Módulo 4: Imunofluorescência e Compensação Flashcards

1
Q

No sistema imunitário, as linhas celulares dividem-se em:

A
  • Mielóide
  • Linfóide
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2
Q

Os plasmócitos são…

A

células produtoras de anticorpos (forma solúvel da imunoglobulina)

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3
Q

Onde maturam os linfócitos T?

A

No timo

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4
Q

Os linfócitos T helper expressam CD… enquanto que os T cytotoxic expressam CD…

A
  • Helper: CD4
  • Cytotoxyc: CD8
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5
Q

O que entendes por diferenciação celular?

A

Mudanças que ocorrem nas células que levam à sua especialização.

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6
Q

Uma célula totalmente diferenciada ainda se consegue diferenciar? E dividir?

A

Já não se consegue diferenciar mais mas ainda pode ter a acapacidade de dividir.

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7
Q

Em que orgão/região se começa a hematopoiese?

A

Na medúla óssea

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8
Q

As células estaminais originam células … que por sua vez originam células …

A

–> progenitoras –> terminalmente diferenciadas

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9
Q

Que fator leva à diferenciação?

A

Expressão génica

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10
Q

Que funções podem ter as proteínas que se encontram na superfície celular?

A
  • recetores de growth factors
  • moléculas de adesão
  • enzimas extracelulares
  • transdução de sinal
  • Reatividade antigénica: Antigénios
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11
Q

A expressão dos antigénios da superfície celular depende:

O que retirar pela avaliação destas proteínas, uma vez que dependem destes fatores?

A
  • da linhagem celular
  • do estado de maturação

Identificar e isolar células diferentes e os seus estados de maturação

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12
Q

As células estaminais têm capacidade de … por isso mantêm-se indiferenciadas.

A

auto-renovação

Quando se dividie, só uma delas entra na linhagem.

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13
Q

Devido à auto-renovação das células estaminais, o seu nº …

A

mantém-se constante

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14
Q

A capacidade da descêndencia das células estaminais em se diferenciar aumenta/diminui à medida que a diferenciação avança.

A

Diminui

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15
Q

As células hematopoiéticas são multi ou pluripotentes?

A

Multipotentes

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16
Q

As células hematopoéticas são CD…

A

CD34 e CD38-

17
Q

À medida que as células hematopoiéticas se diferenciam começam a expressar CD…

A

CD38

18
Q

O que quer dizer “CD”? O que são?

A

Clusters de Diferenciação
Moléculas da superfície celular (antigénios) de leucócitos e cell hamatopoiéticas

CD + nº = antigénios bem caracterizados; CDw = reconhecidos apenas por 1 anticorpo

19
Q

As funções dos CD são unitárias?

A

Não! Podem ter várias funções (ex: recetor de sup. cell; moléc. de adesão, etc)

20
Q

As moléculas CD são usadas como … celulares, permitindo a identificação e isolamento de cell.

A

Marcadores

21
Q

Outro nome para “anticorpo” é …

A

Imunoglobulinas

22
Q

Os anticorpos são moléculas de … criadas pelos linfócitos …

A

Glicoproteínas
Linfócitos B

23
Q

A ligação antigénio-proteína é covalente?

O reconhecimento do antigénio dá-se na sua totalidade?

A

Não é covalente!
Pode ser:
* forças eletroestáticas
* pontes de H
* forças van der waals
* hidrofóbicas

Apenas uma pequena região

24
Q

Uma das aplicações mais difundidas em citometria de fluxo é…

A

Imunofluorescência.

25
Q

Porque é que se usam 2 ou mais anticorpos para marcar as células?

A

Porque células diferentes podem expressar o mesmo marcador. Utilizar 2 ou mais anticorpos permite a sua distinção

26
Q

A maior parte dos marcadores usados em células imunes liga-se a …

A

CD

27
Q

As melhorias a nível dos marcadores, fluorocromos, equipamento e software permite a imunofenotipagem a … cores.

A

15-18

28
Q

Qual é o passo mais importante na preparação da amostra para imunofenotipagem por citometria de fluxo?

A

Criar uma suspensão de células únicas

29
Q

A coloração das células pode ser feita … ou …

A
  • Direta (anticorpo + fluorocromo)
  • Indireta (anticorpo + (anticorpo + fluorocromo))
30
Q

A escolha do fluorocromo depende…

A

do laser disponível.

31
Q

Fluorocromo + laser mais usado são:

A

Fluoresceína + laser de argon

Ficoeritina (PE) como segunda cor (amarelo)

Foi o primeiro fluorocromo a ser usado

32
Q

A que se deve a sobreposição espetral? Qual a consequência?

A

À sobreposição dos espetros de emissão dos fluorocromos.
Células que só têm um fluorocromo podem ter sinal de outro.

33
Q

Para separar a emissão de fluorescência da fonte de luz + separar diferentes emisões, os citómetros de fluxo devem ter:

A
  • Filtros band-pass (separa comprimentos de onda emitidos)
  • Espelhos dicroicos (separa luz excitante da emitida)
34
Q

O que é “compensação de fluorescência” e como se faz?

A

Subtração de parte do sinal deixando apenas o desejado.
Por software.

35
Q

A compensação de fluorescência é algo pré-determinado?

A

Não, tem de ser feita, exclusivamente, para cada combinação diferente de fluorocromos.

36
Q

O sorting de células pode ser realizado por base no seu sinal de fluorescência?

A

Sim!

37
Q

Os quadrantes nos citogramas são sempre necessários de usar?

A

Não

38
Q

Que aplicações clínicas tem a imunofenotipagem?

A
  • análise de leucemias e linfomas (em diferentes estágios)
  • Enumeração de cell. estaminais
  • Imunodeficiencias
  • infeção por HIV
  • Controlo de qualidade
39
Q

A citometria de fluxo/massa permite analisar 36 proteínas, tendo high throughput.

A

Massa