Lab coloration HE (Histotechnologie) Flashcards
Modification numéro 1 colore quels éléments:
Éléments non nucléaires avec éosine non acidifié.
Déparaffinage non complété:
Taches ou zones blanches peuvent être observées dans les sections de tissus après l’étape de déparaffinage.
Qu’est ce qui cause la déparaffinage non complété:
- eau ayant demeuré dans le tissu
- séchage incomplet des coupes
- séjour trop court dans les bains de xylène lors du déparaffinage
Manque de détails nucléaires:
Lorsqu’il est pratiquement impossible d’observer les différents motifs de la chromatine dans le noyau, la coloration nucléaire est souvent surnommée brouillés ou boueuse.
Qu’est ce qui cause le manque de détails nucléaires:
- fixation incomplète
- chaleur excessive lors de la circulation des tissus ou lors du séchage des coupes
Noyaux colorés trop pâle peut être causé par:
- un séjour trop court dans la solution d’hématoxyline
- utiliser une solution d’hématoxyline suroxydée ou expirée
- trop de différenciation de l’hématoxyline
- si dans une section d’os, décalcification excessive
- fixateur très acide (correction en augmentant le séjour dans l’hématoxyline ou en utilisant une méthode qui permet d’augmenter la basophilie du tissu)
Noyaux colorés trop foncé est causé par:
- séjour trop long dans la solution d’hématoxyline
- sections trop épaisses
- différenciation de l’hématoxyline insuffisante
Noyau de couleur rouge ou rouge-brun est causé par:
La solution d’hématoxyline est sur le point de ne plus être bonne ou l’étape de bleuissement des noyaux n’a pas été effectuée correctement.
Cytoplasme coloré trop pâle est causé par:
- augmentation de pH de l’éosine au-dessus de 5 (causé par une contamination de l’éosine par l’agent de bleuissement ou par une éosine qui n’a pas été acidifié
- sections trop minces
- séjour dans les agents déshydratants ait été trop long (plus il y a d’eau, plus il y aura d’éosine d’enlevé)
Cytoplasme coloré trop foncé est causé par:
Surtout avec le mélange éosine-phloxine
Éosine incorrectement différencié est causé par:
- la fixation n’est pas complète
- la déshydratation ou l’éclaircissement n’est pas complète
- les sections venant d’être colorées à l’éosine demeurent dans des alcools ayant les plus faibles dilutions pour une différenciation approprié
- le pH de l’éosine n’est pas adéquat
Précipités bleu-noir sur les sections est causé par:
- si la mince couche métallique qui se développe sur la plupart des hématoxyline a été ramassée par la lame lors de la coloration
- prévention: filtrant l’hématoxyline avant l’utiliser
eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux:
- présence de xylène sur les coupes et dans le bain d’eau
Coloration HE irrégulière:
- présence d’eau ou de liquide fixateur dans la paraffine lors de l’imprégnation
- contamination des réactifs dans un appareil à circulation de type fermée causé par un mauvais fonctionnement de l’équipement
- contamination des réactifs causé par ‘absorption d’eau présente dans l’atmosphère par les alcools servant à la déshydratation dans le cas d’un appareil à circulation de type ouvert.
- si le niveau des solutions ne partient pas à recouvrir toute la surface de la lame
Comment fait on pour éviter une contamination dans les systèmes ouverts.
Utilier du toluène au lieu du xylène dans les zones où le taux d’humidité est élevé car le toluène est plus tolérant face à l’eau par rapport au xylène.
Résultat de la modification 1 (Utilisation d’une solution éosine non acidifié):
Cytoplasme coloré trop pâle
Éosine incorrectement différencié
Résultat de la modification 2 (omettre l’étape du bleuissement des noyaux):
Les noyaux seront de couleur rouge ou rouge-brun.
Résultat de la modification 3 (pas rincer les lames à la sortie de l’agent de bleuissement):
Cytoplasme coloré trop pâle
Prévention d’une déparaffinage non complété:
- bien assécher les sections avant le déparaffinage
- laisser suffisamment longtemps dans le xylène lors du déparaffinage
- éviter l’utilisation de xylène contaminé. changer la solution si nécessaire