Methode D'etudes Des Proteines

Question 1

Dans quels cas uttilise t’on la loi de la spectrophotométrie beer lambert

Answer 1

Molecules dans un milieu simple

Molecules preponderante dans un milieu complexe

Question 2

Dans le cas d’une molécule minoritaire dans un milieu complexe
Que fait on ?

Answer 2

On l’étudie par reaction colorimetrique 
Car : concentration trop faible 
Milieu trop complexe 
Pas de spectre caractéristiques 
Pas de dosage simple possible

Question 3

Quels s deux types de dosages colorimetrique

Answer 3

Methode de biuret
Et
BCA= acide bicinchoninique

Question 4

En quoi consiste la methode de biuret

Answer 4

Complexe de l’azote des liaison peptidique avec le cuivre

Question 5

Quel pH est nescessaire a la methode de biuret

Answer 5

Ph alcalin

Question 6

Absorbance de la methode de biuret et bca

Answer 6

540 nm biuret

Bca 562 nm

Question 7

En quoi consiste la bca

Answer 7

Meme methode que biuret sauf qu’on uttilise des ions cuivres chelaté par 2 BCA

Question 8

Biuret et BCA sont sensibles jusqua quelle concentration ?

Answer 8

Biuret = 1mg 
Bca = 2μg/mL

Question 9

Vf: dans l’electrophorese native les protéines sont dénaturées

Answer 9

Faux elles ne sont pas dénaturées

Question 10

Quel type de support uttilise ton dans l’electrophorese native

Answer 10

Fel d’aggarose ou PAGE (polyacrylamide )

Question 11

Dans l’electrophorese native les proteines sont séparés par leur poid moleculaire V/F

Answer 11

Faux les protenes sont separees selon leur charge

Question 12

Pour quel diagnostic sert l’electrophorese native ?

Answer 12

Pour la drepanocytose

Question 13

Quelle est la différence entre une Hemoglobine S et une hémoglobine A1

Answer 13

On a un AA acide perdu (GLU) dans Hbs

Question 14

Vf: l’hemoglobine S migre au plus loin pôle - que HbA1

Answer 14

Faux et faux

Sens de migration du - —> + et hbs migre moins que HbA1

Question 15

Dans l’electrophorese denaturante on peut utiliser 2 sortes de produits,lesquels ? Quelles sont leur particularités

Answer 15

SDS= detergent anionique: entoure les molecules d’une charge -
=> elimine la structure spatiale des proteines
β-mercaptoéthanol: agent réducteur
=>reduit les ponts SS

Question 16

Quel type de support uttilise t’on pour l’electrophorese denaturante

Answer 16

SDS PAGE

Question 17

Electrophorese denaturante : molecules séparées selon leur charge vf?

Answer 17

Faux séparés selon leur poids moleculaire

Question 18

Vf: Electrophorese dénaturante: prot qui ont un faible poids moléculaire migre plus vite du - vers +

Answer 18

Vrai

Question 19

Quel support uttilise t’on pour l’electrofocalisation ?

Answer 19

Gel page + gradient de pH

Question 20

Les prots sont dénaturéses pour l’electrofocalisation vf?

Answer 20

Faux elles ne sont pas dénaturées

Question 21

Electrofocalisation =migration selon charge vf?

Answer 21

Faux migration selon phi

Question 22

Electrophorese bidimensionelle : parametre de migration ?

Answer 22

1- selon pHi : IEF

2-puis selon Poids moléculaire) SDS PAGE

Question 23

Electrophorese bidimensionelle : les prots sont dénaturées

Answer 23

Faux elle sont non dénaturées puis dénaturées

Question 24

Electrophorese denaturante : combien de composés peuvent être analysés au maximum ?

Answer 24

60

Question 25

Electrophorese bidimensionelle est ensuite analysé par quoi ?

Answer 25

Spectrometrie de masse -> identification

Question 26

Les deux etapes du western blot

Answer 26

1- Separation par electrophorese :sds page

2- transfert des proteines sur une membrane

Question 27

2 types de membranes utilisées pour le western blot :

Answer 27

Nitrocellulose ou PVDF

Question 28

Electrophorese capillaire : quel type de support uttilise t’on ?

Answer 28

Milieu liquide solution tampon

Question 29

Electrophorese capillaire : comment migrent les proteines ?

Answer 29

Selon leur charge et leur poids moleculaire

Question 30

A quoi est couplée l’Electrophorese capillaire

Answer 30

A un spectrophotomètre

Question 31

Quels sont les atouts de l’Electrophorese capillaire

Answer 31

Rapide sensible et automatisable

Question 32

Définition de la proteomique

Answer 32

Analyse de l’ensemble des proteines a un instant t dans un environnement donne

Question 33

2 outils servent a la proteomique, les quels ?

Answer 33

1- electrophorese ou chromatographie pour la seperation
Puis spectro de masse pour l’identification
Ou 2- puces a proteines

Question 34

Par quelle molecule sont clivés les proteines pour leur identification + mécanisme d’action

Answer 34

Par l’endopeptidase TRYPSINE qui clive en plusieurs peptidique la proteine en CTerm des ARG ou LYS

Question 35

Comment s’appelle l’ancienne methode qui sequence chaque peptide depuis l’extrémité NTerm

Answer 35

Methode edman

Rompt la liaison du dernier aa

Question 36

Quel est le but des biopuces a proteine

Answer 36

Permet d’analyser des 1000iers de proteines avec une qté minimale d’echantillon

Question 37

Principe des biopuces a proteine

Answer 37

Interactions sandwich basé sur l’interaction AC<=> AG

Question 38

les biopuces peuvent identifier Jusqua cb de proteines sur une lame ?

Answer 38

10 000 différentes

Question 39

Qu’est-ce que la proteomique descriptive ?

Answer 39

Inventaire des proteines presente dans un échantillon

Question 40

Qu’est-ce que la proteomique d’expression ?

Answer 40

Comparaison de proteines soumises a 2 conditions differnetes
Ex: determination des proteines caractéristiques d’une pathologie pour s’en servir comme biomarqueur