Nukleinske kisline Flashcards

1
Q

iz česa so nukleotidi?

A

*dušikove baze *sladkorne enote *ene ali več fosfatnih skupin

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

nukleozidi

A

(deoksi)riboza(C1’) + baza (N9 ali N1), povezani z glikozidno vezjo

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

nukleotidi

A

nukleozid + ena ali več fosfatnih skupin

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

AMP

A

najpogostejši mononukleotid v celici

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

nukleinske kisline

A

polimeri nukleotidov, povezanih s 3’,5’ fosfodiestrsko vezjo
od prostega 5’-konca proti prostem 3’-koncu

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

nivoji strukture DNA, lastnosti vijačnice

A

*primarna struktura (zaporedje nukleotidov)
*sekundarna struktura (ponavljajoče se ureditev polinukleotidnih verig)
*terciarna struktura (dodatno zvitje)
desna vijačnica
antiparalelni verigi

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

stabilizacija vijačnice

A

H-vezi, pi-interakcije med naloženimi bazami

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

taljenje DNA

A

DNA se stali v ozkem temperaturnem intervalu (5-10 oC) *prevoju talilne temperature pravimo temperatura tališča Tm *proces je reverzibilen

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Nukleosom

A

enota, sestavljena iz histona (8) in okoli navite DNA (147 bp) imenujemo nukleosom

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

dodatno zvijanje DNA

A

*kompaktnost *odpornost na cepitev *vpliv na uravnavanje podvojevanja in prepisovanja
*topoizomeraze so encimi, ki katalizirajo pretvorbo

manj stabilna oblika

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

tridimenzionalne strukture RNA

A

notranje zanke izbokline/lasnične zanke

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

tRNA

A

*najmanjše molekule izmed RNA (74-93 nukleotidov)
*oblika L (2D deteljica), tri lasnične zanke
*segmenti z dvojno vijačnico *stabilizacija preko H-vezi
*CCA konec za vezavo ak *antikodonska zanka

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

nukleaze

A

*prisotne v vseh celicah, katalizirajo hidrolizo fosfodiesterskih vezi
*razgrajujejo poškodovane nukleinske kisline
*tip a cepijo vez s 3’ -OH skupino
*tip b cepijo vez s 5’ -OH skupino

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

restrikcijske endonukleaze

A

*so najbolj specifične endonukleaze (več 100)
*so bakterijski encimi, ščitijo pred bakteriofagi (lastna DNA zaščitena z metilacijo)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

eksperimentalna potrditev semikonzervativne replikacije

A

*gojili E. coli v mediju z NH4Cl, označen z 15Ntežkim izotopom dušika (DNA je težja) *prenesli v medij z 14NNH4Clin spremljali dogajanje skozi generacije

*’težko’ DNA, ki vsebuje dve verigi 15N-DNA
*‘lahko’ DNA, ki vsebuje dve verigi 14N-DNA
*hibridno« DNA

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

podvojevanje linearne DNA pri evkariontih

A

*podvojevanje vsakega kromosoma začne hkrati na več izhodiščih (∼30.000 mest ori, ∼100/kromosom)
*enako, kot pri prokariontih poteka v obesmeri *posamezna izhodišča tvorijo replikacijske mehurčke (replikon) *replikacijski mehurčki se na koncu združijo

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

Dna polimeraze

A

*encimi, ki katalizirajo sintezo DNA
*za delovanje potrebujejo matrico(starševsko DNA) *potrebujejo Mg2+ione (2 v akt. mestu encima)
*za začetek delovanja potrebujejo predhodno začetni oligonukleod
*podaljševanje nastajajoče verige začne vedno v smeri 5’à3’ *matrična veriga se bere3’à5’ *energijo za reakcijo daje sprostitev molekule pirofosfata in njegova hidroliza do ortofosfata
*lahko imajo eksonukleazno akvnost (sposobnost odcepljanja napačno sparjenih baz)

18
Q

vrste DNA polimeraz (baktrijske)

A

*DNA polimeraza III je glavni podvojevalni encim
kompleksna struktura, 10 podenot (900 kDa), večja hitrost *DNA polimerazi I in II pa sodelujeta pri kontrolnem branju in popravljanju napak
delujeta dodatno kot nukleazi (cepita fosfodiestersko vez)

19
Q

helikaza

A

*protein za razpiranje DNA *veže se na izhodišče replikacije *prekine H-vezi *reakcija je sklopljena s hidrolizo ATP

20
Q

DNA –giraza

A

*pomaga pri odvijanju verig DNA (zmanjša napetost) *oblikujejo se replikacijske vilice *po vezavi DNA deluje encim v treh korakih
*cepi eno izmed verig DNA (nukleof. napad Tyr)
*se prestavi preko te cepitve
*ponovno poveže DNA

21
Q

proteini SSB

A

*vežejo se na enoverižno DNA *stabilizirajo izpostavljene verige (zaščita pred nukleazami)

22
Q

primaza

A

je RNA polimeraza, ki najprej sintetizira kratko zaporedja RNA (RNA primer, 4-10 nt)

23
Q

DNA polimeraza III in I med replikacijo

A

*podaljševanje vodilne verige gre v smeri napredujočih replikacijskih vilic
*podaljševanje zaostajajoče verige gre v obratni smeri , dokler ne doseže RNA-primerja
*RNA-primer se z eksonukleazno aktivnostjo DNA polimeraze I v smeri 5’à3’ odstrani
*DNA polimeraza I sintetizira predel RNA primerjev -zapolni vrzel
*sintetizira se nov RNA primer za nov Okazakijev fragment

24
Q

DNA ligaza

A

katalizira nastanek fosfodiestrske vezi

25
replikacija pri prokariontih
izhodišča replikacije so pri nižjih evkariontih bolje karakterizirana hitrost replikcijskih vilic je 10 x počasnejša kot pri prokariontih več vrst DNA polimeraz in drugih encimov ter proteinov pomembna lastnost po katerih se evkariontska DNA razlikuje od prokariontske je linearnost –prosti konci (telomeri)
26
telomere
*vzdržujejo stabilnost genoma *nekodirajoče dvojnovijačne regije meja dolžine telomere (Hayflick limit)povzročijo staranje telomerazeso aktivne le v embrionalnih in rakavih celicah
27
kaj delajo telomeraze?
rešujejo težavo tako, da podaljšajo 3’-konec z zaporedjem TTAGGG podaljšan del je sedaj matrica za DNA polimerazo, da dokonča manjkajoče zaporedje
28
spontane mutacije
ob upoštevanju popravljalnih mehanizmov je napak 10-10 spontana hidroliza (odstrani se purinski obroč) deaminacija tavtomerija baz
29
splošni popravljalni sistem
*z endonukleazami katalizirana cepitev ene od fosfoestrskih vezi, ki povezujejo napačen nukleotid v verigo DNA *odstranitev napačnega nukleotida z eksonukleazo *vključitev pravilnega nukleotida s pomočjo DNA-polimeraze I ali III *zapolnitev vrzeli z nastankom fosfoesterske vezi s pomočjo DNA-ligaze
30
UV sevanje kot mutageni dejavnik
*izpostavitev DNA UV-svetlobi povzroči kovalentno povezavo med sosednjimi pirimidinskimi bazami (T ali C) *nastali dimer prisili DNA v upogib, napačna vezava nukleotida pri podvojevanju (zamenjava C s T)
31
kemijski mutageni
alkilirajoča sredstva *modificirajo baze in povzročijo nastanek napačnih parov pri naslednjem podvojevanju interkalatorji *hidrofobne aromatske spojine *vrinejo se med naložene bp v DNA, strukturne spremembe *povzročajo insercije ali delecije *v raziskovalnih laboratorijih *kot barvilo za zaznavanje DNA
32
prokariontska RNA polimeraza (transkripcija)
RNApol apoencim (α2ββ’ω) + σ podenota-->RNApol holoencim *α podenoti stabilizirata kompleks, interagirata z DNA in vežeta regulatorne elemente *β podenoti tvorita aktivno mesto *σ podenota –omogoči vezavo na promotor, kasneje oddisocira s kompleksa *ω podenota stabilizira kompleks
33
potek transkripcije
polimeraza izvaja in nadzoruje vse korake prepisovanja RNA polimeraza poišče specifično mesto vezave (promotor) del DNA se razpre matrična veriga se prepiše v RNA
34
RNA polimeraze lastnosti
isto kot DNA nukleaze nepotrebujejo predhodno začetnega oligonukleotida
35
potek transkripcije
*vezava na promotorsko regijo upočasni potovanje DNA polimeraze *sproži razprtje dvojne vijačnice (12 -15 bp) –prepisovalni mehurček *sinteza se začne z vstopom prvega ribonukleotida *na mestu +1 prepisovanje de novo, brez začetnega oligonukleotida *podaljševanje verige RNA poteka v smeri 5’-->3’ *konec sinteze RNA nadzorujejo posebna zaporedja DNA *Pri E. coli so odkrili dva načina terminacije, ki sta del novonastale mRNA: (s proteinom ρ (rho), preko tvorbe lasnične zanke)
36
oblike polimeraz
DNA polimeraza -->od DNA odvisna DNA polimeraza RNA polimeraza -->od DNA odvisna RNA polimeraza RNA replikaza --> od RNA odvisna RNA polimeraza reverzna transkriptaza --> od RNA odvisna DNA polimeraza
37
operon
zaporedje genov pod kontrolo skupnega promotorja mRNA, ki kodira več proteinov hkrati, pravimo policistronska
38
zorjenje evkariontske tRNA
*krajšanje 5‘-koncev s cepitvijo fosfoestrskih vezi *zamenjava UU z CCA *izrezovanje introna *modifikacija heterocikličnih baz, običajno metiliranje
39
inhibitorji transkripcije
aktinomicin D (antibiotik pri kemoterapiji), alfa-amanitin (inhibira RNA polimerazo II)
40
KOMPLEKS KI KATALIZIRA IZREZOVANJE INTRONOV
Spliceosom (samll nuclear ribonucleic particle)