Examen 3 (Histotechnologie) Flashcards
Qu’est ce qui comprend les pigments biliaires:
Comprend la bilirubine libre, biliverdine, bilirubine conjuguée et hématoïdine
Où se trouve la membrane basale:
Sépare l’épithélium et le tissu de soutient.
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Masson-Fontana
- Solution d’argent de Fontana: Imprégnation
- Chlorure d’or 0.2%: Virage
- Thiosulfate de sodium 5%: Réduction (fixage)
- Nuclear fast red ou éosine: Contrecolorant
Quelle est la maintenance du cryostat:
- décongeler
- nettoyer
- lubrification (doit être assécher avant)
Quels sont les résultats de la coloration de Noir soudan B:
- noyaux et autres structures aluminiques
- esters non saturés et triglycérides
- phospholidpies
- myéline
- rouge (Kernechtrot aluminique)
- noir (noir soudan)
- gris (noir soudan)
- biréfringence de couleur bronze
Quelle est la description de l’artéfact Circulation inadéquate
Coloration nucléaire pauvre ou absence de coloration de certains noyaux (surtout dans HE)
Comment éviter l’artéfact cytolyse et autolyse
- plonger le tissu dans le fixateur aussitôt que possible après le prélèvement
- s’assurer que le liquide fixateur est en contact avec toute la surface du tissu
Quelle est la cause de l’artéfact Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur
- utilisation de formol-zinc ou formol tamponné avec phosphate et déshydratation débutée avec alcool plus de 70%
- pH formol-zinc plus de 7
Comment éviter l’artéfact Tissu d’apparence molle
- s’assurer que le tissu est coupé mince à la salle de coupe
- s’assurer que le tissu est bien fixé
- s’assurer qu’il n’y a pas de problème mécanique avec le circulateur
Quels sont les caractéristiques du fixateu suivant, utilisé avec l’immunohistochimie : Chlorure mercurique (B5)
- coagulant
- additif
Voir schéma de la méthode indrecte
p. 231
Comment éviter l’artéfact Précipités bleu-noir sur les sections
filtrer l’hématoxyline tous les jours avant l’utilisation
Quel fixateur ne doit-on pas être utilisé dans la méthode de Ziehl-Neelsen:
Carnoy, car il peut détruire la propriété alcoolo-acido-résistante
Quelle est l’utilité de la coloration Mayer Mucicarmine
Mise en évidence des mucines épithéliales acides
Comment éviter l’artéfact Pigment de chrome
-éviter les fixateurs à base de chrome
Le collagène est sécrété par:
Fibroblastes
Comment fait-on pour s’assurer de la qualité du réactif de Schiff:
- ajouter quelques gouttes de formaldéhyde (ou du glutaraldéhyde) à environ 10 ml de réactif de Schiff
- si la solution vire au rose, le réactif est encore bon
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Pigment de formol
Laver la lame dans une solution alcoolique saturée d’acide picrique
Fixation par couche est quel type d’artéfact.
De fixation
Quels sont les avantages du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie : Chlorure mercurique (B5)
- excellent pour la démonstration d’antigènes intracytoplasmiques
- biopsies de ganglions lymphatiques : meilleure préservation des détails cytologiques et augmentation de la réactivité immunologique
Quels sont les caractéristiques du fixateu suivant, utilisé avec l’immunohistochimie :Méthanol-Carnoy
fixateur à base d’alcool
Quels sont les résultats attendus de la coloration Masson-Fontana
- noyau
- mélanine
- granules argentaffines
- rose
- noir
- noir
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Méthénamie d’argent de Gomori
- Méthénamine d’argent + borax 5%: Imprégnation
- Thiosulfate de Na 2%: Réduction (fixage)
- Vert lumière: Contrecoloration
Qu’est ce qui contient normalement une quantité normale d’hémosidérine:
Moelle osseuse et la rate (due à la destruction et l’élimination des globules rouges).
Comment éviter l’artéfact Noyaux colorés trop foncé (Coloration H&E)
- s’assure de la bonne épaisseur de la section
- s’assurer du bon temps dans l’hématoxyline
- s’assurer du bon temps de différentiation
Le collagène peut etre coloré par:
- trichrome de masson
- gomori
- van gieson - acide picrique
Quelle est la description de l’artéfact Précipités bleu-noir sur les sections
Précipités bleu-noir sur les sections
Ziehl-Neelsen est quel type de coloration:
microorganismes
Comment éviter l’artéfact Les sections s’envolent et se collent aux objets ou aux autres parties du microtome
- humidifier l’air en soufflant sur le bloc et sur le couteau lors de la coupe
- faire bouillir de l’eau près du microtome
- mise à terre du microtome
- ioniser l’air
Les organes visés par une surcharge en fer (état pathologique) sont:
- rate (surtout)
- ganglions lymphatiques
- foie
Quel est le principe de la coloration Von Kossa
Lorsque les sels de calcium sont traités avec une solution qui renferme certains cations comme l’argent, ceux-ci se substituent au calcium en se liant à l’anion phosphate ou carbonate auquel il était lié. Il y a ensuite réduction de l’argent à sa forme métallique ce qui révèle les sites où il y a calcification
Quelle est l’utilité de la coloration Ziehl-Neelsen
Démonstration des bactéries acido-alcoolo-résistantes dans les tissus
Quel est le principe de la coloration Weigert Van Gieson
Il y a une compétition entre deux colorants anioniques (acide picrique et fuschine acide).
- l’hématoxyline ferrique (Weigert): coloration des noyaux et résistant à l’acide
- acide picrique: coloration du cytoplasme et muscle (MM faible)
- fuschine acide: coloration du collagène (MM plus élevée)
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Mayer Mucicarmine
Histochimie
Comment éviter l’artéfact Les sections adhèrent au bloc lors de la remontée du bloc
- déplacer ou changer le couteau
- augmenter l’angle de dégagement
- ajuster la température de la pièce
- utiliser une paraffine plus dure
Comment éviter l’artéfact Cytoplasme coloré trop pâle (coloration H&E)
- rincer les coupes après l’agent de bleuissement
- acidifier l’éosine
- s’assurer d’une bonne épaisseur des coupes
- s’assurer que le séjour dans les alcools à basse concentration suivant l’éosine ne soit pas trop long. Plus il y a d’eau dans ces solutions d’alcool, plus il y aura d’éosine enlevé
Quelle est la cause de l’artéfact Éosine incorrectement différencié
- mauvaise fixation
- déshydratation et éclaircissement inadéquat
- différenciation de l’éosine inadéquat
- pas un bon pH de l’éosine
Troubleshooting du cryotome: Si le mécanisme devient raide
- traiter à l’alcool 100%
- assécher
- lubrifier à nouveau
Pourquoi les colorants solubles dans les gras (mise en évidence des lipides) ne sont pas des vraies colorants:
Il leur manque un auxochrome (sauf le Noir Soudan B). Ils sont appelés des lysochromes.
Quels sont les méthodes de visualisation de l’immunohistochimie:
- immunofluorescence
- immunoperoxydase (immunohistochimie enzymatique)
L’imprégnation métallique s’applique surtout à:
- réticuline
- mélanine
- membrane basale
- fungus
- spirochètes
- système nerveux
Quelle est la description de l’artéfact Pigment de chrome
Rouille, orange, brun, noir
Quelle est la cause de l’artéfact Noyau de couleur rouge ou rouge-brun (coloration H&E)
- la solution d’hématoxyline est sur le point de ne plus être bonne
- l’étape de bleuissement des noyaux n’a pas été effectuée correctement
Quelle est la localisation de l’artéfact Pigment d’acide picrique
Partout sur le tissu
Quel est une deuxième méthode pour la coloration au calcium:
Alizarine rouge
rétrécissement ou gonflement du tissu est quel type d’artéfact.
De fixation
Quelle est la cause de l’artéfact Pigment de formol
L’acide formique non tamponné + hémoglobine
Quelle est l’utilité de la coloration Rhodamine
Démonstration du cuivre dans les tissus, surtout dans le foie (Maladie de Wilson)
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration ABC
- Traitement des lames avec H2O2 + méthanol:
- Procédure de blocage no 1.
- Blocage de l’activité endogène de la peroxydase (surtout pour les tissus contenant beaucoup de sang)
- Solution protéique de blocage:
- Procédure du blocage no 2.
- Blocage des sites chargés (collagène et conjonctif) pour ne pas que les anticorps s’y fixent
- La solution protéique emplira les sites chargés ne laissant pas de place pour l’anticorps primaire
- Anticorps primaire: Spécifique à l’antigène recherché
- Anticorps secondaire: Conjugué à la biotine
- Réactif ABC: Complexe avidine-biotine couplé à un enzyme (peroxydase)
- DAB: Formation d’un complexe coloré
- Hématoxyline de Mayer: Contrecoloration
La surface du bloc n’est pas sectionnée également est quel type d’artéfact.
Microtomie
Quels solutions peuvent être explosives si entreposées pendant plusieurs jours:
Argent ammoniacal et alcaline
Pigment de formol est quel type d’artéfact.
De coloration
Quel est le principe de la coloration Méthénamie d’argent de Gomori
Dépôt d’urate dans les articulations
La méthode d’immunofluorescence est surtout utilisé pour:
Les biopsies de peau et de reins (coupe par congélation préférable).
Qu’est ce qui fait partie de la solution de Van Gieson:
- acide picrique
- fuschine acide
Quelle est l’utilité de la coloration Grocott
Démonstration des mycoses dans les tissus
Quelle est l’effet d’une congélation lente:
- formation de cristaux de glace dans le tissu à partir de l’eau préesnte
- la grosseur des cristaux est porportionnelle à la vitesse de congélation
- les cristaux de glace apparaissent comme des trous dans le tissu
Quel est l’avantage de l’azote liquide comme méthode de congélation:
Plus rapide
Présence de stries est quel type d’artéfact.
Microtomie
Quelle est la lame contrôle pour la coloration de Rhodamine:
Un foie foetal fixé pas plus que 24 heures (il contient de 3-4 fois plus de cuivre dans les hépatocytes).
Quelle est la description de l’artéfact Desquamation
Perte de cellule à la périphérie d’un tissu
Présence d’ondulations sur la coupe (washboarding) est quel type d’artéfact.
Microtomie
Questce que APS est court pour:
Acide périodique de Schiff
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Rhodamine
- Solution de Rhodamine: Mise en évidence du cuivre
- Hématoxyline de Mayer: contrecoloration
Comment fait-on la préparation des tissus pour la coloration par les lysochromes:
- fixation par congélation: la meilleure méthode pour une bonne peréservation mais ne permet pas une conservation à long terme
- fixation chimique: pour une préservation des lipides à long terme
Quels sont les résultats attendus de la coloration Bleu alcian-APS
- polysaccharides neutres
- mucosubstances strictement acides
- autres substances
- mucines neutres (mucus dans les cellules caliciformes de l’estomac)
- mucus dans les cellules caliciformes du petit intestin
- mucus dans les cellules caliciformes du gros intestin
- glycogène
- membrane basale
- magenta
- bleu
- teintes de rose
- magenta (2.5 et 1.0)
- bleu (2.5) et magenta (1.0)
- bleu (2.5 et 1.0)
- magenta (2.5 et 1.0)
- magenta (2.5 et 1.0)
Pigment d’acide picriquje est quel type d’artéfact.
De coloraton
La membrane basale est fabriqué par quoi:
Les cellules épithéliales
Quel est le mécanisme en cause de la coloration May-Grunwald Giemsa
Histologique
Quelle est la cause de l’artéfact Circulation inadéquate
- reste de l’eau dans les tissus quand il va dans l’éclaircissement
- présence d’agent éclaircissement dans paraffine (odeur xylène)
- utilisation trop de chaleur pendant le cycle
- problèmes mécaniques avec le circulateur
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux (dans le dernier bain de xylène avant de monter la lame)
Remontant les étapes en changeant les bains d’alcool et de xylène, et ensuite en réhydratant et éclaircissant les sections
Mayer Mucicarmine est quel type de coloration:
hydrate de carbone
Caractéristiques de la biotine:
- vitamine
- retrouvé dans le jaune d’oeuf
- forte affinité pour l’avidine
Quels sont les résultats attendus de la coloration APS
- glycogène
- membrane basale
- noyau
- cytoplasme, GR
- mucines acides
- Fungi
- magenta (APS positif) et non coloré APS diastase
- magenta (APS positif) et magenta APS diastase
- bleu pâle et bleu pâle au APS diastase
- bleu pâle et bleu pâle au APS diastase
- incolore à magenta au et incolore à magenta au APS diastase
- magenta et magenta au APS diastase
Quelle est l’utilité de la coloration Schmorls
Mise en évidence des substances réductrices présentes dans le tissu
Hématéine de Verhoeff est quel type de coloration:
tissu de soutient et des muscles
Quels sont les résultats attendus de la coloration May-Grunwald Giemsa
- bactéries
- noyau
- cytoplasme des leucocytes
- bleu
- bleu
- rose, gris, bleu (dépendant du type de la cellule et son stade de développement)
Quelle est l’utilité de la coloration Méthénamie d’argent de Gomori
Démonstration des urates dans les tissus
Comment éviter l’artéfact rétrécissement ou gonflement du tissu
- ne pas dépasser la période de temps idéale de la fixation
- choisir un fixateur tolérant
- choisir un fixateur composé ayant un ingrédient qui contrecarre l’intolérance
Quelle est la cause de l’artéfact Dessication accidentel du tissu
-tissu laissé à l’air libre pendant la circulation
Pourquoi y a til pas d’acide acétique dans la solution de ferrocyanure acidifié pour la coloration de BLeu de prusse:
Car l’acide acétique peut dissoudre le fer. On utilise l’acide chlorydrique au lieu.
Déshydratation excessive est quel type d’artéfact.
Circulation
Quelle est la description de l’artéfact Déshydratation excessive
Sous forme de microchatter sur les bords du tissu
Artéfact d’éponge est quel type d’artéfact.
Circulation
Quel est le principe de la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori
- formation d’une solution d’aldéhyde fuschine
- affinité des fibres élastiques pour la solution
Quels sont les résultats attendus de la coloration Bleu de Prusse
- noyau, cytoplasme, GR
- collagène, muscle
- fer ferrique, hémosidérine
- rose
- rose
- bleu
Quels sont les résultats attendus de la coloration Bleu de Turnbull
- noyau, cytoplasme, GR
- collagène, muscle
- fer ferreux
- rose
- rose
- bleu
Quel est le rôle du chromogène dans la méthode de visualisation l’immunoperoxydase:
- donneur d’électron
- produit une coloration suite à une oxydation
Quels sont des exemples de solvants lysochromes:
- alcool 70%
- acétone/alcool
- propylène glycol
- isopropanol 60%
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Weigert Van Gieson
Histologique
Comment éviter l’artéfact Tissus pas enrobés au même niveau
- appliquer pression fermement et uniformément sur le tissu
- garder la paraffine fondue dans le fond du moule
- travailler rapidement quand plusieurs fragments et refroidir juste assez pour faire adhérer tous les morceaux au fond du moule
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Cytoplasme coloré trop pâle
décolorer les coupes et recolorer en y apportant les corrections
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Dessication accidentel du tissu
- enlever le plus de paraffine possible (blot off)
- placer le tissu dans une solution réhydratante : eau, alcool 100, carbonate sodium aqueux
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Gram
Histologique
Quelle est l’utilité de la coloration Bleu de Turnbull
Mise en évidence4 du fer ferreux (Fe++) dans les tissus
Quelle est la différence de détection entre huile rouge O et noir soudan B:
- huile rouge O: lipides neutres
- noir soudan B: lipides neutres, plus spécifiques que l’huile rouge O pour les phospholipides
Les méthodes d’imprégnation à l’argent sont divisées en 2 groupes:
- réaction argentaffine: le tissu a la capacité de réduire l’argent seul
- réaction argyrohile: le tissu n’a pas la capacité de réduire l’argent. Il faut utiliser un agent réducteur
Pourquoi faut-il faire la coloration de Ziehl-Neelsen sur lame:
Car dans un coplin, les bactéries peuvent transfere de lames.
Comment éviter l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux
(lorsque les coupes sont mises dans l’eau à la suite de l’alcool pendant le déparaffinage)
Bonne rotation des bains d’alcool
Il ne se forme pas de ruban est quel type d’artéfact.
Microtomie
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Déparaffinage non complété
- traiter les sections avec alcool absolue pour retirer l’eau et traiter de nouveau au xylène pour retirer la paraffine
- si les coupes ont été colorés, traiter et recolorer
Quelle est la cause de l’artéfact Présence d’ondulations sur la coupe (washboarding)
- couteau ou bloc pas serré
- pièces du microtome trop usées
- manche du microtome sortie à son maximum
- angle de dégagement trop grand
Quelle est l’utilité de la coloration Fouchet
Démonstration de la bilirubine dans les tissus
Quel est le désavantage de l’azote liquide comme méthode de congélation:
Les tissus mous ont tendance à craquer (expansion trop rapide de la glace dans le tissu).
Quelle est la cause de l’artéfact Manque de détails nucléaires
- une fixation incomplète est la cause principale
- une chaleur excessive lors de la circulation des tissus ou lors du séchage des coupes
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Grocott
- Acide chromique 5%: Oxydation et production d’aldéhydes
- Métabisulfite de sodium 1%: Blanchiment, retire l’acide chromique résiduel
- Solution de méthénamine d’argent: Imprégnation
- Chlorure d’or 0.1%: Virage
- Thiosulfate de sodium 2%: Réduction (fixage)
- Vert lumière: Contre coloration
Quels sont les principaux agents oxydants de l’imprégnation métallique:
- permanganate de K
- métabisulfite de Na
- acide phosphomolybdique
- acide périodique
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux
(lorsque les coupes sont mises dans l’eau à la suite de l’alcool pendant le déparaffinage)
Remonter les étapes en changeant les bains d’alcool et en reprenant les étapes des bains d’alcool jusqu’au bain d’eau
Quelle est la différence de solvant entre huile rouge O et noir soudan B:
- huile rouge O: isopropanol 60% car il n’extrait pas les lipides du tissu
- noir soudan B: propylène glycol car il n’extrait pas les lipides du tissu
Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux (dans le dernier bain de xylène avant de monter la lame)
est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Masson-Fontana est quel type de coloration:
pigments et minéraux
Comment éviter l’artéfact Pigment d’acide picrique
-éviter l’utilisation de l’acide picrique
Quels sont les résultats attendus de la coloration Schmorls
- noyau
- mélanine
- granules argentaffines
- rose
- bleu
- bleu
Qu’est ce qui est utilisée dans la méthode directe:
- anticorps à spécificité connue pour identifier un antigène dans le tissu du patient
- l’anticorps est couplé à un fluorochrome
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Bleu de Prusse
- Solution de ferrocyanures de K + HCl:
- Le HCl libère le fer de l’hémosidérine
- Réagit avec les ions ferriques dans le tissu
- Pigment bleu et insoluble
- Kernechtrot: Contrecolorant (rougeâtre)
Contamination est quel type d’artéfact.
Enrobage
Morceaux de tissu manquants est quel type d’artéfact.
Enrobage
Quels sont les résultats attendus de la coloration Bleu alcian pH 2.5
- mucines acides
- autres structures
- turquoise
- rose (selon le contre colorant)
Quelle est la description de l’artéfact Noyaux colorés trop foncé
Noyaux trop foncés
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Ziehl-Neelsen
- Fuschine carbolique (ou phénolée) à froid: Colore les bactéries acido-alcoolo-résistantes
- Alcool-acide: Différentiation. Retrait du colorant de toutes les bactéries qui ne possèdent pas de parois cireuses
- Bleu de méthylène ou hématoxyline de Harris: Contre coloration
Quels sont les substances réductrices:
- mélanine
- cellules endocrines
Quels sont les avantages de la cryotomie:
- plus rapide
- pour les biopsies urgentes
- mise en évidence des lipides
- techniques en fluorescences (dermatologie)
Quels sotn les différnetes méthodes de mise en évidence des lipides:
- solubilité: rarement utilisé
- lumière polarisé: rarement utilisé
- réduction par le tetroxyde d’osmium: non spécifique
- colorants solubles dans les gras: le plus commun
- réactions histochimiques: utilisé surtout en recherche
La méthode directe d’immunohistochimie est utilisé surtout sur quel type de spécimen:
- peau
- rein
Comment éviter l’artéfact Éosine incorrectement différencié
- s’assurer que la fixation est adéquate et complète
- s’assurer que la déshydratation et éclaircissement sont adéquats lors de la circulation
- séjour adéquat dans le différentiateur
- le pH de l’éosine est adéquat
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Bleu alcian-APS
- Bleu alcian à pH 2.5 en solution d’acide acétique 3%: Idem à Bleu Alcian pH 2.5
- Réactif de Schiff (fuschine basique): Colore les mucosubstances neutres
- Éosine ou Kernechtrot: Contre colorant
Quels sont les résultats attendus de la coloration Grocott
- contour des champignons
- partie interne des champignons, levures
- fond
- mucines, glycogène, mélanine
- noir
- gris
- vert (avec vert lumière)
- noir
Quelle est la description de l’artéfact Pigment de mercure
Brun, noir ou brun-noir, non biréfringent
Métabolisme du fer:
p.208.5
Quels sont les différents types d’enzymes utilisés dans la mtéhode de visualisation immunoperoxydase:
- phosphatase alcaline
- bêta galacotsidase
- glucose oxydase
- peroxydase de radis fort
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Éosine incorrectement différencié
Décolorer et recolorer si possible
Qu’est ce qui se passe durant la deuxième étape de la méthode APS (détection des glucides):
- le réactif de Schiff est le produit de la réduction de la fuschine basique par un acide sulfureux
- lorsque la fushine basique est mise en présence d’un acide sulfureux, les groupes chromophores du colorant sont brisés par sulfuration
- le composé devient incolore et on le nomme la leucofuschine, qui est un leucocolorant
- quand le réactif de Schiff se combine aux groupements aldéhydles libres produits par l’oxydation de l’acide périodique, ces groupements redonnent une couleur au colorant en recréant un chromophore dans la molécule
Où se retrouve les mucines acides sulfatées:
- glandes bronchiques
- mucines du gros intestin
Weigert Van Gieson est quel type de coloration:
tissu de soutient et des muscles
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Gram
- Violet de cristal
- Gram positif : paroi est coloré en bleu violet
Gram négatif : idem
- Iode de Gram
- Gram positif : violet de cristal est renforcée
Gram négatif : idem
- Éther-acétone
- Gram positif : resserrement des pores, le complexe violet de cristal-diode est retenu
Gram négatif : dissolution des lipides, le complexe violet de cristal-iode est extrait
- Fuschine basique
- Gram positif : complexe d’iode-violet de cristal masque l’action de la fuschine basique
Gram négatif : la fuschine basique colore les bactéries en rouge
- Acide picrique-acétone
- Gram positif : enlève le surplus de colorant sur les tissus et contrecolorer les éléments acidophiles en jaune
Gram négatif : idem
Quels sont les résultats attendus de la coloration Ziehl-Neelsen
- bactéries acido-alcoolo-résistantes
- GR
- noyaux
- fond
- rouge
- orange
- bleu
- bleu
Quels sont les avantages de la coloration Weigert Van Gieson
- ne colore que les fibres de collagène (Masson peut colorer aussi les fibres de réticuline)
- rapide
- pas de différentiation
Rhodamine est quel type de coloration:
pigments et minéraux
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Warthin-Starry
- Solution de nitrate d’argent: Imprégnation (formation de complexes organo-métallique)
- Solution de nitrate d’argent-hydroquinone gélatinisée: Développeur
L’hydroquinone a deux rôles :
- agent réducteur : permet à l’argent de se déposer sur les complexes organo-métalliques
- agent de développement : augmente la vitesse de transformation de l’argent ionique en argent métallique et empêche la reconversion
Quels sont les résultats attendus de la coloration Fouchet
- bile ou bilirubine
- fond
- vert émeraude à vert olive
- jaune
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Bleu de toluidine
- Solution de bleu de Toluidine: Colore tous les éléments du tissu
Comment éviter l’artéfact Chatter microscopique ou microvibration dans la section
- vérifier la cédule de l’appareil à circulation
- rétablir l’humidité du tissu en exposant la surface du bloc par rabotage et en le mettant sur une surface d’eau glacée ou de la glace
- changer le couteau
- réduire l’angle de dégagement
- réduire la vitesse de coupe
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu de Prusse
Histochimique
Quels sont les avantages de la coloration Trichrome de Masson
- bonne distinction entre les fibres de collagènes et les autres structures fibreuses
- bleu d’aniline : meilleur pour de petites quantités de collagène
- vert lumière : quand le collagène est prédominant
Quelle est la cause de l’artéfact Pigment d’acide picrique
Fixation avec Bouin (acide picrique)
Quelle est la description de l’artéfact Noyau de couleur rouge ou rouge-brun
Les noyaux ont une teinte rouge ou rouge-brun au lieu de bleu
Quelle est la forme des fibres de réticuline:
Réseau de fibres délicats, embranchés
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Réticuline de Gomori
Imprégnation métallique de type argyrophile
Quelle est la description de l’artéfact Tissus pas enrobés au même niveau
On n’atteint pas toute la surface du tissu en même temps au microtome
Quelle est la description de l’artéfact Noyaux colorés trop pâle
Noyaux trop pâles, manque de contraste
Quels sont les désavantages de la coloration Weigert Van Gieson
Faible coloration du cytoplasme
Quels sont les conditions pour la microtomie pour l’immunohistochimie:
- eau distillée propre seulement
- pas d’adhésif ou de substance ajouté au bain
- port de gants (particules de peau)
- pas de plis dans le tissu (provoque des artéfacts)
Quels sont les fixateurs utilisés pour les colorants lysochromiques (huile rouge O et noir soudan B):
- meilleur: congélation
- sinon: formaline
- jamais: alcool, carnoy, bichromate de potassium
- ne pas circuler les tissus
Quelle est la description de l’artéfact Image de fuite, images de polarisation, diffusion
Utilisation de fixateurs à éviter :
- chlorure mercurique : il détruit le glycogène
- Tetroxyde d’osmium : il produit de nouveaux groupes hydroxyles (faux positifs)
- glutaraldéhyde : possède 2 groupes aldéhydes (faux positifs)
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Ziehl-Neelsen
Histologique
Quelle est la cause de l’artéfact Coloration H&E irrégulière
- présence d’eau ou de liquide fixateur dans la paraffine lors de l’imprégnation
- contamination des réactifs dans un appareil à circulation de type fermée causé par un mauvais fonctionnement de l’équipement
- absorption d’eau présente dans l’atmosphère par les alcools servant à la déshydratation dans le cas d’un appareil à circulation de type ouvert
- si le niveau des solutions ne parvient pas à recouvrir toute la surface de la lame
Comment fait-on pour vérifier si la solution d’hématoxyline est bonne a utiliser:
Placer une goutte d’hématolique d’aluminium sur un papier filtre et la couleur deviendra marron avec une bordure violet.
Quels sont les composantes du tissu de soutient:
- collagène
- fibres élastiques
- fibres de réticuline
- membrane basale
- fibroblastes
- cellules adipeuses ou adipocytes
- mastocytes
Quels sont les résultats attendus de la coloration Mayer Mucicarmine
- mucines acides
- capsules du Cryptococcus
- noyaux
- autres éléments tissulaires
- rose foncé à rouge
- rose foncé à rouge
- noir
- bleu ou jaune
Pigment de carbone est quel type d’artéfact.
De coloration
Les mucines sont produits par quoi:
Épithélium, fibroblastes et les mastocytes.
Quelle est la cause de l’artéfact Tissu d’apparence molle
- sections trop épaisses à la salle de coupe
- compression entre le dessus et dessous de la cassette, les liquides ne pénètrent pas tout le tissu
Bleu de toluidine est quel type de coloration:
Démonstration des mastocytes dans les tissus
Quelle est la localisation de l’artéfact Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur
Partout dans les tissus
Pourquoi le glucose seul (monosaccharide) ne peut pas être démontré dans une section de tissu:
Car il est soluble dans l’eau et possède une petite taille mooléculaire.
Quelle est l’utilité de la coloration Bleu alcian pH 2.5
Démonstration des mucopolysaccharides acides et des glycoprotéines, les deux sulfatés et carboxylés
- glandes bronchiques
- glandes salivaires
- cellules caliciformes
- mucus
Quelle est l’utilité de la coloration Bleu alcian pH 1.0
- démonstration des mucopolysaccharides acides sulfatés et des mucines acides sulfatées et des glycoprotéines sulfatées
- ne colore pas celles qui sont carboxylés
Quels sont les résultats attendus de la coloration Bleu alcian pH 1.0:
- mucines acides sulfatés
- autres structures
- turquoise
- rose
Quelle est la description de l’artéfact Orientation incorrecte
À la microscopie (parfois à la microtomie), structures essentielles diffiliciles ou impossible à visualiser
Quelle est la cause de l’artéfact Noyaux colorés trop foncé
- séjour trop long dans la solution d’hématoxyline
- sections trop épaisses
- différentiation de l’hématoxyline insuffisante
Quelle est l’utilité de la coloration May-Grunwald Giemsa
- démonstration des bactéries, rickettsies et Toxoplasma gondii
- utilisée pour la différentiation de cellules présentes dans le tissu hématopoïétique
Comment peut on démontrer les cellules adipeuses:
Coupe à la congélation en utilisant des techniques spéciales de coloration.
Quel est le principe de la coloration Gram
La couche des Gram négatif (lipopolysaccharides) sera dissoute pendant le rinçage à l’acétone permettant au cristal violet de se retirer
Quelle type de réaction est la coloration APS:
Réaction histochimique
Quels sont les différents chromogènes utilisés dans la méthode de visualisation d’immunoperoxydase:
- DAB
- insoluble dans l’alcool et le xylène
- coloration brune
- extremement cancérigène
- AEC
- soluble dans l’alcool (donc seulement utilisé dans un milieu de montage aqueux)
- coloration rouge
- propriétés cancérigènes
Quelle milieu d’imprégnation faut-il utiliser pour l’immunohistochimieP:
La paraffine est dommageable pour les antigènes dont en utilisé un avec un bas point d’ébullition.
Quel est le meilleure fixateur pour les lipides:
Tetroxide d’osmium
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration May-Grunwald Giemsa
- Solution de travail de Jenner
- Solution de travail de Giemsa
- Acide acétique 1%: Différentiation
Qu’est ce qu’on fait si les tissus dans la méthode Warthin-Starry a été surdéveloppées (trop réduites):
Elles peuvent être traiteés avec une solution d’iode et de thiosulfate de sodium pour retirer la coloration et ensuite être recolorées.
Quel sorte de mucines s’y trouve dans l’intestin grêle:
Mucines acides carboxylés et neutres
C’est quoi les mucines:
Substances muqueuses qui ont un rôle de protection.
Quelle est la description de l’artéfact Artéfact d’éponge
Séparation du tissue de l’éponge
Pourquoi on utilise l’eau après le réactif de Schiff:
Retirer l’excès de réactif qui pourrait donner des faux positifs.
Réticuline de Gomori est quel type de coloration:
imprégnation métallique
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Pigment de mercure
Iode alcoolique (enleveur) + thiosulfate de sodium (enlève iode)
Quel est le principe de la coloration Grocott
La paroi des champignons a une teneur élevée en glucides. Il y a oxydation des glucides, production d’aldéhydes, suroxydation en carboxyles et mise en évidence des aldéhydes par méthénamine d’argent
Quel est le mécanisme en cause de la coloration APS fungi
Histochimie
Fouchet est quel type de coloration:
pigments et minéraux
Quels tissus se coupent mieux au cryostat de quelques degrés plus froid:
Tissu avec gras
Quels sont les désavantages de la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori
- méthode non spécifique
- peut colorer d’autres substances
- mucosubstances sulfatées
- granulation des cellules Bêta du pancréas
- mastocytes
- matrice du cartilage
Quelle est la cause de l’artéfact Morceaux de tissu manquants
- manque d’attention
- erreur à la salle de coupe
Qu’est ce qui se passe durant la première étape de la méthode APS (oxydation par l’acide périodique):
L’acide périodique rompt les liaisons entre deux carbones et il y a libération des aldéhydes réactifs (CHO).
Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur est quel type d’artéfact.
Circulation
Est-ce que l’azote liquide comme méthode de congélation est utilisé seul:
Rarement, elle est souvent accompagnée d’un médium comme l’isopentane dans lequel le tissu est placé avant de le plonger dans l’azote.
Quelle est la cause de l’artéfact Orientation incorrecte
Mauvaise orientation du morceau de tissu
Quelle est la cause de l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux (dans le dernier bain de xylène avant de monter la lame)
Toujours présence d’eau sur les coupes. Étape de déshydratation n’a pas été complétée
Quels sont les caractéristiques de l’hémosidérine:
- granules bruns
- non biréfringents
- formes irrégulières
- groupés en amas
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Grocott
Imprégnation métallique
Quelle est l’utilité de la coloration APS fungi
Mise en évidence des champignons
Comment éviter l’artéfact Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur
- débuter la déshydratation avec alcool 70%
- pH formol-zinc doit demeurer sous 7
Quel est le principe de la méthode de visualisation immunoperoxydase dans l’immunoshitochimie:
L’enzyme, en présence d’un substrat et d’un chromogène, fournit un système qui permet de visualiser la localisation de l’anticorps sur le tissu, il y a développement d’une couleur.
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu de toluidine
Métachromasie
Quels sont les avantages du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie: Méthanol-Carnoy
bonne préservation des antigènes
Quel est le principe de la coloration Masson-Fontana
Mélanine est une substance argentaffine capable de réduire une solut9ion d’argent.
Manque de détails nucléaires est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Quelle est la description de l’artéfact Dessication accidentel du tissu
Visible lors de l’enrobage et sous forme de bloc (microtomie)
Quelle est l’utilité de la coloration Gram
Démonstration des bactéries dans les tissus
Quel est le métal le plus utiisées pour l’imprégnation métallique:
L’argent sous forme de nitrate d’argent
Quels sont les caractéristiques du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie: Formaldéhyde
- non coagulant
- additif
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Noyaux colorés trop foncé
- si la section n’est pas trop épaisse, décolorer et recolorer en s’assurant ou ajustant les temps dans l’hématoxyline et de différentiation
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration APS
- Acide périodique: Oxydation des groupes glucidiques pour former des aldéhydes
- Réactif de Schiff (fuschine basique): Le réactif de Schiff est un colorant dont le chromophore est détruit
- Hématoxyline: Contre colorant
- Diastase (PAS diastase): Enzyme digestive, qui digère le glycogène
Quelle est la cause de l’artéfact cytolyse et autolyse
Nécrose du tissu si la fixation a débuté tardivement
Dessication accidentel du tissu est quel type d’artéfact.
Circulation
Les fibres élastiques sont produits par:
Fibroblastes
Quel est le mécanisme en cause de la coloration
Histologique
Quels sont les résultats attendus de la coloration Réticuline de Gomori
- noyau
- cytoplasme
- globules rouges
- fibres musculaires
- collagène
- fibres de réticuline
- membrane basale
- rouge
- rouge
- rouge
- rouge
- gris
- noir
- noir
Quels sont les deux méthodes indirectes:
- méthode indirecte à 2 étapes:
- 1er anticorps: non marqué mais spécifique à l’antigène
- 2e anticorps: marqué et dirigé contre le 1er anticorps
- méthode indirecte à 3 étapes:
- 1er anticorps: non marqué mais spécifique à l’antigène
- 2e anticorps et 3e anticorps: marqué et dirigé contre le 1er et le 2e anticorps
Quels sont des exemples de colorations lysochromes:
- huile rouge O
- noir soudan B
- sudan II, III, IV
De quoi est constitué le glycogène:
Polysaccharide constitué d’une longue chaine de D-glucose.
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Pigment de chrome
- lavage du tissu à l’eau courante (pendant la nuit)
- passer les coupes dans un bain d’alcool-acide au moment de la coloration
Quel est le principe de la coloration Hématéine de Verhoeff
- surcoloration de tout le tissu par l’hématéine ferrique iodée
- différentiation microscopique par excès de mordant (chlorure ferrique)
- les fibres élastiques ont plus d’affinité pour l’hématéine ferrique que toutes les autres structures tissulaires et retiendront le colorant plus longtemps
Quels sont les principaux agents d’imprégnations de l’imprégnation métallique:
- hydroxyde d’argent ammoniacal
- carbonate d’argent ammoniacal
Quelle est la cause de l’artéfact Contamination
Transfert de fragments de tissu d’un spécimen à l’autre
Quels sont les résultats attendus de la coloration APS fungi
- mycoses, champignons
- fond
- rose, magenta
- vert (avec vert lumière)
Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux
(lorsque les coupes sont mises dans l’eau à la suite de l’alcool pendant le déparaffinage) est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Quels sont les fixateurs utilisés avec l’immunohistochimie:
- acétone et alcool
- formaldéhyde
- chlorure mercurique (B5)
- Bouin
- Zenker
- méthanol-carnoy
- glutaraldéhyde
Comment éviter l’artéfact Déparaffinage non complété
- bien assécher les sections avant le déparaffinage
- laisser suffisamment longtemps dans le xylène lors du déparaffinage
- éviter l’utilisation de xylène contaminé
Quelle est la cause de l’artéfact Tissus pas enrobés au même niveau
- fragment de tissu pas assez aplani uniformément dans le fond du moule
- plusieurs fragments enrobés à des niveaux différents
Qu’est ce qu’un moyen de vérifier si un tissu a été trop fixé:
Coloration de vimentine, elle sera excellente si les sections de tissus dans la paraffine ont été fixées de façon optimale.
Si vimentine est complètement négatif, les sections ont été trop fixées.
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Trichrome de Masson
- acide picrique alcoolique ou le Bouin
- post fixation
- augmente l’acidophilie
- hématéine Weigert
- coloration des noyaux
- chlorure ferrique agit comme mordant
- Biebrich écarlate-Fuschine acide
- coloration des structures acidophiles
- Biebrich est plus petit et pourra pénétrer dans les structures acidophiles denses (cytoplasme, GR)
- Fuschine acide est plus gros et se fixera sur les structures acidophiles moins denses (muscles et collagène)
- Acide phosphomolybdique et acide phosphotungstique
- rôle de différentiateur : vient prendre la place du colorant cytoplasmique dans le tissu par concurrence
- rôle de mordant : permet au bleu d’aniline de se fixer au collagène
- bleu d’aniline (anionique): Colore le collagène en bleu
- Vert lumière (anionique): Colore le collagène en vert
- acide acétique 1%: Enlève le surplus de bleu d’aniline ou vert lumière des structures cytoplasmiques
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Mayer Mucicarmine
- Solution de travail de Muci-Carmin: Mise en évidence des mucines
- Hématoxyline de Weigert: Coloration des noyaux
- Solution de Métanil Jaune 0.25%: Contre coloration
Noyaux colorés trop foncé est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Dénifinition des lipides:
N’importe quel composé organique qui est insoluble dans l’eau mais soluble dans les solvants organiques non polaires (alcool, benzène, acétone).
Quelle contre colorant est souvent utilisée dans la coloration APS:
Hématoxyline de Harris afin de ressortir les détails nucléaires des noyaux. Les substances APS positives sont rouge pourpre et les noyaux sont bleus.
Comment éviter l’artéfact Circulation inadéquate
- s’assurer d’aucune condensation dans le circulateur
- s’assurer que l’alcool du dernier bain est 100% pur
- s’assurer qu’il n’y a pas de problèmes mécanique
- s’assurer d’une cédule adéquate
- chaleur seulement pour la paraffine
Qu’appele-ton les mucosubstances épithéliales:
Mucines
Quels sont les méthodes de récupération des épitopes des antigènes:
- méthode à la chaleur:
- méthode aux enzymes
Quels sont les résultats attendus de la coloration Rhodamine
- cuivre
- noyau
- rouge vif à rouge-jaune
- bleu pâle
Quelle est la cause de l’artéfact Les sections s’envolent et se collent aux objets ou aux autres parties du microtome
Électricité statique
Bleu alcian pH 2.5 est quel type de coloration:
hydrates de carbone
Quels sont les résultats attendus de la coloration Hématéine de Verhoeff
- noyau
- cytoplasme
- globules rouges
- fibres musculaires
- collagène
- fibres élastiques
- marine à noir
- jaune
- jaune
- jaune
- rouge
- noir
Où se trouve principalement les mucines:
Dans les conduits qui s’ouvrent sur un environnement interne.
Fuschine paraldéhyde de Gomori est quel type de coloration:
tissu de soutient et des muscles
Quelle est la température interne du cryostat:
-20oC
Est-ce que le collagène et acidophile ou basophile:
Acidophile
Quels sont les désavantages du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie : Formaldéhyde
- formation des liens qui cachent les sites antigéniques
- soit faire une méthode de récupération des épitopes
- 24 heures maximum
Quels sont les effets de la congélation rapide:
Craquage des tissus mous
Pigment de chrome est quel type d’artéfact.
De coloration
Quelle est la description de l’artéfact Polarisation du glycogène ou effet de fuite
Migration du glycogène du cytoplasme vers un pôle de la cellule ou même à l’extérieur
Comment éviter l’artéfact Contamination
- nettoyer les pinces entre chaque spécimen
- ouvrir une seule cassette à la fois
Quel est l’angle du couteau du cryotome:
30o
Déparaffinage non complété est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Qu’appelle ton les mucosubstances du tissu de soutient:
Mucopolysaccharides
Qu’est ce qui résulte en la surfixation du tissu par le formaldéhyde (pour immunohistochimie):
Cause un excès de liaisons interprotéiques , ce qui a pour effet d’empêcher les anticorps d’avoir accès à leurs épitopes respectifs, et des faux-négatifs peuvent en résulter.
Bleu de Prusse est quel type de coloration:
pigments et minéraux
Quelle est la cause de l’artéfact Pigment de chrome
Chrome + alcool (du bain) donne un oxyde insoluble
Quelle est la description de l’artéfact Pigment d’acide picrique
Jaune
Quels sont les deux types de mucines acides:
- mucines acides sulfatées
- mucines acides carboxylées
Quelle est la cause de l’artéfact La surface du bloc n’est pas sectionnée également
Le porte-bloc ou le bloc lui-même n’est pas ajusté parallèlement au couteau, un coté du bloc se retrouve épuisé lorsque l’on essaie d’avoir accès à tout le tissu
Quels sont les avantages de la méthode directe d’immunohistochimie:
- méthode rapide
- pas de difficultés techniques majeures
- sections de 2 microns sont préférables mais des sections de 5-6 microns sont adéquats
- semble être la méthode de choix pour les coupes de peau
Bleu alcian pH 1.0 est quel type de coloration:
hydrates de carbone
Précipités bleu-noir sur les sections est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Trichrome de Masson est quel type de coloration:
tissu de soutient et des muscles
Quels fixateurs doit-on éviter pour la coloration au Bleu de Prusse:
Les fixateurs acides ou qui contient du chrome car ils peuvent nuire à la préservation du fer. Il est mieux d’utiliser du formaldéhyde à 10%.
Quels sont les résultats attendus de la coloration Méthénamie d’argent de Gomori
- urate
- fond
- calcium
- noir
- vert
- noir
Comment éviter l’artéfact La surface du bloc n’est pas sectionnée également
S’assurer que la surface du bloc est bien parallèle avec le couteau
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Hématéine de Verhoeff
Histologique
La mise en évidence des lipides est surtout demandée pour quels types de lipides:
Lipides simples (triglycéries et stérides)
Quel est le principe de la coloration Mayer Mucicarmine
- l’aluminium forme un complexe de chélation avec le carmin
- le composé qui en résulte possède une charge nette positive qui s’attache aux groupements acides des mucines
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Réticuline de Gomori
- Permanganate de K 1%: Oxydation
- Métabisulfite de K 2% ou Acide oxalique 1% (Gordon & Sweet): Blanchiment
- Chlorure d’ammonium ferrique 2%: Sensibilisation
- Solution de travail de nitrate d’argent: Imprégnation
- Formaline 20%: Réducteur
- Chlorure d’or 0.2%: Virage
- Métabisulfite de K 2%: Arrêt du virage
- Thiosulfate de Na 2%: Réduction (fixage)
- Nuclear fast red: Contrecolorant
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur
Retrait du précipité en rinçant la chambre et tubulures avec acide acétique 5%
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Bleu alcian pH 2.5
- Bleu alcian à pH 2,5 en solution d’acide acétique 3% (colorant cationique): Se lie aux radicaux acides des mucines acides; colore les mucopolysaccharides acides sulfatés et carboxylés et glycoprotéines sulfatés et carboxylés
- Kernechtrot: Contre colorant
De quoi est formé la membrane basale:
- collagène IV
- glycoprotéines
De quel groupe fait partie le glycogène:
Groupe des homoglycanes (ne produisent qu’un seul monosaccharide quand on les hydrolyse).
Quels sont les résultats attendus de la coloration Gram
- bactéries gram positif
- bactérie gram négatif
- noyau
- fond
- bleu-violet
- rouge
- rouge
- jaune
Quelle est la cause de l’artéfact Précipités bleu-noir sur les sections
la mince couche métallique qui se développe sur la plupart des hématoxyline a été ramassée par la lame lors de la coloration
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Weigert Van Gieson
- Hématoxyline ferrique (Weigert): Coloration des noyaux
- Acide picrique: Coloration du cytoplasme et muscle (MM faible)
- Fuschine acide: Coloration du collagène (MM plus élevé)
Une mucosubstance est considéré comme:
Un constituant tissulaire riche en glucides.
Dans le cas des lysochromes, comment la couleur est-elle conférée:
Par dissoludion des lipides
Quelle est la localisation de l’artéfact Pigment de chrome
Partout sur la lame au hasard
Circulation inadéquate est quel type d’artéfact.
Circulation
Comment éviter l’artéfact Orientation incorrecte
marquer la surface à être enrobée vers le haut
- faire une légère marque (incision) sur la surface à être enrobée vers le haut
- instruction d’enrobage sur cassette ou feuille de travaille
- ouvrir les spécimens gastro-intestinaux pour qu’ils fixent ouverts (ils ne rouleront pas lors de l’enrobage)
Quelle est la cause de l’artéfact Le ruban de sections est incurvé
- les bords horizontaux du bloc ne sont pas parallèles
- bord du bas du bloc non parallèle au bord du couteau
- surplus de paraffine sur un coté du bloc donc pression inéglae
- consistance du tissu varie
- couteau émoussé à un endroit
Schéma de la méthode du complexe immun enzymatique soluble:
p.232
Quels sont les causes d’anomalies de la quantité de fer:
- injection de fer intraveineux
- transfusions massives
- méanicsmes de controle de l’absorption de fer ne ftocntionne pas
Quel est le principe de la coloration Ziehl-Neelsen
La capsule lipidique des bactéries acido-alcoolo résistants prend la coloration de carbol-fuschine mais résiste à la décoloration due à leur capasule cireuse.
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Bleu alcian pH 1.0
- Bleu alcian à pH 1.0 en solution d’HCl 0.1M:
- Colorant basique (avec du cuivre)
- Se lie aux radicaux acides des mucines acides; colore mucopolysaccharides acides sulfatés et glycoprotéines sulfatés
- Kernechtrot: Contre colorant
Les fibres élastiques peuvent être colorés par:
- Verhoeff
- Fuschine aldéhyde
- Gomori
Warthin-Starry est quel type de coloration:
microorganismes
Quelle est la cause de l’artéfact Pigment de carbone
Retrouvé dans les poumons des citadins ou causé par des tattoo
Quels sont les résultats attendus de la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori
- noyau
- cytoplasme
- globules rouges
- fibres musculaires
- collagène
- fibres élastiques
- non coloré
- vert
- vert
- vert
- vert
- bleu foncé à violet
Comment éviter l’artéfact Artéfact d’éponge
S’assurer de tremper les éponges dans le fixateur avant de mettre le fragment
Quel est le principe de l’imprégnation métallique:
Utilisation de sels métalliques dissouts qui précipitent sur l’élément en question (réaction de réduction).
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Trichrome de Masson
Histologique
Bleu de Turnbull est quel type de coloration:
pigments et minéraux
Quelle est la cause de l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux
(lorsque les coupes sont mises dans l’eau à la suite de l’alcool pendant le déparaffinage)
Présence de xylène sur les coupes et dans le bain d’eau
Qu’est ce qui produit les mucines:
Cellules épithéliales, les fibroblastes et les mastocytes.
Quelle est l’utilité de la coloration APS
- mise en évidence des polysaccharides, des mucosubstances neutres et des membranes basales
- démonstration des groupes aldéhydes dans les tissus
- démonstration du glycogène (APS diastase)
La membrane basale peut etre démontré par:
- techniques qui démontrent les hydrateds de carbone: collagène de la membrane basale contient plus de sucre que normalement présent dans le collagène ordinaire
- imprégnation métallique
Quels sont les meilleurs fixateurs pour les glucides:
Formaldéhyde et éthanol
Quels sont les fluorochromes les plus communs:
- fluoroscéine: coloration verte
- rhodamine: coloration rouge-orange
Cytoplasme coloré trop pâle est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Quels sont les étapes de la méthode APS/APS-D
- mettre alpha-amylase sur la coupe identifié APS-D (digestion du glycogène)
- coupe APS-D dans l’eau courante
- deux coupes:
- acide périodique 1% (oxydation qui rompt les liens carbone et libération des aldéhydes)
- eau
- réactif de Schiff (réaction)
- eau (développe la couleur et retire l’excès de réactif)
- hématoxyline de Harris acidifié (colorant)
- eau
- alcool 95%
Quels sont les principaux agent réduction (fixage) dans l’imprégnation métallique:
- thiosulfate de sodium
- métabisulfite de sodium
Quels sont les trois étapes de la méthode au cemplexe immun enzymatique soluble:
- anticorps primaire (vient du lapin) qui se lieu à l’antigène du tissu
- anticorps secondaire (vient de la souris) ou de liaison qui se lie à l’anticorps primaire
- complexe enzyme-anti enzyme (vient du lapin) qui se lie à l’anticorps secondaire
Quelle est l’utilité de la coloration Bleu alcian-APS
Différencier les mucosubstances neutres des mucosubstances acides
May-Grunwald Giemsa est quel type de coloration:
microorganismes
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu alcian pH 1.0
Histologique
Quelle est la cause de l’artéfact Déshydratation excessive
Trop longtemps dans les bains de déshydratation (biopsies surtout)
Qu’est ce qu’on utilise pour laver la verrerie qui sera en contact avec les solutions d’argent:
HCL 1M
acide nitrique 10%
Comment éviter l’artéfact Pigment de mercure
Éviter les fixateurs ayant du mercure
Quelle est la description de l’artéfact Cytoplasme coloré trop pâle
Cytoplasme trop pâle
Quels sont les méthodes de fixateurs pour l’immunohistochimie:
- congélation: diminue moins l’activité antigénique et la coloration est plus intense
- déshydratation: déplie et change la solubilité des protéines
- fixation par des agents chimiques: dénature et stabilise les protéines soit par coagulation, soit par la formation de composé additifs
- fixateurs coagulants et non additifs: permetent une bonne pénétration de l’anticorps et ne bloquent pas les déterminants immunoréactifs
Caractéristiques de l’avidine:
- protéine
- possède 4 sous-unités
- chaque sous-unités possède 1 site de liaison
- la source peut être un blanc d’oeuf ou streptomyctes
- possède une très grande affinité pour la vitamine biotine
Qu’est ce qu’est des mucines:
Toute substance qui contient des hydrates de carbone et qui possède un rôle de lubrification.
Comment éviter l’artéfact Coloration H&E irrégulière
- utiliser le toluène au lieu du xylène dans les zones où le taux d’humidité est élevé dans les appareils à circulation de type ouvert. Le toluène est plus tolérant face à l’eau par rapport au xylène
Qu’est ce qu’on appelle les mucosubstances conjonctives:
Mucopolysaccharides
On peut trouver un manque d’hémosidérine dans la moelle osseuse (carence en fer):
- hémorragie
- anémie
- carences alimentaires
Comment éviter l’artéfact Il ne se forme pas de ruban
- déplacer ou changer le couteau
- ré-inclure dans une paraffine ayant un point de fusion plus bas
- ajuster l’angle de dégagement
- ajuster la température de la pièce
- nettoyer la lame avec un peu de xylène ou autre produit
Orientation incorrecte est quel type d’artéfact.
Enrobage
Quels sorte de mucines s’y trouve dans l’estomac:
Mucines neutres
Quel est le principe de l’immunofluorescence:
Anticorps conjugé à un fluorochrome.
Quels sont les avantages du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie: Formaldéhyde
préserve mieux la réactivité immunologique si on ajoute du zinc
Grocott est quel type de coloration:
microorganismes
Quelle est l’utilité de la coloration Warthin-Starry
Démonstration des spirochètes dans les tissus
Quel doit être la fixation si la méthode d’immunofluorescence est utilisé:
Par congélation (diminue moins l’activité antigénique et la coloration est plus intense, par contre les antigènes solubles sont perdus).
Troubleshooting du cryotome: si le tissu s’accumule sur le bord de la lame
La température est trop chaude
Où se retrouve les mucines acides carboxylées:
- glandes salivaires et bronchiales
- mucines du petit et gros intestin
Quelle est l’utilité de la coloration Hématéine de Verhoeff
Différencier les fibres élastiques brutes des autres structures tissulaires
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Von Kossa
Imprégnation métallique argyrophile
Le tissu de soutient est constitué de trois composantes différentes:
- fibres
- cellules
- matrice extracellulaire GAG
Comment on fait l’entreposage des tissus congelés:
Enveloppe pour empêcher le contact avec l’air et mettre à -70oC sinon il y aura dégradation du tissu.
Pigment de mercure est quel type d’artéfact.
De coloration
Quel est l’effet si le tissu est trop froid pour la cryotomie:
Le tissu a tendance à se pulvériser ou se désagréger lors de la coupe.
Quel substance ne faut-il pas utiliser dans la méthode de coloration de Gram:
Il ne faut pas utiliser d’alcool pour déshydrater le tissu à la fin de la coloration car il va décolorer les bactéries. On doit faire un blot dry.
Quels sont les désavantages du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie :Glutaraldéhyde
bloque les déterminants antigéniques de façon irréversible (additif)
Quelle est la description de l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux
(lorsque les coupes sont mises dans l’eau à la suite de l’alcool pendant le déparaffinage)
Coupes et bain d’eau prennent un aspect laiteux suite aux bains d’alcool à l’étape de réhydratation
Quels sont les deux différentes méthodes de solubilité pour la mise en évidence des lipides:
- lipides hydrophobes peuvent être extraits en utilisant un solvant des graisses et former des globules dans l’eau
- les lipides hydrophiles contiennent des groupes polaires et sont miscibles avec l’eau
Les substances APS positives incluent:
- amyloide
- mycose
- membranes basales
- mucines épithéliales
- cartilage
- amidon
- cellulose
- collodion thyroidien
Quelle est l’utilité de la coloration Von Kossa
Démonstration de la présence de calcium (détection des anions liés au calcium) dans les tissus
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Rhodamine
Histochimique
Comment éviter l’artéfact Le ruban de sections est incurvé
- aligner les bords horizontaux du bloc pour qu’ils soient parallèles
- s’assurer que le bas du bloc est parallèle avec le bord tranchant du couteau
- enlever le surplus de paraffine
- s’assurer que le bloc est uniformément refroidit
- déplacer ou remplacer le couteau
Qu’est ce qui est utilisé dans la méthode de ABC:
- anticorps primaire: se lie à l’antigène recherché (très spécifique)
- anticorps secondaire conjugée à de la biotine: peut se lier à l’anticorps primaire et au complexe ABC
- compexe ABC: molécule d’avidine et de biotine
Quel virus le xylène ni le formol ne peut pas tuer:
Creutzfildt-Jacob dans le tissu cérébral
Quels sont les résultats attendus de la coloration Von Kossa
- sels de calcium
- fond
- noir
- rouge
Quelle est la production de dérivés d’argent explosifs:
- nitrure d’argent ou azide d’argent: vielles solutions qui ont été exposées à l’air ou à la lumière
- fulminate d’argent: si la solution est mise en contact avec des vapeurs de formol ou d’alcool
Quels sont les deux méthodes de l’avidine-biotine:
- ABC: avidin-biotin complex
- LAB: labeled avidin-biotin
Les substances acide sont-ils APS positif ou négatif:
Négatif
Méthode utilisée pour mettre en évidence les muscles squelettiques:
PTAH de Mallory auparavant
maintenant, immunoperoxydase
Pourquoi le temps d’exposition de l’acide périodique est de 20 minutes maximum:
Parce que les protéines peuvent devenir PAS positif
Comment éviter l’artéfact Les sections s’enroulent au lieu de rester à plat sur le couteau
- déplacer ou changer le couteau
- réduire l’inclinaison du couteau si l’angle de dégagement est excessif
- réduire l’épaisseur des sections
Qu’est ce qui peut donner des faux négatifs dans la coloration de Ziehl-Neelsen:
Les tissus décalcifiés, car ils peuvent détruire la propriété alcoolo-acido-résistantes.
Quels sont les principales catégories des mucines:
- Mucines acides
- Mucines neutres
Quels sont les résultats attendus de la coloration Weigert Van Gieson
- noyau
- cytoplasme
- globules rouges
- fibres musculaires
- collagène
- élastine
- calcium
- marine à noir
- jaune
- jaune
- jaune
- rouge
- jaune
- noir
Comment éviter l’artéfact Fixation par couche
- utiliser un fixateur à pénétration plus rapide
- utiliser des pièces de tissu très minces
Quels sont les résultats attendus de la coloration Trichrome de Masson
- noyau
- cytoplasme
- GR
- fibres musculaires
- collagène
- marine à noir
- rouge
- rouge
- rouge
- bleu ou vert
Pourquoi faut-on faire une modification avec la Diastase:
Car la méthode au PAS n’est pas spécifique pour le glycogène car elle peut également réagir et donner un résultat positif avec d’autres substances (mucines ancides, LH, TSH, FSH, mucines gastriques…)
Entreposage du réactif de Schiff:
Bouteille ambrée bien bouchée, à l’abri de la lumière et dans un endroit frais.
Voir schéma de la méthode avidine-biotine:
p.233
Qu’est ce qui est utilisée dans la méthode indirecte:
- un anticorps spécifique à l’antigène
- un deuxième anticorps spécifique au 1er anticorps et couplé à un marqueur
Quelle adhésif on ne peut pas utiliser dans le bain d’étalement pour la mise en évidence du glycogène:
L’amidon car il crée des faux positifs
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Fouchet
Histochimique
Quelle est la description de l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux (dans le dernier bain de xylène avant de monter la lame)
Coupes paraissent brumeuses ou laiteuses dans le dernier bain de xylène lors de l’éclaircissement
Schmorls est quel type de coloration:
pigments et minéraux
Noyaux colorés trop pâle est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Quelle est l’utilité de la coloration Weigert Van Gieson
- différencier le collagène du muscle lisse et du cytoplasme
- identifier l’augmentation du collagène dans certaines maladies
Qu’est ce que la diastase:
Enzyme qui permet de digérer le glycogène présent dans les tissus.
Quelle est la cause de l’artéfact Les sections sont excessivement comprimés
- couteau émoussé
- couteau avec débris de paraffine
- paraffine derrière le couteau ou le porte-couteau
- angle de dégagement trop faible
- coupe trop rapide
- température ambiante trop élevée
Quels sont les meilleurs fixateurs pour les colorations par les lysochromes:
- tértoxyde d’osmium
- acide chromique
- Formalédhyde calcium de Baker (moins bon)
- fixateur à base de chrome: réservé pour préservation des phospholipides
Quels sont les artéfacts produits par la fixation chimique (pour la fixation des glucides):
- images de fuite
- images de polarisation: accumualtion du glycogène à l’un des pôles ou à la périphérie de la cellule
- diffusion: glycogène entrainé hors de la cellule
Réaction de solubilité préférentielle d’une coloration par les lysochromes:
Solvant du lysochrome – miscibilité –> lysochrome – miscibilité –> lipides
Le solvant du lysochrome ne doit pas être miscible avec les lipides
Les sections sont excessivement comprimés est quel type d’artéfact.
Microtomie
Comment éviter l’artéfact Perte de structures ou de détails
- allonger la période de fixation en tenant compte de la grosseur du tissu
- s’assurer que le tissu congèle le plus rapidement possible car une congélation trop lente cause la formation de cristaux de glace (qui agit comme des rasoirs)
Voir schéma pour méthode directe
p.230
Quels sont les avantages d’utiliser la fixation de formaldéhyde et la récupération des épitopes dans la méthode d’immunohistochimie:
- permet une plus grande dilution des anticorps
- épitopes non détectables avant sont maintenant détectés
- réactions plus intenses avec temps d’incubation plus court
- coloration plus uniforme
- coloration de fond diminuée
- consistance des colorations (répétition)
- possibilité d’une standardisation meilleure
Quels sont les avantages du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie : Bouin
bonne préservation des antigènes
Méthénamie d’argent de Gomori est quel type de coloration:
pigments et minéraux
La méthode PAS comprend deux étapes principales:
- oxydation périodique
- détection des glucides
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Méthénamie d’argent de Gomori
Imprégnation métallique
Le rincage de la coupe à l’acide après le Bleu alcian permet:
D’éviter une coloration non spécifique (ce n’est pas une étape de différenciation).
Les sections s’envolent et se collent aux objets ou aux autres parties du microtome est quel type d’artéfact.
Microtome
Éosine incorrectement différencié est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Quel est le mécanisme en cause de la coloration APS
Histochimie
Quelle est la description de l’artéfact Présence d’ondulations sur la coupe (washboarding)
Visible sur le bain d’étalement
Comment éviter l’artéfact Trous dans la section
- attaquer le bloc plus doucement lors du rabotage ou trempé le bloc brièvement dans l’eau glacée peut parfois corriger ce problème
- tremper le bloc (tissu exposé) brièvement dans un bain d’eau glacé
- ré-imprégner le tissu
- ré-imprégner ou re-circuler si le problème est trop sérieux
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Tissu d’apparence molle
Si fixation incomplète
- fondre paraffine
- mettre tissu dans circulateur
- démarrer procédure de nettoyage du circulateur
- passer manuellement dans alcool 95 et 70%
- mettre dans formol
- circuler avec prochaine batch
Si vu à la station d’enrobage
- couper fragment plus mince, remettre dans la cassette et traiter
- xylène pour enlever la paraffine
- tétrahydrofurane (déshydrate/éclaircit)
- paraffine (imprégnation)
- enrober de nouveau
Quelle est la cause de l’artéfact Pigment de mercure
Apparait avec tous les fixateurs ayant du mercure
Quelle est l’utilité de la coloration Réticuline de Gomori
Différencier les fibres de réticuline des autres éléments du tissu
Comment se fait la coloration des mastocytes:
Les granulations déclencehtn le phénomène de la métachromasie lorsque colorées avec le bleu de toluidine dû à l’héparine (deviennent violet).
Quel est la solution de virage utilisé dans l’imprégnation métallique:
Chlorure d’or
Mastocytes:
Cellules qui contiennent beaucoup de granulations dans le cytoplasme.
Quelle est la cause de l’artéfact Fixation par couche
Ralentissement de la vitesse de pénétration du liquide fixateur dans le tissu, le centre du tissu est donc mal ou pas fixé
Comment éviter l’artéfact Noyau de couleur rouge ou rouge-brun
s’assurer d’un bon bleuissement des noyaux
ABC est quel type de coloration:
Immunohistochimie
Hydrates de carbones sont:
Composés organiques incluant:
- les sucres (composés glucidiques)
- cellulose
- polymères qui sont surtout liés aux protéines (le glycogène)
Quels sont les cellules les plus communes dans le tissu conjonctif:
Les fibroblastes
Comment éviter l’artéfact Morceaux de tissu manquants
- noter le nombre de fragments sur cassette ou feuille de travaille
- vérifier l’intérieur du couvercle de la cassette avant de le jeter
- attention à l’utilisation du lens paper ou tea bag
Quels sont les principaux agents de sensibilisation pour l’imprégnation métallique:
- l’alun de fer
- nitrate d’argent (en solution diluée)
- sulfate d’ammonium ferrique
Quels autres méthodes peuvent colorer les spirochètes:
- Dieterle
- Steiner & Steiner
Quels sont les différentes méthodes de la congélation:
- azote liquide
- OCT (optimum cutting temperature)
Quelle est l’utilité de la coloration Bleu de Prusse
Mise en évidence du fer ferrique (Fe+++) dans les tissus
Quels sont les avantages de la coloration Hématéine de Verhoeff
Méthode la plus populaire pour les fibres élastiques
Quel est le réducteur utilisé dans la méthode de Von Kossa:
Lumière du soleil
Comment fait-on pour désinfecter le cryostat:
- vapeurs de formaldéhyde
- glutaraldéhyde 2%
- solution de phénol 5%
- alcool absolue
- solutions commerciales de plus en plus utilisée (virox)
Quelle est la méthode de visualisation le plus souvent utilisé en fluorescence:
Méthode indirecte
Desquamation est quel type d’artéfact.
De fixation
Comment éviter l’artéfact Déshydratation excessive
- circuler la biopsie séparément
- diminuer le temps de déshydratation
Quel est le mécanisme de coloration de colorants solubles dans les gras:
Basé sur la solubilité sélective.
Quels sont les résultats de la coloration de huile rouge O:
- noyaux et autres structures cellulaires
- lipides liquides et semi-liquides
- lipides solubles dans l’eau
- bleu (hématoxyline aluminique)
- rouge (huile rouge O)
- incolore
Quelle est la description de l’artéfact Pigment de carbone
Brun-noir, non réfringent
APS est quel type de coloration:
hydrates de carbone
Quelle est la cause de l’artéfact Les sections s’enroulent au lieu de rester à plat sur le couteau
- couteau émoussé
- angle de dégagement trop grand
- épaisseur des sections trop grande pour le type de paraffine
Quel type d’hématoxyline est utilisé dans l’hématéine de Weigert:
Hématoxyline ferrique car il est plus résistante aux solutions acides qui suivent.
Où se retrouve les mucines neutres:
- estomac
- prostate
- cellules caliciformes
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Warthin-Starry
Imprégnation argyrophile
Quels sont les caractéristiques du fixateu suivant, utilisé avec l’immunohistochimie: Zenker
bonne préservation des antigènes
Pourquoi la fixation dans le formaldéhyde est rarement utilisée dans la méthode d’immunofluorescence:
Car il endommage la réactivité antigénique l’amenant sous le seuil de sensibilité à la fluorescence.
Quelle est la localisation de l’artéfact Pigment de formol
- surtout sur organes hématopoïétiques
- intra et extracellulaire
Tissus pas enrobés au même niveau est quel type d’artéfact.
Enrobage
Quelle est la cause de l’artéfact Présence de stries
- couteau encoché à un endroit
- particules dures dans le tissu ou dans la paraffine
Quel méthode peut on faire au lieu de l’eau après le contact avec le réactif de Schiff:
Laver dans une solution de métabisulfite de potassium 0.55%.
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Noyaux colorés trop pâle
- si le tissu a été fixé avec un fixateur très acide (Zenker), trop décalcifié ou trop longtemps dans le fixateur, on peut augmenter le séjour dans l’hématoxyline
- recolorer les coupes après avoir identifié le problème
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu de Turnbull
Histochimique
Comment éviter l’artéfact Noyaux colorés trop pâle
- laisser les coupes suffisamment longtemps dans l’hématoxyline
- attention à la suroxydation ou l’expiration de l’hématoxyline
- respecter le temps de différenciation des noyaux
Quel est le principal agent de contrecoloration pour l’inprégnation métallique:
Rouge neutre
Les sections s’enroulent au lieu de rester à plat sur le couteau est quel type d’artéfact.
Microtomie
Quelle est la description de l’artéfact Manque de détails nucléaires
Pratiquement impossible d’observer les différents motifs de la chromatine dans le noyau
Les méthodes de détection sont utiles pour la démonstration des lipides pouvant se retrouvés à des endroits anormaux:
- embolie graisseuse
- dégénération des structures contenant des lipides
- différentiation d’une tumeur prenant naissance dans les lipides d’un ature type de tumeur
Comment éviter l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux (dans le dernier bain de xylène avant de monter la lame)
Bain d’alcool avant le xylène
Gram est quel type de coloration:
microorganismes
Quelle est la cause de l’artéfact Il ne se forme pas de ruban
- couteau émoussé
- paraffine trop dure
- angle de dégagement trop grand
- température de la pièce trop basse
- débris sur le couteau
Quelle est la cause de l’artéfact Noyaux colorés trop pâle
- un séjour trop court dans la solution d’hématoxyline
- utiliser une solution d’hématoxyline suroxydée ou expirée
- trop de différenciation de l’hématoxyline
- dans une section d’os peut être le résultat d’une décalcification excessive
Quelle méthode de visualisation d’histochimie est le plus simple:
immunofluorescence
Différents muscles:
- muscle squelettique:
- strié et volontaire
- cellules longues et plusieurs noyaux à la périphérie
- muscle cardiaque:
- strié mais non volontaire
- cellules s’anastomosent et ne possède qu’un noyau situé au centre
- disques intercalaires
- muscle lisse:
- non strié et non volontaire
- cellule plus courte et un noyau de forme allongée
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Hématéine de Verhoeff
- Hématéine de Verhoeff:
- Coloration des fibres élastiques
- L’iode agit comme agent de rétention de la laque d’hématéine
- Chlorure ferrique: Différentiateur (par excès de mordant)
- Solution de Van Gieson: Contient de l’acide picrique et fuschine acide
- Thiosulfate de sodium: Pour enlever l’excès d’iode sur les lames
Quelle est la forme des fibres élastiques:
- fines, disonctinues en vagues (derme, poumon)
- grosses, en réseau discontinue (ligaments, artères)
Quelle est la description de l’artéfact Contamination
Vue à la microscopie
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Pigment d’acide picrique
- blanchissement du tissu avec du thiosulfate de sodium 2.5%
- blanchissement du tissu avec du carbonate de lithium 1%
Comment éviter l’artéfact Les sections sont excessivement comprimés
- déplacer ou changer le couteau
- nettoyer le couteau
- nettoyer le tout
- augmenter l’angle de dégagement
- plus lentement
- diminuer la température
Quelle est la description de l’artéfact Coloration H&E irrégulière
Les sections démontrent une coloration H&E irrégulière
Quels sorte de mucines s’y trouve dans le colon:
Mucines acides carboxyléss et sulfatés
Image de fuite, images de polarisation, diffusion
est quel type d’artéfact.
Fixation des glucides
Tissu d’apparence molle est quel type d’artéfact.
Enrobage
Quelle est la cause de l’artéfact Déparaffinage non complété
- eau ayant resté dans le tissu par un séchage incomplet
- eau ayant resté dans le tissu par un séjour trop court dans les bains de xylène lors du déparaffinage
Quel est le principe de la coloration Schmorls
Basé sur la capacité du pigment de mélanine a réduire un mélange de chlorure ferrique et de ferricyanure de potassium avec production de ferricyanure ferreur, le bleu de Turnbull.
Quelle est la localisation de l’artéfact Pigment de mercure
Partout sur la lame au hasard
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Fouchet
- Réactif de Fouchet: Oxydation de la bilirubine en biliverdine
- chlorure ferrique 10%
- acide trichloroacétique
- eau distillée
- Solution de Van Gieson: Contrecolorant
Polarisation du glycogène ou effet de fuite est quel type d’artéfact.
De fixation
Comment fait-on pour éviter la formation de précipités dans le formaldéhyde:
Ajouter du méthanol au formaldéhyde.
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Masson-Fontana
Imprégnation métallique
Quelle est la cause de l’artéfact rétrécissement ou gonflement du tissu
Lors de l’utilisation d’un fixateur intolérant pendant une période de temps trop longue
Quels sont les résultats attendus de la coloration Warthin-Starry
- spirochètes
- autres bactéries
- fond
- noir
- noir
- jaune pâle à brun pâle due à l’hydroquinone
Quels sont les méthodes du complexe immun enzymatiuque soluble les plus communes:
- PAP: peroxydase - anti-peroxydase
- phosphatase alcaline - anti-phosphatase alcaline
Les fibres de réticuline sont mised en évidence grâce à:
Leur capacité d’absorber l’argent d’une solution. Il suffit ensuite de réduire l’argent chimiquement pour le transformer en sa forme métallique visible.
Pourquoi la méthode de visualisation immunofluorescence est la plus utilisé:
Elle combine la sensibilisé, la spécificité et la simplicité.
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori
- Permanganate de K 1%: Intensifie la coloration par oxydation
- Acide oxalique 1%: Enlever le surplus de permanganate de K
- Aldéhyde fuschine de Gomori: Coloration des fibres élastiques
- fuschine basique
- HCl
- paraldéhyde
- Vert lumière: Contre colorant
Troubleshooting du cryotome: si le tissu se fragmente:
La température est trop froide.
Quel colorant met en évidence le fer ferreux et quel, le fer ferrique:
- fer ferreux: bleu de Turnbull
- fer ferrique: bleu de Prusse
Comment éviter l’artéfact Les sections alternent entre épaisses et minces, course à vide (section sautée)
- augmenter légèrement l’angle de dégagement
- vérifier le fonctionnement du mécanisme
Quels sont les substances réductrices:
Substance pouvant réduire les ions de fer ferrique dans la solution en ions ferreux.
Bleu alcian-APS est quel type de coloration:
hydrates de carbone
Quel est le rôle des fibres de réticuline:
Support interne, permet aux cellules de s’accrocher (rate, foie, ganglions lympphatiques)
Chatter microscopique ou microvibration dans la section est quel type d’artéfact.
Microtomie
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu alcian-APS
Histochimie et histologique
Les fibres de réticuline peuvent être colorés par:
- Gomori pour fibres de réticuline (imprégnation à l’argent)
- Gordon and Sweet (imprégnation à l’argent)
Quelle est la cause de l’artéfact Les sections alternent entre épaisses et minces, course à vide (section sautée)
- angle de dégagement trop petit
- défaut dans le mécanisme du microtome
Comment éviter l’artéfact Pigment de formol
Utiliser du formaldéhyde tamponné
Trous dans la section est quel type d’artéfact.
Microtomie
Quels sont les deux différentes méthodes par lumière polarisée pour la mise en évidence des lipides:
- lipides isotropique: comprennent les lipides neutres
- lipides anisotropiques (bi-réfringeants): possèdent une structure cristalline
Quel déshydratant faut-il éviter lors de colorations métachromatiques:
Alcool (sauf les granulations de mastocytes)
Qu’est ce qu’une plaque anti-rouglement:
Une plaque dans le cryotome qui permet d’empêcher la coupe de rouler sur elle-même.
Qu’est ce qu’on appelle les mucosubstances épithéliales:
Mucines
Noyau de couleur rouge ou rouge-brun est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Von Kossa est quel type de coloration:
pigments et minéraux
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Bleu de Turnbull
- Solution de ferricyanure de K + HCl: Réagit avec les ions ferreux (libre) dans le tissu
- Kernechtrot: Contrecolorant
Quelle est la cause de l’artéfact Cytoplasme coloré trop pâle
- augmentation du pH de l’éosine au-dessus de 5
- contamination par l’agent de bleuissement
- éosine qui n’a pas été acidifiée
- section trop mince
- séjour trop long dans l’alcool dilué suivant l’éosine
Quels sont les désavantages du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie : Chlorure mercurique (B5)
- immunoglobulines de surface membranaires sont moins bien démontrées
- pas un bon fixateur pour les antigènes non lymphoïdes
- coloration de fond prononcée
- artéfact cytoplasmique dans les cellules tumorales
- ne devrait pas être utilisé pour la fixation de tumeurs d’origine inconnue
Les sections alternent entre épaisses et minces, course à vide (section sautée) est quel type d’artéfact.
Microtomie
Quel est l’agent réducteur utilisé dans l’imprégnation métallique:
Le formalédhyde
Quels sont les résultats attendus de la coloration Bleu de toluidine
- granulations des mastocytes
- fond
- violet foncé
- bleu
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Von Kossa
- Nitrate d’argent 5%:
- Imprégnation métallique
- L’argent réagit avec les anions carbonates et phosphates des sels de calcium
- Thiosulfate de sodium: Enlève l’argent non réduit
- Rouge neutre 1% ou autre: Contrecoloration
Quelle est la cause de l’artéfact Trous dans la section
- attaque du bloc trop aggressive
- déshydratation excessive
- air restant dans le tissu lors de l’imprégnation
- imprégnation incomplète du tissu ou circulation
Quel est l’effet de l’acide acétique sur le collagène:
Gonflement
Quelle est la cause de l’artéfact Les sections adhèrent au bloc lors de la remontée du bloc
- couteau émoussé
- angle de dégagement trop faible
- température de la pièce trop élevée
- paraffine trop molle
Comment éviter l’artéfact Manque de détails nucléaires
- fixer les tissus complètement
- déshydratation et éclaircissement complète du tissu avant imprégnation
- chaleur seulement pour paraffine
- ne pas laisser le tissu dans la paraffine fondue pour une période de temps prolongée
- assécher les coupes à une température convenable
Quelle est la localisation de l’artéfact Pigment de carbone
Partout sur le tissu, surtout dans les poumons
Quel est le principe de la coloration Rhodamine
Démonstration de la protéine sur laquelle le cuivre se fixe.
Quelle est la cause de l’artéfact Artéfact d’éponge
Utilisation des éponges donc trop de pression entre les éponges
Le ruban de sections est incurvé est quel type d’artéfact.
Microtomie
Comment éviter l’artéfact Présence de stries
- déplacer ou changer le couteau
- décalcifier pour retirer le calcium du tissu
- enlever les autres particules avec un objet très pointu
- ré-inclure dans une paraffine filtrée
- effectuer une rotation du bloc dans le porte-objet
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu alcian pH 2.5
Histologique
Coloration H&E irrégulière
est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Quels sont les fixateurs à éviter pour la fixation des glucides:
- chlorure mercurique: il détruit le glycogène
- tetroxide d’osmium: il produit de nouveaux groupes hydroxyles donc faux positif
- glutaraldéhyde: il possède deux groupes aldéhydes donc faux positif
Quels sont les avantages du OCT comme méthode de congélation:
- ne nécessite pas toujours l’emploi d’azote
- peut être utilisé seul
Quels sont les désavantages de la méthode directe d’immunohistochimie:
- seulement les sections congelées peuvent être utilisées (quenching)
- un microscope en fluorescence est nécessaire
- la méthode n’est pas très sensible
- l’auto-fluorescence des acides nucléiques peut présenter un problème
- les préparations ne sont pas permanentes. les lames doivent être gardées dans un endroit frais et sombre
Le rincage de la coupe à l’acide avant le Bleu alcian permet de:
Protéger la solution colorante contre la variation de pH.
Perte de structures ou de détails est quel type d’artéfact.
De fixation
Quelle est la cause de l’artéfact Perte de structures ou de détails
Fixation trop courte du tissu, les éléments non fixés seront abimés lors de la circulation et lors des manipulations suivantes
Que contient les granulations des mastocytes:
Histamine et héparine
Quelle est la coloration utilisée pour les coupes au cryostat:
H&E rapide avec une étape rapide de fixation au début.
Quelle est l’utilité de la coloration Trichrome de Masson
- différencier le collagène du muscle lisse et du cytoplasme dans les tumeurs
- identifier l’augmentation du collagène dans certaines maladies (cirrhose du foie)
Quelle est la description de l’artéfact Éosine incorrectement différencié
Trois teintes de rose non apparentes
Quel est le principe de la coloration Trichrome de Masson
Différence de perméabilité entre le collagène et les autres éléments acidophiles du tissu (collagène est plus perméable)
Quelle est la description de l’artéfact Pigment de formol
Pigment brun à noir, biréfringent
APS fungi est quel type de coloration:
microorganismes
Comment éviter l’artéfact Polarisation du glycogène ou effet de fuite
-utiliser un fixateur adéquat pour le glycogène lorsque celui-ci doit être bien préservé
Quelle est la description de l’artéfact Morceaux de tissu manquants
Absence de morceaux, fragments
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Schmorls
Histochimique
Quelle est la description de l’artéfact Déparaffinage non complété
Des taches ou zones blanches peuvent être observés
Quelle est la cause de l’artéfact Chatter microscopique ou microvibration dans la section
- tissus trop déshydraté
- manque d’humidité dans le tissu
- couteau émoussé
- angle de dégagement trop grand
- coupe trop rapide
Quelle est l’utilité de la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori
Différencier les fines fibres élastiques (élastine) des autres structures tissulaires
Principales étapes de l’imprégnation métallique:
- oxydation
- sensibilisation: formation de complexes organométalliques sur l’élément
- imprégnation: dépot de l’argent sur les fibres
- lavage à l’eau
- réduction (pour substance argyrophile seulement): réduire l’argent ionique sur les structures
- virage: remplacement de l’argent par l’or
- réduction (fixage): enlève les traces d’argent
- contrecoloration
Les sections adhèrent au bloc lors de la remontée du bloc est quel type d’artéfact.
Microtomie
Quelle est l’utilité de la coloration Masson-Fontana
Démonstration des substances argentaffines comme dans la mélanine et les granules argentaffines des tumeurs carcinoïdes
Comment éviter l’artéfact Présence d’ondulations sur la coupe (washboarding)
- serrer le bloc ou la lame
- changer les pièces usées
- rentrer la manche du microtome
- réduire l’angle de dégagement
Quelle est la description de l’artéfact Tissu d’apparence molle
Le centre de la pièce a une texture molle car elle a été mal circulée
Quel est le rôle du collagène:
Force/résistance
Qu’est ce qui peut remplacer l’alpha-amylase dans la coloration APS-D:
La salive
Quels tissus se coupent mieux au cryotome de quelques degrés plus chaud:
- cerveau
- foie
- rate
- nodules lymphoides
- matériel endométrial
Quels sont les colorants lysochromiques:
- huile rouge O
- noir soudan B
Quels sont les avantages du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie : Glutaraldéhyde
préserve bien la morphologie tissulaire
Quel est le principe des réactions histochimiques pour la mise en évidence des lipides:
Fixation à l’aide du formol/calcium
Quels sont les caractéristiques du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie; alcool et acétone
- coagulant
- non additif
cytolyse et autolyse est quel type d’artéfact.
De fixation
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Schmorls
- Solution de ferricyanure de potassium et de chlorure ferrique: Coloration
- Kernechtrot ou éosine: Contrecoloration
Il existe des compatibilités particulières entre les oxydants et les sensibilisateurs:
- permanganate de potassium avec l’alun de fer: colore les fibres et laisse les noyaux relativement incolores
- acide périodique et nitrate d’argent: permet d’obtenir une excellente coloration des fibres et des noyaux
- permanganate associé au nitrate d’argent: bon résultats pour les fibres et noyaux