intervenir?
- La limite de résolution : on ne peut pas intervenir seulement sur l’ouverture numérique (indiqué sur l’objectif).
- Le contraste : on peut intervenir en effectuant une coloration ou en utilisant des microscopes photoniques conçus pour avoir un meilleur contraste.
PHOTONIQUE: Qu’est-ce qui a la capacité de distinguer une structure de son environnement et qui est proportionnel à la différence de quantité de lumière absorbée (structure vs milieu)?
Le contraste.
PHOTONIQUE: Quel est le principe du microscope à fond clair?
Structures sombres sur un fond clair. Préparation à l’état frais, permet de voir la morphologie (structure), la motilité (déplacement), l’axe de division cellulaire, et les corps d’inclusion cytoplasmiques.
PHOTONIQUE: Quel est le point négatif de la préparation à l’état frais pour l’observation avec le microscope à fond clair?
Peu de contraste, observation difficile.
PHOTONIQUE: Quels sont les types de microscope photonique (5)?
- Microscope à fond clair
- Microscope à fond noir
- Microscope à contraste de phase
- Microscope à contraste d’interférence différentielle
- Microscope à fluorescence
PHOTONIQUE: Comment augmenter le contraste avec le microscope à fond clair?
Avec la coloration de l’échantillon.
PHOTONIQUE: Quels sont les différents types de coloration et qu’est-ce qu’ils permettent d’identifier?
- Coloration simple: un seul colorant (bleu de méthylène, coloration uniforme (colorant a une charge + dans un pH neutre alors que la majorité des microorganismes sont chargés -)
- Coloration différentielle: gram (+ ou -), alcoolo-acido-résistance (plus rapide) et Ziehl-Neelsen (Carbol-Fuchsine), identifier les structures cellulaires à l’intérieur d’un microorganisme
PHOTONIQUE: Quels sont les inconvénients de la coloration de l’échantillon?
- Peu de colorants sont vitaux (mort des cellules)
- Exige la fixation (ne distingue plus la motilité des microorganismes)
PHOTONIQUE: Quel est le principe du microscope à fond noir?
Structures claires sur fond noir.
PHOTONIQUE: Quelles sont les différences entre la microscopie à fond clair vs la microscopie à fond noir?
Au niveau du condensateur : cône de Abbe + miroirs, éclairage oblique et visualisation des rayons déviés.
PHOTONIQUE: Quel est le principal avantage du microscope à fond noir?
Visualisation sans fixation ni coloration (observer des cellules vivantes, peut voir les divisions cellulaires et le déplacement).
PHOTONIQUE: Quel est le principe du microscope à contraste de phase?
Structures sombres sur un fond clair.
Mise en phase de la lumière incidente: réfraction de la lumière par les structures cellulaires induit un changement de phase de la lumière, donc un changement d’intensité de lumière.
PHOTONIQUE: Que peut-on utiliser pour augmenter le confort de l’observateur lors de l’utilisation du microscope à contraste de phase?
Des filtres colorés.
PHOTONIQUE: Quels sont les avantages du microscope à contraste de phase?
Visualisation de structures fines sans fixation ni colorations (cellules vivantes).
PHOTONIQUE: Vrai ou faux. Le microscope à fond noir est plus récent que le microscope à contraste de phase.
Faux.
PHOTONIQUE: À quel niveau le microscope à contraste de phase est-il différent?
Différences internes au niveau du condensateur et des objectifs (anneaux de phase).