Módulo 5: Ciclo celular, DNA e Ploidia

Question 1

O que é necessário para que uma fase do ciclo celular avance?

Answer 1

CDK (cyclin dependent kinase) e ciclinas (regulam CDK)

Question 2

Em que partes se divide o ciclo celular?

Answer 2

Interfase:
* G1 (crescimento)
* S (duplicação DNA)
* G2 (Crescimento e preparação para mitose)

Mitose (Profase, metafase, anafase, telofase)

Question 3

As células da primeira fase do ciclo celular continuam sempre para S?

Answer 3

Não! Podem ficar retidas em G0 para reparação

Question 4

Alterações cromossómicas e células cancerosas são resultado de um ciclo celular …

Answer 4

descordenado

Question 5

O que é constante durante o ciclo celular: a quantidade de CDK ou a sua atividade?

Answer 5

A quantidade

Question 6

Que agentes podem ser identificados por imunofenotipagem durante o ciclo celular? Que informação nos dão?

Answer 6

• Proteínas associadas ao controlo do ciclo celular; detetar a fase do ciclo celular

Ki-67 está presente em todas as fases menos na de repouso (G0)

Question 7

Qual é o constituinte celular mais medido na avaliação do ciclo celular?

Answer 7

Conteúdo de DNA

Question 8

A quantificação do DNA celular serve para avaliar:

Answer 8

• nível ploidia
• posição no ciclo celular
• células apoptóticas

Question 9

Em citometria, o conteúdo em DNA é definido com os termos …

Answer 9

DNA ploidy / DNA index (DI)

Question 10

Qual é o DNA index ao longo do ciclo celular?
E na apoptose?

Answer 10

• G0/G1 = 1
• G2/M = 2
• S: 1< DI < 2
• apoptose <1

Question 11

O que é a ploidia celular?

Answer 11

Nº de cromossomas da célula

Question 12

O nº normal de cromossomas de uma célula somática é:

Answer 12

2n

Question 13

Aneuploidia é…

Answer 13

nº anormal de cromossomas

Question 14

Para marcar o conteúdo em DNA, deve-se usar um fluorocromo estequiométrico?

Answer 14

Sim

Question 15

Os resultados da medição do conteúdo de DNA são apresentados comumente na forma de…

Answer 15

histogramas de frequência

Question 16

A coloração de DNA por ser feita em células … ou …

Answer 16

Vivas ou fixas

Question 17

Quais são os corantes mais usados para marcar DNA de cell. vivas

Answer 17

• Hoechst 33342
• DRAQ5

Hoechst é citotóxico, principalmente quando incidido com UVs

Question 18

Quais são os corantes mais usados para marcar DNA de cell. fixadas

Answer 18

• DAPI
• PI
• 7-AAD

Question 19

A utilização de PI requer pré-tratamento de…

Answer 19

RNAse, uma vez que o PI também se liga ao RNA

Question 20

Apesar do DAPI ser específico do DNA, este não é…

Answer 20

estequiométrico

Question 21

As normas de análise de DNA (estandardização) foram feitas por …

Answer 21

eritrócitos de truta e galinha

Question 22

Para que haja homeostase, há morte celular. Como se chama esse processo?

Answer 22

Morte celular programada

Question 23

A partir de critérios … existem … tipos de morte celular:

Answer 23

Morfológicos
3
* apoptose: tipo 1
* morte celular autofágica: tipo 2
* necrose

Question 24

Qual é a principal via de morte celular?

Answer 24

Apoptose

Question 25

Quais as características da apoptose?

Answer 25

• porcesso organizada
• dependente ATP
• degradação DNA internucleossomal regularizada
• membrana celular intacta
• não há inflamação
• ativação de caspases

Question 26

A autofagia é resposta a…

Answer 26

fome de nutrientes e stress ambiental

Também relacionado com determinadas doenças

Question 27

A necrose está associada a …

Answer 27

• esgotamento do ATP
• inchaço dos organelos
• rotura celular
• inflamação
• fragmentação do DNA tardia e aleatória

Question 28

De que forma operam as caspases?

Answer 28

De forma hierárquica como iniciadores e efetores.

Question 29

Existem quantas vias de sinalização para ativação das caspases?

Answer 29

2
Intrínseca (stress celular) e Extrínseca (com recetores de morte)

Question 30

Os ensaios para a apoptose são diversos uma vez que …

Answer 30

a apoptose é um processo regulado por vários passos.

Question 31

Que métodos existem para detetar a apoptose?

Answer 31

• ativação de caspase
• fragmentação de DNA
• alterações na membrana
• dano mitocondrial

Question 32

As técnicas que detetam a fragmentação do DNA são específicas da apoptose?

Answer 32

Não. Mas podem detetar danos numa variedade de morte celular

Mesmo assim, é o método mais usado para destacar cell apoptóticas.

Question 33

A deteção da degradação do DNA faz-se normalmente por … .
As céll. apoptoticas demonstram um perfil … enquanto que as necróticas…

Answer 33

Eletroforese em gel
Apoptose: escada
Necrose: esfregaço

Question 34

Que métodos de marcação de DNA podem ser usados?

Answer 34

• enzimática (ISNT e TUNEL)
• flurocromo (intercalam com DNA, por isso o sinal pode ser menor em apoptose)

Question 35

Que característica está associada à membrana celular de células em apoptose?

É dependente de caspase?

Answer 35

passagem de fosfatidilserina da membrana interna para a externa

Sim

Question 36

Também se usa PI em ensaios da membrana. Para quê?

Com afinidade à fosfatidilserina, usa-se …

Answer 36

Uma vez que distuingue células saudáveis e nas fases iniciais de apoptose das células nas fases finais de apoptose

Annexin-V

Question 37

A passagem da fosfatidilserina para a membrana externa acontece nos estágios iniciais ou finais?

Answer 37

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