Lab coloration APS et Bleu Alcian Flashcards

1
Q

De quoi est constitué le glycogène:

A

Polysaccharide constitué d’une longue chaine de D-glucose.

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Q

De quel groupe fait partie le glycogène:

A

Groupe des homoglycanes (ne produisent qu’un seul monosaccharide quand on les hydrolyse).

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3
Q

Qu’est ce qu’on appelle les mucosubstances épithéliales:

A

Mucines

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4
Q

Qu’est ce qu’on appelle les mucosubstances conjonctives:

A

Mucopolysaccharides

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5
Q

C’est quoi les mucines:

A

Substances muqueuses qui ont un rôle de protection.

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6
Q

Qu’est ce qui produit les mucines:

A

Cellules épithéliales, les fibroblastes et les mastocytes.

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7
Q

Quels sont les principales catégories des mucines:

A
  1. Mucines acides
  2. Mucines neutres
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8
Q

Où se trouve principalement les mucines:

A

Dans les conduits qui s’ouvrent sur un environnement interne.

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9
Q

Questce que APS est court pour:

A

Acide périodique de Schiff

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10
Q

La méthode PAS comprend deux étapes principales:

A
  1. oxydation périodique
  2. détection des glucides
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11
Q

Qu’est ce qui se passe durant la première étape de la méthode APS (oxydation par l’acide périodique):

A

L’acide périodique rompt les liaisons entre deux carbones et il y a libération des aldéhydes réactifs (CHO).

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12
Q

Qu’est ce qui se passe durant la deuxième étape de la méthode APS (détection des glucides):

A
  • le réactif de Schiff est le produit de la réduction de la fuschine basique par un acide sulfureux
  • lorsque la fushine basique est mise en présence d’un acide sulfureux, les groupes chromophores du colorant sont brisés par sulfuration
  • le composé devient incolore et on le nomme la leucofuschine, qui est un leucocolorant
  • quand le réactif de Schiff se combine aux groupements aldéhydles libres produits par l’oxydation de l’acide périodique, ces groupements redonnent une couleur au colorant en recréant un chromophore dans la molécule
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13
Q

Pourquoi faut-on faire une modification avec la Diastase:

A

Car la méthode au PAS n’est pas spécifique pour le glycogène car elle peut également réagir et donner un résultat positif avec d’autres substances (mucines ancides, LH, TSH, FSH, mucines gastriques…)

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14
Q

Qu’est ce que la diastase:

A

Enzyme qui permet de digérer le glycogène présent dans les tissus.

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15
Q

Quels sont les étapes de la méthode APS/APS-D

A
  1. mettre alpha-amylase sur la coupe identifié APS-D (digestion du glycogène)
  2. coupe APS-D dans l’eau courante
  3. deux coupes:
  4. acide périodique 1% (oxydation qui rompt les liens carbone et libération des aldéhydes)
  5. eau
  6. réactif de Schiff (réaction)
  7. eau (développe la couleur et retire l’excès de réactif)
  8. hématoxyline de Harris acidifié (colorant)
  9. eau
  10. alcool 95%
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16
Q

Résultats attendus pour le glycogène dans la méthode PAS/PAS-D:

A
  • APS: magenta (APS positif)
  • APS diastase: non coloré
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17
Q

Résultats attendus pour la membrane basale dans la méthode PAS/PAS-D:

A
  • APS: magenta (APS positif)
  • APS diastase: Magenta (APS positif)
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18
Q

Résultats attendus pour la mycose dans la méthode PAS/PAS-D:

A
  • APS: magenta (APS positif)
  • APS diastase: magenta (APS positif)
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19
Q

Résultats attendus pour le noyau dans la méthode PAS/PAS-D:

A
  • APS: bleu pâle
  • APS diastase: bleu pâle
20
Q

Résultats attendus pour le cytoplasme et GR dans la méthode PAS/PAS-D:

A
  • APS: bleu pàle
  • APS diastase: bleu pâle
21
Q

Résultats attendus pour les mucines neutres dans la méthode PAS/PAS-D:

A
  • APS: magenta (APS positif)
  • APS diastase: magenta (APS positif)
22
Q

Résultats attendus pour les mucines acides dans la méthode PAS/PAS-D:

A

APS: Incolore - magenta (APS variable)
APS diastase: incolore - magenta (APS variable)

23
Q

Pourquoi le temps d’exposition de l’acide périodique est de 20 minutes maximum:

A

Parce que les protéines peuvent devenir PAS positif

24
Q

Qu’est ce qui peut remplacer l’alpha-amylase dans la coloration APS-D:

A

La salive

25
Q

Pourquoi on utilise l’eau après le réactif de Schiff:

A

Retirer l’excès de réactif qui pourrait donner des faux positifs.

26
Q

Quel méthode peut on faire au lieu de l’eau après le contact avec le réactif de Schiff:

A

Laver dans une solution de métabisulfite de potassium 0.55%.

27
Q

Les substances APS positives incluent:

A
  1. amyloide
  2. mycose
  3. membranes basales
  4. mucines épithéliales
  5. cartilage
  6. amidon
  7. cellulose
  8. collodion thyroidien
28
Q

Où se retrouve les mucines neutres:

A
  1. estomac
  2. prostate
  3. cellules caliciformes
29
Q

Où se retrouve les mucines acides sulfatées:

A
  1. glandes bronchiques
  2. mucines du gros intestin
30
Q

Quels sont les deux types de mucines acides:

A
  1. mucines acides sulfatées
  2. mucines acides carboxylées
31
Q

Où se retrouve les mucines acides carboxylées:

A
  1. glandes salivaires et bronchiales
  2. mucines du petit et gros intestin
32
Q

Quel est le résultat pour les mucines neutres:

A
  • APS: positif
  • bleu alcian: négatif
33
Q

Quels sont les résultats pour les mucines acides sulfatés:

A
  • APS: positif (quelques fois)
  • bleu alcian positif pH 1.0 et 2.5
34
Q

Quels sont les résultats pour les mucines acides carboxylées:

A
  • APS positif (quelques fois)
  • bleu alcian positif pH 2.5
  • bleu alcian négatif pH 1.0
35
Q

Quel est le principe du bleu alcian:

A

Colorant basique à base de cuivre soluble dans l’eau et de couleur bleue due à son contenu en cuivre.

36
Q

Principe du bleu alcian à pH 2.5:

A

En solution d’acide acétique 3%, il colore les mucopolysaccharides acides sulfatés et carboxylées ainsi que les sialomucines (glycoprotéines sulfatés et carboxylées.

37
Q

Principe du bleu alcian à pH 1.0:

A

Utilisé en solution d’HCl 0.1 M. Colore seulement les mucopolysaccharides acides sulfatés et les sialomucines (glycoprotéines) sulfatés.

38
Q

Prinicpe du bleu alcian à pH 0.5:

A

En solution d’HCl 0.2 M. Colore seulement les mucopolysaccharides acides fortement sulfatés et les sialomucines (glycoprotéines) fortement sulfatés.

39
Q

Quels sont les résultats attendus pour les mucines neutres dans la méthode du Bleu alcian:

A
  • Bleu alcian pH 2.5: non coloré
  • Bleu alcian pH 1.0: non coloré
  • Bleu alcian pH 0.5: non coloré
40
Q

Quels sont les résultats attendus pour les glycoprotéines (sialomucines) dans la méthode de Bleu alcian:

A

Bleu alcian pH 2.5: bleu
Bleu alcian pH 1.0: bleu
Bleu alcian pH 0.5:

41
Q

Quels sont les résultats attendus pour les mucosubstances sulfatés dans la méthode de Bleu alcian:

A

Bleu alcian pH 2.5: bleu
Bleu alcian pH 1.0: bleu
Bleu alcian pH 0.5: bleu

42
Q

Quels sont les résultats attendus pour les mucosubstances carboxyolées dans la méthode de Bleu alcian:

A

Bleu alcian pH 2.5: bleu
Bleu alcian pH 1.0: non coloré
Bleu alcian pH 0.5: non coloré

43
Q

Quels sont les résultats attendus pour les noyaux, cytoplasme et GR dans la méthode de Bleu alcian:

A

Bleu alcian pH 2.5: rose
Bleu alcian pH 1.0: rose
Bleu alcian pH 0.5: rose

44
Q

Le rincage de la coupe à l’acide avant le Bleu alcian permet de:

A

Protéger la solution colorante contre la variation de pH.

45
Q

Le rincage de la coupe à l’acide après le Bleu alcian permet:

A

D’éviter une coloration non spécifique (ce n’est pas une étape de différenciation).

46
Q
A