Manipulación genetica Flashcards
Manipulación genetica. Definición, tecnica y herramienta más común.
Es la ingenieria genetica
Consiste en la extracción de un gen de un individuo, y la inserción de dicho gen en el material genetico de otro individuo para que este ultimo pueda expresarlo.
Tecnica: Tecnología del ADN recombinante. (molecula de ADN formada por genes de distintas especies)
Herramientas: Enzimas de restricción. Reconocen y cortan segmentos especificos de ADN. Vienen de bacterias)
Conceptos.
Gen: Segmento de ADN que codifica para un polipeptido o para una molecula funcional de ARN
Loci o Locus: Lugar o lugares específico donde se encuentra determinado gen
Codificar: Sintetizar
Genotipo: Característica genetica de cada individuo. (Constitución genetica de una sola celula o individuo) Solo los gemelos lo pueden tener igual.
Genoma: Característica genetica de la especie
Fenotipo: Caracteristicas observables, cuantificables de un organismo que resulta de la interacción del genotipo con el ambiente
Clonación genetica. Procedimiento
Objetivo: Clonar genes
1.- Se obtienen genes con enzimas de restricción
2.- Se extrae plasmido de bacterias cultivadas (tienen ADN y solo estan en bacterias), y se corta un pedazo de plasmido con la misma enzima de restricción para que encaje
3.- Se encaja el fragmento de ADN en el plasmido, y se utiliza enzima ADN ligasa para unirlos apropiadamente. Ahí queda el ADN recombinante
4.- Introducción del ADN recombinante para que se exprese (se expresa : ADN →ARN →proteinas) como proteinas. Vector de clonación
5.- La bactería se divide y quedan más bacterias con ese gen. Luego se pueden aislar las proteinas de la descendencia.
Tambien puedo simplemente clonar el gen sin necesidad que se exprese el gen, onda mi objetivo no es extraer proteinas sino tener muchas veces el gen, por ej.
(Primero se aisla el ADN, igual que en todos los procedimientos de este tipo)
Conceptos
ADN recombinante: ADN que tiene genes de dos organismos distintos por las tijeras geneticas
Vector de clonación: Plasmido. Porque él permite y en él se expresa el ADN recombinante
Fago o bacteriofago: Virus que infectan bacterias
Ventajas de los plasmidos como vectores de clonación
Mayor estabilidad del ADN circular durante el aislamiento químico
Facilidad de aislamiento y manipulación por sel tamaño pequeño
Presencia de un origen de replicación independiente al adn cromosomico principal de la bacteria.
La existencia de una o varias copias (permite la amplificación del ADN)
Permite la resistencia a antibioticos.
Facil detección y selección de clones por la presencia de marcadores especificos (genes de resistencia)
Antibioticos tipicos PAES: penicilina, ampicilina, tetraciclina
Virus o fagos (bacteriofagos)
Actuan como vectoresz de clonación
Son virus que infectan a bacterias y durante la traducción algunos genes de la bacteria huesped pueden incorporarse a su genoma y ser transferidos al infectar a otra bacteria
Si infectan a celulas se llaman simplemente vectores de clonación
Transferencia nuclear
Se transfiere el nucleo completo
Clonación organismo
Experimento Dolly: Se extrajo de una oveja blanca el nucleo de una celula somatica (2n) y el nucleo del ovocito (n) de una oveja negra. Se incerto el nucleo de la celua somatica (2n) en el ovocito sin nucleo, y eso se implanto en el utero de una oveja negra, dando a luz a un clon de la oveja blanca.
Cosas importantes de la clonación de organismo (conclusiones de la clonación de la rana)
-Cada nucleo celular contiene la info. necesaria para generar organismos nuevos
-El nucleo de la celula somatica puede volver a activar su capacidad Totipotencial y dar lugar a un organismo
-Los organismo clonados viven poco, porque vienen de celulas somaticas que han pasado por multiples divisiones celulares, dejando los telomeros cortos
Principales aplicaciones. Definición transgenico
Trans (de otro lado)
Transgenico: Organismo con un gen extraño de otro organismo
-Producción insulina con bacterias transgenicas (se le inyecta el gen de la insulina)
-Industria lechera
Principales aplicaciones
-Clonación terapeutica: (utilizando celulas del propio paciente, se generan las celulas que el necesita)
Se extrae el nucleo de celula somatica y se incerta en ovocito sin nucleo, esta fecundación se desarrola en laboratorio hasta blastocisto (celulas pluripotenciales) hasta que den las celulas que el paciente necesita y se las transplantan
-Animales transgenicos: Hacen que cerdos produzcan leche con mucha vit. C, se les extrae esa vit. y se trabaja con fines terapeuticos, pescados más grandes
-Vestimentas y detergentes: Bacterias modificadas geneticamente para producir grandes canidades de índigo (colorante azul que viene de las plantas). Tambien se producen enzimas que despues se les agraga a los detergentes
-Terapia genica: Usar un virus para insertar un gen en las celulas de un paciente.
Organismo transgenico y organismo knock out
Transgenico: Se le incerta un gen extraño
Knock out: Se le desactivban ciertos genes a traves de mutagenesis
PCR
Reacción en cadena de la polimerasa
Objetivo: Amplificar material genetico (genes en especifico)
Para reaplicar el ADN se utiliza la enzima polimeraza.
Covid: Si veía que estaba el ARN del virus, replicaba muchas veces genes en especifico, hasta tener una gran muestra de esos genes y que sea más facil detectarlos
El PCR amplifica material genetico y para visualizarlo se utiliza electroforesis.
Y despues si quiero clonar utilizo clonacion genetica.
Virus para clonar
Si no estoy utilizando plasmido de bacteria, entonces utilizo virus.
