Moleculaire Markers 2 Flashcards
Single nucleotide polymorphisms
Basenparen variaties op specifieke locaties op het genoom, die bij minstens 1% van de populatie voorkomen
Hoe ontstaan SNP’s
Fout van DNA replicatie gedurende meiose
Hoeveel SNP nodig om net zo discriminerend als STR te zijn
50-100
Verschillende technieken voor verkrijgen SNP-profielen
- Sanger sequencen
- Mini-sequencen
- Next generation sequencen
Sanger sequencen (mastermix)
- 1 template
- 1 primer
- mix van dNTPs en ddNTPs
Mini-sequencen (mastermix)
- 1 template
- 1 primer
- ddNTP’s
Next generation sequencen (mastermix)
> 100 templates
Nadeel gebruik SNP
Minimaal ongeveer 50 nodig tov 16 STR
Voordelen gebruik SNP FO
- identificatie mogelijk bij sterk gedegradeerd materiaal
- lage mutatiesnelheid
Voor maximaal onderscheidend vermogen SNP-sets dienen
De geselecteerde SNP polymorf te zijn binnen alle populatie groepen
DNA-sequenties die binnen het genoom van positie kunnen veranderen
Mobile elementen (insertion Polymorfisme)
Shirt interspersed elements (SINE)
<500bp
Grootste familie binnen SINES
Alu-elementen
Alu-elementen
- Primaat specifiek (<300bp lang)
- high copy number
- meeste elementen niet meer mobiel
- locaties voornamelijk in intronen
Wat kan gebruikt worden om de mate van DNA-degradatie te beoordelen
Degradatie-index (DI)
Waar hangt een succesvolle genotypering van af
- Concentratie (kwantiteit)
- Mate van degradatie (kwaliteit)
Degradatie-index (DI) kan bepaald worden aan de hand van
Twee onafhankelijke high copy number retrogransposable elementen
(Yb8 Alu en SVA)
Grootte yb8 Alu fragment en voor wat wordt het gebruikt
80bp om aanwezige DNA te kwantificeren
Grootte SVA fragment en waarvoor wordt het gebruikt
207bp maat voor het amplificeerbare DNA
Formule Degradatie-index
DI = Yb8 Alu (kort) / SVA (lang)
Lage of hoge DI bij meer degradatie monster
Hoe hoger DI hoe meer degradatie
Welke markers zijn naast STR beter voor het bepalen van de etniciteit
SNP’s en mtDNA
Wat kan gebruikt worden voor typeren van uiterlijke kenmerken
Forensische DNA-phenotypering
Hoe is forensic DNA-phenotyping ontstaan
Limitatie van DNA-profilering als
1. personen die onbekend zijn bij opsporingsautoriteiten ontbreken in databank
2. Gehele criminele populatie wordt niet gecoverd in FO dna databank