le fractionnement Flashcards
fractionnement
principe de la technique
la technique est basé sur le fait que les organites ont des densités cellulaire différents
étapes du fractionnement
on doit analyser les différentes fractions
pour retrouver quels types d’organites on a…
• Principe : tester, par exemple, une activité
enzymatique ou réaliser un western blot
(identifier une protéine caractéristique d’un
organite…)
pricipe du fractionnement
-l’accélération entraîne les particules vers le fond du tube
-Toute particule plongée dans un liquide subit 2 forces:
1) Son poids qui est dirigé vers le bas (force gravitationnelle à laquelle la particule est soumise)
2) La poussée d’Archimède dirigée vers le haut (liée à la nature du liquide : milieu)
Selon la densité de la particule, égale, supérieure ou inférieure au milieu liquide, elle remontera ou descendra dans le liquide, jusqu’à atteindre un niveau d’équilibre
(= sédimentation)
comment peut-on augmenter l’efficacité des méthodes de séparation?
en centrifugeant dans des gradients
de densité
pricipe (centrifugeant dans des gradients de densité)
La vitesse de sédimentation d’une
particule (organite, macromolécule,…) est
fonction de la différence entre sa densité et celle
du milieu ambiant.
• La particule s’élève dans le milieu ambiant
Jusqu’à ce quelle atteigne une densité identique
à la sienne (elle peut éventuellement flotter).
après centrifugation?
on doit analyser les différentes fractions
pour retrouver quels types d’organites on a
• Principe : tester, par exemple, une activité
enzymatique ou réaliser un western blot
(identifier une protéine caractéristique d’un
organite…)
