Microscopie et Coloration

Question 1

Réflexion

Answer 1

Onde rebondit, responsable de la couleur

Question 2

Absorption

Answer 2

Énergie de la lumière conservée par l’objet.
Peut être émise à nouveau (luminescence ou fluorescence)

Question 3

Transmission

Answer 3

Passage de la lumière à travers des objets sans déviation

Question 4

Diffraction

Answer 4

Déviation ou courbure des rayons lumineux lors de leur passage à travers une ouverture de petite taille

Question 5

En quoi la diffraction est limitante en microscopie?

Answer 5

La longueur d’onde doit être plus petite que le trou

Question 6

Réfraction

Answer 6

Déviation de la lumière en fonction de la densité de la matière qu’elle traverse.
Utiliser pour faire du contraste (indice de réfraction spécimen et milieu doit être différente)

Question 7

Résolution

Answer 7

Capacité d’une lentille à présenter des objets distinctement, sans chevauchement (lambda courte = meilleure résolution)

Question 8

Qu’est-ce que la microscopie optique?

Answer 8

Utilisation de l’énergie du spectre lumineux et des lentilles pour observer.
Dépend de la source lumineuse, du type de lentille, du condensateur et du récepteur

Question 9

Quels sont les 5 exemples de microscopes optiques?

Answer 9

1) Fond claire (visible)
2) Fond noir (visible)
3) Contraste de phase (visible)
4) À fluorescence (UV)
5) Confocal (lazer)

Question 10

MO - Fond clair

Answer 10

Échantillon plus foncé sur fond brillant.
Spécimens frais et contrastés ou morts et colorés (utile pour dénombrement)
1000X = max

Question 11

MO - Fond noir

Answer 11

Échantillon « brillant » sur fond noir.
Spécimens vivants invisibles en fond clair, impossible à colorer (si oui déformé)
Condensateur modifié avec disque opaque (lumière réfléchie sur le spécimen atteint l’objectif)
Pour voir les structures générales

Question 12

MO - Contraste de phase

Answer 12

Observation des STRUCTURES INTERNES d’organismes vivants (non fixés, non colorés)
Pour augmenter le contraste entre structures d’épaisseurs variables (si brillant= faible n, si foncé = fort n)

Question 13

MO - Fluorescence

Answer 13

Utilisation de la capacité à absorber la lumière U.V. et l’émettre dans le visible

Question 14

Fluorescence

Answer 14

Capacité à absorber les UV et émettre de la lumière visible (fluorescence naturelle ou nécessite l’utilisation de fluorochromes).

Question 15

Fluorochrome

Answer 15

Substance naturellement fluorescente ou colorant fluorescent absorbant UV et les réémets en lumière visible.

Question 16

Filtre d’émission

Answer 16

Retient les UVs et laisse passer la lumière visible émise par le
fluorochrome

Question 17

MO - Immunofluorescence

Answer 17

Utilisation d’anticorps associés à des fluorochromes.
Technique très spécifiques ou les anticorps liés aux fluorochromes vont se lier spécifiquement à un antigène ou à une protéine)

Question 18

MO - Confocal

Answer 18

Pour la construction d’image tridimensionnelles (2D ou 3D) en utilisant les fluorochromomes.
Un laser balai l’échantillon couche par couche.
Super pour l’étude de biofilm.

Question 19

Qu’est-ce que la microscopie électronique?

Answer 19

Utilisation d’un faisceau d’électrons (meilleur résolution) et des électroaimants (pas de lentille)
Idéal pour visualiser des spécimens de moins de 0,2 µm (virus et structures bactériennes internes)
Spécimen non-vivants, nécessite une longue préparation.
Nécessite une mise sous vide du système et donne des images en noir et blanc seulement.

Question 20

Quels sont les 2 exemples de microscopes électroniques?

Answer 20

À balayage (SEM) et à transmission (TEM)

Question 21

ME - À transmission (TEM)

Answer 21

Deux dimensions
Échantillons en coupe très minces (structures internes avec différentes
opacités)
Électrons traversent un spécimen jusqu’au détecteur
Grossissement jusqu’à 100 000X

Question 22

ME - À balayage

Answer 22

Trois dimensions
Pour images tridimensionnelles des surfaces (structures externes)
Électrons du spécimens renvoyés vers un capteur
Grossissement jusqu’à 10 000X

Question 23

Qu’est-ce que la microscopie à sonde?

Answer 23

Utilisation du principe du Braille avec une sonde et un signal électrique (pas de lumière ou d’électrons)

Question 24

MS - Force atomique

Answer 24

Mesure la topographie des objets et en construit une image.
Utilisable en fonction du temps
Matériel vivant
Grossissement jusqu’à 100 000 000x

Question 25

Nomme les deux techniques afin d’observer un échantillon en MO

Answer 25

Montage frais (pique) et montage fixe

Question 26

Colorant basique?

Answer 26

Sels d’ions positifs qui vont se lier aux bactéries (car chargée négativement).

Question 27

Colorant acide?

Answer 27

Sels d’ions négatifs qui ne vont pas se fixer aux bactéries, mais aux structures positives en arrière plan (coloration négative)

Question 28

Coloration simple

Answer 28

Utilisation d’un colorant basique.

Pour déterminer la taille, la forme ou le groupement.

Question 29

Coloration différentiel

Answer 29

Nécessite au moins deux colorants

Pour discriminer pour des caractéristiques distinctives des microorganismes

Question 30

Coloration négative

Answer 30

Utilisation d’encre de Chine pour révéler une capsule

Question 31

Coloration des endospores

Answer 31

Coloration de Schaeffer-Fulton

Question 32

Coloration des flagelles

Answer 32

Mordant, puis colorant basique

Question 33

Décrit les étapes de la coloration de Schaeffer-Fulton

Answer 33

1) Fixer le frottis
2) Vert de malachite (chauffage et évaporation)
3) Lavage à l’eau
4) Contre-coloration à la safranine
5) Lavage à l’eau

Question 34

Décrit les étapes de la coloration de Gram

Answer 34

1) Colorant (violet de cristal)
2) Mordant (lugol) pour solidifier le complexe dans la paroi
3) Décoloration (éthanol 95%) pour lavage
4) Contre-colarant (safranine)

Question 35

Décrit les étapes d’une coloration acido-alcoolo résistante

Answer 35

1) Fushine basique chauffée (augmente la fluidité de la membrane d’acide nicolique), rinçage à l’eau
2) Décoloration acide-alcool, puis rinçage à l’eau
3) Bleu de méthylène (contraste), puis rinçage à l’eau

Si rouge= présence d’acide nicolique qui conserve le fushine dans la paroi