Leishmania

Question 1

מהו מחזור החיים של טפיל לישמניה?

Answer 1

פרומסטיגוט שנקשר ומתרבה במעי הזבובה, נודד לבלוטת הרוק שלה ומתפתח למטאסייקליק-פרומסטיגוט. כאשר הזבובה עוקצת יונק הטפילים שבבלוטת הרוק יוצאים כיוון שהשסתום בזבובה לא יכול להיסגר טוב עם הטפילים והם נבלעים ע”י תא בלעני (נויטרופיל/מאקרופאג’/תא דנדריטי). בתא הבלעני הפאגוזום שבתוכו הטפיל הופך לפאגוליזוזום ואילו הטפיל מתפתח לאמאסטיגוט ומתרבה. לבסוף הוא מפוצץ את התא ומדביק תא בלעני אחר, עד שזבובת חול לוקחת ארוחת דם מהיונק, ארוחת הדם מגיעה למעי של הזבובה ושם הטפיל מתמיין חזרה לפרומסטיגוט.

Question 2

Promastigote

Answer 2

שלב מוטילי, מוארך וחוץ תאי בעל פלאג’לה

Question 3

Promastigote

Answer 3

שלב מוטילי, מוארך וחוץ תאי בעל פלאג’לה. בלישמניה- נמצא בתוך זבוב החול.

Question 4

Metacyclic promastigote

Answer 4

סוג אחר של פרומסטיגוט. שלב אלים שגודל בתוך הזבוב חול משלב הפרומסטיגוט, יושב בבלוטות הרוק ומוכן להעברה מזבוב החול ליונק.

Question 5

מי הוקטור של לישמניה?

Answer 5

זבובת חול.

Question 6

מי המאכסן הסופי של לישמניה?

Answer 6

יונקים.

Question 7

איך לישמניה עוברת מזבוב החול לאדם?

Answer 7

הטפיל יושב בבלוטות הרוק של הזבובת חול, הזבובה עוקצת ולוקחת ארוחת דם כאשר היא בהריון לצורך התפתחות הביצים, ובאותו זמן מכניסה ליונק את המטאסייקליק-פרומסטיגוט.

Question 8

למה דווקא מטאסייקליק-פרומסטיגוט הוא השלב בלישמניה שמדביק יונקים?

Answer 8

יש שינויים גנטיים, מורפולוגים, ביטוי של חלבונים שספציפיים לשלב הזה שעוזרים להדביק את היונקים.

Question 9

איזה תאים עושים פאגוציטוזה לטפיל הלישמניה?

Answer 9

נויטרופילים, מאקרופאג’ים ותאים דנדריטים.

Question 10

Amastigote

Answer 10

שלב תוך תאי שאינו מכיל פלאג’לה ובו יש רבייה. בלישמניה- מתפתח בפאגוליזוזום בתאים פגוציטים של היונק.

Question 11

מה השלב שגורם למחלת הלישמניה?

Answer 11

Amastigote.

Question 12

איזורים אנדמיים עיקריים ללישמניה?

Answer 12

דרום אמריקה והמזרח התיכון (כולל ישראל).

Question 13

מהי מחלה אנטרופונוטית?

Answer 13

מחלה שמועברת מבן אדם לבן אדם, בין אם באמצעות וקטור ובין אם בלי.

Question 14

איזו סוג מחלה היא לישמניה?

Answer 14

מחלה שהיא גם זואונוטית וגם אנטרופונוטית.

Question 15

דרכי הדבקה בלישמניה שאינם דרך זבובת החול

Answer 15

1. חולי איידס שמשמשים מאגר לכל החיים אחרי שהם נדבקים
2. נרקומנים שמשתמשים באותה מחט
3. השתלות איברים (גם אם האדם ממנו הגיע האיבר היה א-סימפטומטי, האדם שמקבל את ההשתלה גם בדר”כ מקבל תרופות אימונו-סופרסוריות)
4. תרומות דם? בארץ לא מקבלים תרומות דם מאנשים שחלו בעבר

Question 16

כמה מינים/תת מינים של לישמניה יש? ומה הם המינים העיקריים עליהם למדנו?

Answer 16

עד 21 מינים, לא כולם באותו איזור בעולם ולא כולם גורמים לאותה המחלה.
המינים העיקריים:
א. לישמניה טרופיקה
ב. לישמניה בראזיליאנסיס/ויאניה קומפלקס (ברזיל ודרום אמריקה)
ג. לישמניה דונבאני (הודו ואפריקה)
ד. לישמניה אינפנטום
ה. לישמניה אתיופיקה (אתיופיה)
ו. לישמניה מייג'ור
ז. לישמניה מקסיקנה

Question 17

Cutaneous לישמניה

Answer 17

לישמניה של העור/שושנת יריחו, קיימת בארץ. גורמת לכיב במקום העקיצה בעור, כתלות במע’ האימונית של האדם, מין הלישמניה ומקום העקיצה. הכיב מופיע תוך כחודש ומתרפא בדר”כ לאחר כמה חודשים עד 5 שנים.

Question 18

Visceral לישמניה

Answer 18

לישמניה של האיברים הפנימיים, נגרם בעיקר ע”י קומפלקס לישמניה דונבאני (הקומפלקס מורכב מלישמניה דונבאני ולישמניה אינפנטום). קיים בעיקר באפריקה, הודו, דרום אמריקה וסביב הים התיכון.
יש בעיקר שני סוגים: אינפנטום שפוגע בעיקר בילדים עד גיל 15, ודונבאני שפוגע בכל הגילאים ונמצא בעיקר בהודו ואפריקה.
בלישמניה של האיברים הפנימיים לא רואים פצע חיצוני בדר”כ, אך המחלה יכולה לגרום למוות.
הסימפטומים הם: טחול מוגדל, ירידה בנפח כדוריות הדם האדומות, טפילים במח עצם, ואנמיה. כמו כן, טיפול בלישמניה דונבאני יכול להוביל ל-PKDL.

Question 19

PKDL

Answer 19

Post-kala-azar dermal leishmaniasis
מחלה שנגרמת ע”י לישמניה דונבאני, בעיקר בהודו ואפריקה, לאחר קבלת טיפול ללישמניה ויסצרלית. מדובר על מחלה של העור במהלכה מתפתחיל פצעים המלאים בטפילים. מחלה שנורא קשה להיפטר ממנה.

Question 20

Mucocutaneous לישמניה

Answer 20

לישמניה של הריריות, מתחילה כפצע נקודתי כמו שושנת יריחו והטפילים עוברים מטאסטאזיס ונעים בלימפה עד שהם מגיעים לרקמה הרכה של האף, לסת והפה. נורא קשה לטפל ולא מגיב טוב לטיפול. לאחר עשרות שנים גורם להרס של הרקמה של הפה, לסת ואף. מושפע ע”י המערכת האימונית ומין הטפיל. נגרם בעיקר ע”י שני מינים: לישמניה ברזיליאנסיס שבדרום אמריקה ולישמניה אתיופיקה שנמצאת בעיקר באתיופיה.

Question 21

Diffuse לישמניה

Answer 21

מאוד נדיר ונמצא בעיקר בדרום אמריקה. מתרחש כאשר המערכת האימונית לא מזהה את הטפיל (גם אם המערכת האימונית של האדם באופן כללי תקינה). גורם לפצעים בכל הגוף שמלאים בטפילים.

Question 22

טיפולים ללישמניה

Answer 22

לא קיים חיסון לבני אדם, כן קיים חיסון לכלבים.
התרופות העיקריות מבוססות על אנטימוני (אורגניק-מתלו-קומפלקס), מדובר על חומר רעיל, דוג’ לתרופות הללו הן פאנטוסטאם או גלוקאנטיים. גם ישנה התרופה אמפוטאריצין בי. בנוסף יש תרופה בשם פאנטאמידין שכבר לא משתמשים בה.
הבעיות העיקריות בתרופות (בעיקר הישנות יותר) היא היעילות הנמוכה, הרעילות שלהן, הצורך לפעמים באישפוז בכדי לתת אותן, עמידות של הטפיל לתרופות וחולי איידס (אצלהם התרופות לא כל כך עובדות).
אחת התרופות היותר חדשות וטובות היום עם פחות תופעות לוואי, היא אמפוטאריצין בי שהוכנס לליפוזומים. התרופה נאגרת בכבד שם לתאים יש נטייה לפאגוציטוזה ויש הרבה טפילים.
שתי תרופות חדשות נוספות הן מילטאפוסין שפותחה במקור לסרטן ולא הייתה יעילה כנגד סרטן אבל כן במקרה של לישמניה (אם כי אסורה לנשים בהריון- עלולה לגרום למוטציה), לרוב משולבת עם עוד תרופה בכדי למנוע פיתוח עמידויות, והתרופה פארומומייצין שכבר הרבה זמן משמשת לשושנת יריחו אבל היום משמשת גם עם תרופות נוספות לטיפול בלישמניה של האיברים הפנימיים.

Question 23

אבחון לישמניה

Answer 23

סימפטומים, חיפוש טפילים בביופסיה (טחול, כבד, מח עצם, עור) ותירבות, חיפוש נוגדנים. הכי נפוץ היום: שימוש ב-פי סי אר- בעזרת דנ”א שלוקחים מהפצע ושימוש בפריימרים לגן או איזור בדנ”א של הלישמניה. אם אותו איזור קיים גם בדנ”א של האדם אז עושים תרבית של הטפילים קודם. השיטות הללו יכולות במקרים מסוימים גם לשמש לצורך הבדלה בין המינים השונים.

Question 24

kDNA/Kinetoplast DNA

Answer 24

דנ”א מיוחד שיש במשפחת הפרוטוזואה שנקראת קינטופלסטידה. לישמניה, טריפנוזומה ברוסי וטריפנוזומה קרוזי שייכות למשפחה הזו. הדנ”א הזה יושב במיטוכונדריה של הטפיל בתוך אברון הקינטופלאסט ומורכב מכ-10 אלף מיני עיגולים, לכן שימוש במיני עיגולים הללו בפי סי אר היא שיטה מאוד רגישה לזיהוי הטפיל שכן בכל טפיל בודד כבר יש מלכתחילה כ-10 אלף כאלו. משמשים ליצירת גאייד רנ”א שמעורב בעריכה של כ-12 גנים.
ישנם גם מקסי-עיגולים שהם מקודדים את הגנים של הדנ”א המיטוכונדריאלי.
השיטה הזו לא טובה אבל לזיהוי מין הטפיל כי בפי סי אר משתמשים באוריג’ין אוף רפליקיישן ששמור בין המינים השונים.

Question 25

ITS-PCR

Answer 25

פי סי אר כנגד קטע ברנ”א הריבוזומלי שנמצא בין היחידה הקטנה של הריבוזום לבין 5.8 אס. שיטה די רגישה. בעזרת שימוש באנזימי רסטריקציה יכול לשמש גם לזיהוי בין כמה מינים שונים (נקבל פסים שונים בהרצה בג’ל) אבל לא אלו של דרום אמריקה.

Question 26

למה בלישמניה של העור שנגרמת דווקא ע”י לישמניה מייג’ור יש בדר”כ יותר מפצע אחד?

Answer 26

הטפיל משפיע על היכולת של הזבובה לקחת ארוחת דם, לכן היא לא לוקחת מספיק דם ועוקצת את אותו האדם כמה פעמים.

Question 27

מה הם מיני הלישמניה שאנדמים לישראל?

Answer 27

שלושה מינים: לישמניה מייג’ור שגורם לשושנת יריחו, לישמניה טרופיקה שגם היא גורמת לשושנת יריחו, ולישמניה אינפנטום שגורמת ללישמניה ויסצרלית.
בנוסף, ישנם מינים שמיובאים לארץ ע”י פליטים, עולים, מטיילים וכו’, ביניהם: לישמניה דונובאני, לישמניה ברזיליאנסיס ולישמניה מקסיקנה.

Question 28

פיזור הלישמניה בארץ

Answer 28

לפני 1995: בצפון בגליל לישמניה אינפנטום, בדרום נגב ערבה ובקעת הירדן לישמניה מייג’ור, בכפר אדומים לישמניה טרופיקה.

כיום: בצפון גליל גדה מערבית ומישור החוף (באיזורים שלא מאוד עירוניים כמו ת”א) לישמניה אינפנטום, מעלה אדומים טבריה כרמיאל ואפילו מישור החוף לישמניה טרופיקה. לישמניה מייג’ור נשאר די זהה עם כמה מוקדים חדשים בבית שאן ועוטף עזה.

Question 29

גורמים אפשריים לשינוי פיזור הלישמניה

Answer 29

א. אקלים, חימום כדור הארץ, שינויי בכמות הגשם וכו’
ב. שינוי בחיות המאגר
ג. ריכוז של זבובי חול וכמובן סביבה שמתאימה להם
ד. בנייה של כפרים באיזורים חדשים
ה. נסיעות
ו. חולי במחלות אחרות
ז. מלחמות

Question 30

האם לישמניה עוברת בצורה ורטיקלית מאם לעובר?

Answer 30

אפשרי, אבל אין הרבה דיווחים.

Question 31

Minisatellite

Answer 31

חזרות בתוך הגנום של האורגניזם, יותר גדולות ממיקרוסטלייט (כ-15-100 זוגות בסיסים). בדר”כ לא יושבים בתוך הגנים אלא ביניהם. אפשר להשתמש בהם בכדי להסתכל על השוני בגנים בין אורגניזמים- במקרה של לישמניה השתמשו בהם בכדי לראות האם הלישמניה אינפנטום במרכז הגיעה מהצפון, לקחו אנזימי רסטריקציה שחותכים מחוץ לחזרות והריצו את התוצאות על ג’ל (סאות’רן בלוט) עם פרוב מסומן לחזרות ולפי מספר וגודל הפסים השונים שנוצרים אפשר להבדיל בין גנוטיפים שונים של האורגניזם.

Question 32

Microsatellite

Answer 32

חזרות בתוך הגנום של האורגניזם, יותר קטנות ממיניסטלייט (כ-2-6 זוגות בסיסים). בדר”כ לא יושבים בתוך הגנים אלא ביניהם. יכול להיות הומוגני (אם בשני האללים הם באורך זהה) או הטרוגני (אם בשני האללים הם באורכים שונים).
אפשר להשתמש בהם בכדי להסתכל על השוני בגנים בין אורגניזמים- במקרה של לישמניה השתמשו בהם בכדי לראות האם הלישמניה אינפנטום במרכז הגיעה מהצפון, לקחו אנזימי רסטריקציה שחותכים מחוץ לחזרות והריצו את התוצאות על ג’ל (סאות’רן בלוט) עם פרוב מסומן לחזרות ולפי מספר וגודל הפסים השונים שנוצרים אפשר להבדיל בין גנוטיפים שונים של האורגניזם.

Question 33

מאיפה הגיעה הלישמניה אינפנטום שבמרכז הארץ?

Answer 33

בהתחלה חשבו שמהצפון, אבל גילו שזה לא אותו גנוטיפ. כיום משערים שמדובר על לישמניה שתמיד הייתה במאגרים בטבע במרכז הארץ והתפרצה לאחר שהחלה בנייה באיזור.

Question 34

מהם שלושת הגנוטיפים של לישמניה בארץ?

Answer 34

א. מרכז אסיה
ב. מזרח תיכון
ג. צפון הגליל (גנוטיפ ייחודי לארץ)

Question 35

איזה סוג טפיל לישמניה?

Answer 35

פרוטוזואה (אאוקריוטי חד תאי), קינטופלסטיד, דיפלואידי.

Question 36

איזה זבוב חול הוא בדר”כ הוקטור של לישמניה מייג’ור?

Answer 36

Phlebotomus papatasi

Question 37

מה היו חיות המאגר החדשות ללישמניה מייג’ור שנמצאו בשדה אליהו?

Answer 37

Voles

Question 38

LPG (Lipophosphoglycan)

Answer 38

Glycolipid made of:

1. Lipid anchor to the parasites membrane that is identical in all species
2. Core made of different sugars that is identical in all species
3. Phosphosaccharide repeats made of disaccharide repeats with Phospho-ester links between them, the number of repeats changes according to species and stage of the parasite
4. Cap made of sugars.

מדובר על פקטור אלימות בעל תחלופה מהירה שבסופה הוא משתחרר מהטפיל לסביבה. הוא גם משמש לדיאגנוסטיקה. מכסה את כל הממברנה של הטפיל, נמצא אך ורק בשלב החוץ תאי של הפרומסטיגוט והמטאסייקליק-פרומסטיגוט, אם כי הוא לא זהה בין שניהם.
הוא חשוב לקישור הטפילים למעי של זבוב החול, חשוב לעמידות למערכת המשלים, מעורב בקישור לרצפטורים של מע’ המשלים במקרופאג’ים, מדכא העברת סיגנלים, מעכב איחוי של הפאגוזום עם הליזוזימים, מעכב מולקולות שגורמות להרג ו/או אוקסידציה, ועוד.

Question 39

מה הטריגר של טפיל הלישמניה להתמיינות מאמאסטיגוט לפרומאסטיגוט?

Answer 39

Low temp an the pH difference in the sand fly.

Question 40

מה קורה לטפילי לישמניה שלא נקשרו לאפיתל במעי הזבובה?

Answer 40

הם יוצאים החוצה לטבע בצואה של הזבובה עם שאריות ארוחת הדם ומתים. זה מה שיקרה במקרה וזבובת החול היא לא מהסוג המתאים לזן הטפיל.

Question 41

Metacyclogenesis

Answer 41

ההתמיינות מהפרומסטיגוט שמתחלק למטאסייקליק-פרומסטיגוט.

Question 42

איך טפיל הלישמניה נקשר למעי של הזבובת חול?

Answer 42

בעזרת חלבון הנקרא לקטין, שקושר סוכרים. לזבובת החול יש על גבי התאים לקטין שנקשר באופן ספציפי לסוכר כלשהו, לדוגמה גל-לקטין נקשר לגלקטוז. על גבי האל-פי-ג’י של הטפיל יש סוכרים שונים.

Question 43

lpg1

Answer 43

Gene involved in the synthesis of the LPG core.

Without it there’s no LPG, but there are other sugar molecules.

Question 44

lpg2

Answer 44

Gene to the enzyme responsible to the synthesis of disaccharides in the parasite.
בלעדיו לטפיל אין שום מולקולות עם דיסכרידים על פני הממברנה שלו. חלק מהסוכרים הללו משמשים גם להגנה על הטפיל מאנזימים פרוטאוליטיים שבמעי של הזבובה, בלעדיהם הזבובה תעכל אותם.

Question 45

איזה זבוב חול הוא בדר”כ הוקטור של לישמניה טרופיקה?

Answer 45

Phlebotomus sergenti

Question 46

איזה זבוב חול הוא בדר”כ הוקטור של לישמניה דונובאני?

Answer 46

Phlebotomus argentipes

Question 47

באיזה שלב טפילי הלישמניה הופכים לעמידים יותר בפני מערכת המשלים ומדוע?

Answer 47

בשלב הסטציונרי, כי אז יש גם מטאסייקליק-פרומסטיגוטס שהם יותר עמידים בפני מערכת המשלים. הסיבה שהם עמידים יותר היא שהאל פי ג’י שלהם ארוך יותר ובכך מרחיק את מערכת המשלים שנקשרת אליו מהממברנה.

Question 48

PNA

Answer 48

Peanut agglutinin

לקטין שנקשר באופן ספציפי לגלקטוז. בעל ארבע אתרי קישור.

Question 49

אגלוטינציה

Answer 49

שיטה להפרדה של המטאסייקליק-פרומסטיגוטס מהפרומסטיגוטס. משתמשים בלקטין מבוטנים שקושר גלקטוז בארבע אתרי קישור שונים. הפרומסטיגוטים נקשרים בזמן שהמטאסייקליק-פרומסטיגוט (שהרי כבר לא אמורים להיות קשורים גם למעי של הזבובה אלא לבלוטת הרוק) אינם נקשרים.

Question 50

מהו השלב האלים של טפיל הלישמניה?

Answer 50

Metacyclic promastigote

מדובר על שלב יותר אלים שכן יש לו יכולת הרבה יותר טובה להדביק מאקרופאג’ים ולשרוד בהם ואף להדביק עכברים.

Question 51

מה תפקיד מערכת המשלים, עליה למדנו?

Answer 51

לחורר את הממברנה של הפתוגן

Question 52

מהם שלושת מסלולי מערכת המשלים עליהם למדנו?

Answer 52

1. Mannose binding pathway
   מסלול של המערכת המולדת, נעשה בעזרת לקטין שקושר את הסוכר מנוז שלא אמור להיות בגוף שלנו
2. מסלול אלטרנטיבי
   גם הוא חלק מהמערכת המולדת, פועל כל הזמן באופן ספונטני ונקשר גם לתאים של פתוגנים וגם לתאים עצמאיים ונעצר ע”י נקודות רגולטוריות שבהם מזוהה שהוא נקשר לתא עצמי
3. המסלול הקלאסי
   חלק מהמערכת האדפטיבית, מתווך ע”י נוגדנים

כל שלושת המסלולים מובילים לנקודה משותפת ובסופם נוצרת תעלה בממברנה של הפתוגן. ברגע שיש מספיק תעלות, הפתוגן ימות.

Question 53

MAC

Answer 53

Membrane attack complex
התעלה שנוצרת בממברנת הטפיל ע”י מערכת המשלים. נקשרת לסוכרים באל פי ג’י. במטאסייקליק-פרומסטיגוט האל פי ג’י ארוך מספיק בכדי להרחיק את התת יחידות סי 9 שמרכיבות את התעלה מהממברנה ובך מונע את יצירת התעלה והחירור של הממברנה. כאשר האל פי ג’י מופרש ומוחלף, התת יחידות הללו מופרשים איתו.

Question 54

איך המאקרופאג’ מזהה את טפיל הלישמניה?

Answer 54

או ע”י מרכיבי משלים הקשורים לטפיל או ע”י רצפטורים נוספים הקושרים את הטפיל.

Question 55

The influence of LPG on the phagolysosome

Answer 55

הוא מונע את ההתבגרות של הפאגוליזוזום. מעכב את המיזוג עם הלייט אנדוזום ואת המיזוג עם הליזוזומים. בזמן הזה הטפיל מתמיין לאמסטיגוט.

Question 56

What happens to the LPG after the parasite is inside the macrophage?

Answer 56

הוא מופרש ונכנס לממברנה של המאקרופאג’ ומשפיע על תכונות ממברנליות ואינטרקציות שלו.

Question 57

Lectin

Answer 57

חלבון שקושר סוכרים. לדוגמה גל-לקטין נקשר לגלקטוז.