Examen 3 (Histotechnologie) Flashcards
Qu’est ce qui comprend les pigments biliaires:
Comprend la bilirubine libre, biliverdine, bilirubine conjuguée et hématoïdine
Où se trouve la membrane basale:
Sépare l’épithélium et le tissu de soutient.
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Masson-Fontana
- Solution d’argent de Fontana: Imprégnation
- Chlorure d’or 0.2%: Virage
- Thiosulfate de sodium 5%: Réduction (fixage)
- Nuclear fast red ou éosine: Contrecolorant
Quelle est la maintenance du cryostat:
- décongeler
- nettoyer
- lubrification (doit être assécher avant)
Quels sont les résultats de la coloration de Noir soudan B:
- noyaux et autres structures aluminiques
- esters non saturés et triglycérides
- phospholidpies
- myéline
- rouge (Kernechtrot aluminique)
- noir (noir soudan)
- gris (noir soudan)
- biréfringence de couleur bronze
Quelle est la description de l’artéfact Circulation inadéquate
Coloration nucléaire pauvre ou absence de coloration de certains noyaux (surtout dans HE)
Comment éviter l’artéfact cytolyse et autolyse
- plonger le tissu dans le fixateur aussitôt que possible après le prélèvement
- s’assurer que le liquide fixateur est en contact avec toute la surface du tissu
Quelle est la cause de l’artéfact Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur
- utilisation de formol-zinc ou formol tamponné avec phosphate et déshydratation débutée avec alcool plus de 70%
- pH formol-zinc plus de 7
Comment éviter l’artéfact Tissu d’apparence molle
- s’assurer que le tissu est coupé mince à la salle de coupe
- s’assurer que le tissu est bien fixé
- s’assurer qu’il n’y a pas de problème mécanique avec le circulateur
Quels sont les caractéristiques du fixateu suivant, utilisé avec l’immunohistochimie : Chlorure mercurique (B5)
- coagulant
- additif
Voir schéma de la méthode indrecte
p. 231
Comment éviter l’artéfact Précipités bleu-noir sur les sections
filtrer l’hématoxyline tous les jours avant l’utilisation
Quel fixateur ne doit-on pas être utilisé dans la méthode de Ziehl-Neelsen:
Carnoy, car il peut détruire la propriété alcoolo-acido-résistante
Quelle est l’utilité de la coloration Mayer Mucicarmine
Mise en évidence des mucines épithéliales acides
Comment éviter l’artéfact Pigment de chrome
-éviter les fixateurs à base de chrome
Le collagène est sécrété par:
Fibroblastes
Comment fait-on pour s’assurer de la qualité du réactif de Schiff:
- ajouter quelques gouttes de formaldéhyde (ou du glutaraldéhyde) à environ 10 ml de réactif de Schiff
- si la solution vire au rose, le réactif est encore bon
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Pigment de formol
Laver la lame dans une solution alcoolique saturée d’acide picrique
Fixation par couche est quel type d’artéfact.
De fixation
Quels sont les avantages du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie : Chlorure mercurique (B5)
- excellent pour la démonstration d’antigènes intracytoplasmiques
- biopsies de ganglions lymphatiques : meilleure préservation des détails cytologiques et augmentation de la réactivité immunologique
Quels sont les caractéristiques du fixateu suivant, utilisé avec l’immunohistochimie :Méthanol-Carnoy
fixateur à base d’alcool
Quels sont les résultats attendus de la coloration Masson-Fontana
- noyau
- mélanine
- granules argentaffines
- rose
- noir
- noir
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Méthénamie d’argent de Gomori
- Méthénamine d’argent + borax 5%: Imprégnation
- Thiosulfate de Na 2%: Réduction (fixage)
- Vert lumière: Contrecoloration
Qu’est ce qui contient normalement une quantité normale d’hémosidérine:
Moelle osseuse et la rate (due à la destruction et l’élimination des globules rouges).
Comment éviter l’artéfact Noyaux colorés trop foncé (Coloration H&E)
- s’assure de la bonne épaisseur de la section
- s’assurer du bon temps dans l’hématoxyline
- s’assurer du bon temps de différentiation
Le collagène peut etre coloré par:
- trichrome de masson
- gomori
- van gieson - acide picrique
Quelle est la description de l’artéfact Précipités bleu-noir sur les sections
Précipités bleu-noir sur les sections
Ziehl-Neelsen est quel type de coloration:
microorganismes
Comment éviter l’artéfact Les sections s’envolent et se collent aux objets ou aux autres parties du microtome
- humidifier l’air en soufflant sur le bloc et sur le couteau lors de la coupe
- faire bouillir de l’eau près du microtome
- mise à terre du microtome
- ioniser l’air
Les organes visés par une surcharge en fer (état pathologique) sont:
- rate (surtout)
- ganglions lymphatiques
- foie
Quel est le principe de la coloration Von Kossa
Lorsque les sels de calcium sont traités avec une solution qui renferme certains cations comme l’argent, ceux-ci se substituent au calcium en se liant à l’anion phosphate ou carbonate auquel il était lié. Il y a ensuite réduction de l’argent à sa forme métallique ce qui révèle les sites où il y a calcification
Quelle est l’utilité de la coloration Ziehl-Neelsen
Démonstration des bactéries acido-alcoolo-résistantes dans les tissus
Quel est le principe de la coloration Weigert Van Gieson
Il y a une compétition entre deux colorants anioniques (acide picrique et fuschine acide).
- l’hématoxyline ferrique (Weigert): coloration des noyaux et résistant à l’acide
- acide picrique: coloration du cytoplasme et muscle (MM faible)
- fuschine acide: coloration du collagène (MM plus élevée)
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Mayer Mucicarmine
Histochimie
Comment éviter l’artéfact Les sections adhèrent au bloc lors de la remontée du bloc
- déplacer ou changer le couteau
- augmenter l’angle de dégagement
- ajuster la température de la pièce
- utiliser une paraffine plus dure
Comment éviter l’artéfact Cytoplasme coloré trop pâle (coloration H&E)
- rincer les coupes après l’agent de bleuissement
- acidifier l’éosine
- s’assurer d’une bonne épaisseur des coupes
- s’assurer que le séjour dans les alcools à basse concentration suivant l’éosine ne soit pas trop long. Plus il y a d’eau dans ces solutions d’alcool, plus il y aura d’éosine enlevé
Quelle est la cause de l’artéfact Éosine incorrectement différencié
- mauvaise fixation
- déshydratation et éclaircissement inadéquat
- différenciation de l’éosine inadéquat
- pas un bon pH de l’éosine
Troubleshooting du cryotome: Si le mécanisme devient raide
- traiter à l’alcool 100%
- assécher
- lubrifier à nouveau
Pourquoi les colorants solubles dans les gras (mise en évidence des lipides) ne sont pas des vraies colorants:
Il leur manque un auxochrome (sauf le Noir Soudan B). Ils sont appelés des lysochromes.
Quels sont les méthodes de visualisation de l’immunohistochimie:
- immunofluorescence
- immunoperoxydase (immunohistochimie enzymatique)
L’imprégnation métallique s’applique surtout à:
- réticuline
- mélanine
- membrane basale
- fungus
- spirochètes
- système nerveux
Quelle est la description de l’artéfact Pigment de chrome
Rouille, orange, brun, noir
Quelle est la cause de l’artéfact Noyau de couleur rouge ou rouge-brun (coloration H&E)
- la solution d’hématoxyline est sur le point de ne plus être bonne
- l’étape de bleuissement des noyaux n’a pas été effectuée correctement
Quelle est la localisation de l’artéfact Pigment d’acide picrique
Partout sur le tissu
Quel est une deuxième méthode pour la coloration au calcium:
Alizarine rouge
rétrécissement ou gonflement du tissu est quel type d’artéfact.
De fixation
Quelle est la cause de l’artéfact Pigment de formol
L’acide formique non tamponné + hémoglobine
Quelle est l’utilité de la coloration Rhodamine
Démonstration du cuivre dans les tissus, surtout dans le foie (Maladie de Wilson)
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration ABC
- Traitement des lames avec H2O2 + méthanol:
- Procédure de blocage no 1.
- Blocage de l’activité endogène de la peroxydase (surtout pour les tissus contenant beaucoup de sang)
- Solution protéique de blocage:
- Procédure du blocage no 2.
- Blocage des sites chargés (collagène et conjonctif) pour ne pas que les anticorps s’y fixent
- La solution protéique emplira les sites chargés ne laissant pas de place pour l’anticorps primaire
- Anticorps primaire: Spécifique à l’antigène recherché
- Anticorps secondaire: Conjugué à la biotine
- Réactif ABC: Complexe avidine-biotine couplé à un enzyme (peroxydase)
- DAB: Formation d’un complexe coloré
- Hématoxyline de Mayer: Contrecoloration
La surface du bloc n’est pas sectionnée également est quel type d’artéfact.
Microtomie
Quels solutions peuvent être explosives si entreposées pendant plusieurs jours:
Argent ammoniacal et alcaline
Pigment de formol est quel type d’artéfact.
De coloration
Quel est le principe de la coloration Méthénamie d’argent de Gomori
Dépôt d’urate dans les articulations
La méthode d’immunofluorescence est surtout utilisé pour:
Les biopsies de peau et de reins (coupe par congélation préférable).
Qu’est ce qui fait partie de la solution de Van Gieson:
- acide picrique
- fuschine acide
Quelle est l’utilité de la coloration Grocott
Démonstration des mycoses dans les tissus
Quelle est l’effet d’une congélation lente:
- formation de cristaux de glace dans le tissu à partir de l’eau préesnte
- la grosseur des cristaux est porportionnelle à la vitesse de congélation
- les cristaux de glace apparaissent comme des trous dans le tissu
Quel est l’avantage de l’azote liquide comme méthode de congélation:
Plus rapide
Présence de stries est quel type d’artéfact.
Microtomie
Quelle est la lame contrôle pour la coloration de Rhodamine:
Un foie foetal fixé pas plus que 24 heures (il contient de 3-4 fois plus de cuivre dans les hépatocytes).
Quelle est la description de l’artéfact Desquamation
Perte de cellule à la périphérie d’un tissu
Présence d’ondulations sur la coupe (washboarding) est quel type d’artéfact.
Microtomie
Questce que APS est court pour:
Acide périodique de Schiff
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Rhodamine
- Solution de Rhodamine: Mise en évidence du cuivre
- Hématoxyline de Mayer: contrecoloration
Comment fait-on la préparation des tissus pour la coloration par les lysochromes:
- fixation par congélation: la meilleure méthode pour une bonne peréservation mais ne permet pas une conservation à long terme
- fixation chimique: pour une préservation des lipides à long terme
Quels sont les résultats attendus de la coloration Bleu alcian-APS
- polysaccharides neutres
- mucosubstances strictement acides
- autres substances
- mucines neutres (mucus dans les cellules caliciformes de l’estomac)
- mucus dans les cellules caliciformes du petit intestin
- mucus dans les cellules caliciformes du gros intestin
- glycogène
- membrane basale
- magenta
- bleu
- teintes de rose
- magenta (2.5 et 1.0)
- bleu (2.5) et magenta (1.0)
- bleu (2.5 et 1.0)
- magenta (2.5 et 1.0)
- magenta (2.5 et 1.0)
Pigment d’acide picriquje est quel type d’artéfact.
De coloraton
La membrane basale est fabriqué par quoi:
Les cellules épithéliales
Quel est le mécanisme en cause de la coloration May-Grunwald Giemsa
Histologique
Quelle est la cause de l’artéfact Circulation inadéquate
- reste de l’eau dans les tissus quand il va dans l’éclaircissement
- présence d’agent éclaircissement dans paraffine (odeur xylène)
- utilisation trop de chaleur pendant le cycle
- problèmes mécaniques avec le circulateur
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux (dans le dernier bain de xylène avant de monter la lame)
Remontant les étapes en changeant les bains d’alcool et de xylène, et ensuite en réhydratant et éclaircissant les sections
Mayer Mucicarmine est quel type de coloration:
hydrate de carbone
Caractéristiques de la biotine:
- vitamine
- retrouvé dans le jaune d’oeuf
- forte affinité pour l’avidine
Quels sont les résultats attendus de la coloration APS
- glycogène
- membrane basale
- noyau
- cytoplasme, GR
- mucines acides
- Fungi
- magenta (APS positif) et non coloré APS diastase
- magenta (APS positif) et magenta APS diastase
- bleu pâle et bleu pâle au APS diastase
- bleu pâle et bleu pâle au APS diastase
- incolore à magenta au et incolore à magenta au APS diastase
- magenta et magenta au APS diastase
Quelle est l’utilité de la coloration Schmorls
Mise en évidence des substances réductrices présentes dans le tissu
Hématéine de Verhoeff est quel type de coloration:
tissu de soutient et des muscles
Quels sont les résultats attendus de la coloration May-Grunwald Giemsa
- bactéries
- noyau
- cytoplasme des leucocytes
- bleu
- bleu
- rose, gris, bleu (dépendant du type de la cellule et son stade de développement)
Quelle est l’utilité de la coloration Méthénamie d’argent de Gomori
Démonstration des urates dans les tissus
Comment éviter l’artéfact rétrécissement ou gonflement du tissu
- ne pas dépasser la période de temps idéale de la fixation
- choisir un fixateur tolérant
- choisir un fixateur composé ayant un ingrédient qui contrecarre l’intolérance
Quelle est la cause de l’artéfact Dessication accidentel du tissu
-tissu laissé à l’air libre pendant la circulation
Pourquoi y a til pas d’acide acétique dans la solution de ferrocyanure acidifié pour la coloration de BLeu de prusse:
Car l’acide acétique peut dissoudre le fer. On utilise l’acide chlorydrique au lieu.
Déshydratation excessive est quel type d’artéfact.
Circulation
Quelle est la description de l’artéfact Déshydratation excessive
Sous forme de microchatter sur les bords du tissu
Artéfact d’éponge est quel type d’artéfact.
Circulation
Quel est le principe de la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori
- formation d’une solution d’aldéhyde fuschine
- affinité des fibres élastiques pour la solution
Quels sont les résultats attendus de la coloration Bleu de Prusse
- noyau, cytoplasme, GR
- collagène, muscle
- fer ferrique, hémosidérine
- rose
- rose
- bleu
Quels sont les résultats attendus de la coloration Bleu de Turnbull
- noyau, cytoplasme, GR
- collagène, muscle
- fer ferreux
- rose
- rose
- bleu
Quel est le rôle du chromogène dans la méthode de visualisation l’immunoperoxydase:
- donneur d’électron
- produit une coloration suite à une oxydation
Quels sont des exemples de solvants lysochromes:
- alcool 70%
- acétone/alcool
- propylène glycol
- isopropanol 60%
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Weigert Van Gieson
Histologique
Comment éviter l’artéfact Tissus pas enrobés au même niveau
- appliquer pression fermement et uniformément sur le tissu
- garder la paraffine fondue dans le fond du moule
- travailler rapidement quand plusieurs fragments et refroidir juste assez pour faire adhérer tous les morceaux au fond du moule
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Cytoplasme coloré trop pâle
décolorer les coupes et recolorer en y apportant les corrections
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Dessication accidentel du tissu
- enlever le plus de paraffine possible (blot off)
- placer le tissu dans une solution réhydratante : eau, alcool 100, carbonate sodium aqueux
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Gram
Histologique
Quelle est l’utilité de la coloration Bleu de Turnbull
Mise en évidence4 du fer ferreux (Fe++) dans les tissus
Quelle est la différence de détection entre huile rouge O et noir soudan B:
- huile rouge O: lipides neutres
- noir soudan B: lipides neutres, plus spécifiques que l’huile rouge O pour les phospholipides
Les méthodes d’imprégnation à l’argent sont divisées en 2 groupes:
- réaction argentaffine: le tissu a la capacité de réduire l’argent seul
- réaction argyrohile: le tissu n’a pas la capacité de réduire l’argent. Il faut utiliser un agent réducteur
Pourquoi faut-il faire la coloration de Ziehl-Neelsen sur lame:
Car dans un coplin, les bactéries peuvent transfere de lames.
Comment éviter l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux
(lorsque les coupes sont mises dans l’eau à la suite de l’alcool pendant le déparaffinage)
Bonne rotation des bains d’alcool
Il ne se forme pas de ruban est quel type d’artéfact.
Microtomie
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Déparaffinage non complété
- traiter les sections avec alcool absolue pour retirer l’eau et traiter de nouveau au xylène pour retirer la paraffine
- si les coupes ont été colorés, traiter et recolorer
Quelle est la cause de l’artéfact Présence d’ondulations sur la coupe (washboarding)
- couteau ou bloc pas serré
- pièces du microtome trop usées
- manche du microtome sortie à son maximum
- angle de dégagement trop grand
Quelle est l’utilité de la coloration Fouchet
Démonstration de la bilirubine dans les tissus
Quel est le désavantage de l’azote liquide comme méthode de congélation:
Les tissus mous ont tendance à craquer (expansion trop rapide de la glace dans le tissu).
Quelle est la cause de l’artéfact Manque de détails nucléaires
- une fixation incomplète est la cause principale
- une chaleur excessive lors de la circulation des tissus ou lors du séchage des coupes
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Grocott
- Acide chromique 5%: Oxydation et production d’aldéhydes
- Métabisulfite de sodium 1%: Blanchiment, retire l’acide chromique résiduel
- Solution de méthénamine d’argent: Imprégnation
- Chlorure d’or 0.1%: Virage
- Thiosulfate de sodium 2%: Réduction (fixage)
- Vert lumière: Contre coloration
Quels sont les principaux agents oxydants de l’imprégnation métallique:
- permanganate de K
- métabisulfite de Na
- acide phosphomolybdique
- acide périodique
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux
(lorsque les coupes sont mises dans l’eau à la suite de l’alcool pendant le déparaffinage)
Remonter les étapes en changeant les bains d’alcool et en reprenant les étapes des bains d’alcool jusqu’au bain d’eau
Quelle est la différence de solvant entre huile rouge O et noir soudan B:
- huile rouge O: isopropanol 60% car il n’extrait pas les lipides du tissu
- noir soudan B: propylène glycol car il n’extrait pas les lipides du tissu
Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux (dans le dernier bain de xylène avant de monter la lame)
est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Masson-Fontana est quel type de coloration:
pigments et minéraux
Comment éviter l’artéfact Pigment d’acide picrique
-éviter l’utilisation de l’acide picrique
Quels sont les résultats attendus de la coloration Schmorls
- noyau
- mélanine
- granules argentaffines
- rose
- bleu
- bleu
Qu’est ce qui est utilisée dans la méthode directe:
- anticorps à spécificité connue pour identifier un antigène dans le tissu du patient
- l’anticorps est couplé à un fluorochrome
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Bleu de Prusse
- Solution de ferrocyanures de K + HCl:
- Le HCl libère le fer de l’hémosidérine
- Réagit avec les ions ferriques dans le tissu
- Pigment bleu et insoluble
- Kernechtrot: Contrecolorant (rougeâtre)
Contamination est quel type d’artéfact.
Enrobage
Morceaux de tissu manquants est quel type d’artéfact.
Enrobage
Quels sont les résultats attendus de la coloration Bleu alcian pH 2.5
- mucines acides
- autres structures
- turquoise
- rose (selon le contre colorant)
Quelle est la description de l’artéfact Noyaux colorés trop foncé
Noyaux trop foncés
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Ziehl-Neelsen
- Fuschine carbolique (ou phénolée) à froid: Colore les bactéries acido-alcoolo-résistantes
- Alcool-acide: Différentiation. Retrait du colorant de toutes les bactéries qui ne possèdent pas de parois cireuses
- Bleu de méthylène ou hématoxyline de Harris: Contre coloration
Quels sont les substances réductrices:
- mélanine
- cellules endocrines
Quels sont les avantages de la cryotomie:
- plus rapide
- pour les biopsies urgentes
- mise en évidence des lipides
- techniques en fluorescences (dermatologie)
Quels sotn les différnetes méthodes de mise en évidence des lipides:
- solubilité: rarement utilisé
- lumière polarisé: rarement utilisé
- réduction par le tetroxyde d’osmium: non spécifique
- colorants solubles dans les gras: le plus commun
- réactions histochimiques: utilisé surtout en recherche
La méthode directe d’immunohistochimie est utilisé surtout sur quel type de spécimen:
- peau
- rein
Comment éviter l’artéfact Éosine incorrectement différencié
- s’assurer que la fixation est adéquate et complète
- s’assurer que la déshydratation et éclaircissement sont adéquats lors de la circulation
- séjour adéquat dans le différentiateur
- le pH de l’éosine est adéquat
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Bleu alcian-APS
- Bleu alcian à pH 2.5 en solution d’acide acétique 3%: Idem à Bleu Alcian pH 2.5
- Réactif de Schiff (fuschine basique): Colore les mucosubstances neutres
- Éosine ou Kernechtrot: Contre colorant
Quels sont les résultats attendus de la coloration Grocott
- contour des champignons
- partie interne des champignons, levures
- fond
- mucines, glycogène, mélanine
- noir
- gris
- vert (avec vert lumière)
- noir
Quelle est la description de l’artéfact Pigment de mercure
Brun, noir ou brun-noir, non biréfringent
Métabolisme du fer:
p.208.5
Quels sont les différents types d’enzymes utilisés dans la mtéhode de visualisation immunoperoxydase:
- phosphatase alcaline
- bêta galacotsidase
- glucose oxydase
- peroxydase de radis fort
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Éosine incorrectement différencié
Décolorer et recolorer si possible
Qu’est ce qui se passe durant la deuxième étape de la méthode APS (détection des glucides):
- le réactif de Schiff est le produit de la réduction de la fuschine basique par un acide sulfureux
- lorsque la fushine basique est mise en présence d’un acide sulfureux, les groupes chromophores du colorant sont brisés par sulfuration
- le composé devient incolore et on le nomme la leucofuschine, qui est un leucocolorant
- quand le réactif de Schiff se combine aux groupements aldéhydles libres produits par l’oxydation de l’acide périodique, ces groupements redonnent une couleur au colorant en recréant un chromophore dans la molécule
Où se retrouve les mucines acides sulfatées:
- glandes bronchiques
- mucines du gros intestin
Weigert Van Gieson est quel type de coloration:
tissu de soutient et des muscles
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Gram
- Violet de cristal
- Gram positif : paroi est coloré en bleu violet
Gram négatif : idem
- Iode de Gram
- Gram positif : violet de cristal est renforcée
Gram négatif : idem
- Éther-acétone
- Gram positif : resserrement des pores, le complexe violet de cristal-diode est retenu
Gram négatif : dissolution des lipides, le complexe violet de cristal-iode est extrait
- Fuschine basique
- Gram positif : complexe d’iode-violet de cristal masque l’action de la fuschine basique
Gram négatif : la fuschine basique colore les bactéries en rouge
- Acide picrique-acétone
- Gram positif : enlève le surplus de colorant sur les tissus et contrecolorer les éléments acidophiles en jaune
Gram négatif : idem
Quels sont les résultats attendus de la coloration Ziehl-Neelsen
- bactéries acido-alcoolo-résistantes
- GR
- noyaux
- fond
- rouge
- orange
- bleu
- bleu
Quels sont les avantages de la coloration Weigert Van Gieson
- ne colore que les fibres de collagène (Masson peut colorer aussi les fibres de réticuline)
- rapide
- pas de différentiation
Rhodamine est quel type de coloration:
pigments et minéraux
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Warthin-Starry
- Solution de nitrate d’argent: Imprégnation (formation de complexes organo-métallique)
- Solution de nitrate d’argent-hydroquinone gélatinisée: Développeur
L’hydroquinone a deux rôles :
- agent réducteur : permet à l’argent de se déposer sur les complexes organo-métalliques
- agent de développement : augmente la vitesse de transformation de l’argent ionique en argent métallique et empêche la reconversion
Quels sont les résultats attendus de la coloration Fouchet
- bile ou bilirubine
- fond
- vert émeraude à vert olive
- jaune
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration Bleu de toluidine
- Solution de bleu de Toluidine: Colore tous les éléments du tissu
Comment éviter l’artéfact Chatter microscopique ou microvibration dans la section
- vérifier la cédule de l’appareil à circulation
- rétablir l’humidité du tissu en exposant la surface du bloc par rabotage et en le mettant sur une surface d’eau glacée ou de la glace
- changer le couteau
- réduire l’angle de dégagement
- réduire la vitesse de coupe
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu de Prusse
Histochimique
Quels sont les avantages de la coloration Trichrome de Masson
- bonne distinction entre les fibres de collagènes et les autres structures fibreuses
- bleu d’aniline : meilleur pour de petites quantités de collagène
- vert lumière : quand le collagène est prédominant
Quelle est la cause de l’artéfact Pigment d’acide picrique
Fixation avec Bouin (acide picrique)
Quelle est la description de l’artéfact Noyau de couleur rouge ou rouge-brun
Les noyaux ont une teinte rouge ou rouge-brun au lieu de bleu
Quelle est la forme des fibres de réticuline:
Réseau de fibres délicats, embranchés
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Réticuline de Gomori
Imprégnation métallique de type argyrophile
Quelle est la description de l’artéfact Tissus pas enrobés au même niveau
On n’atteint pas toute la surface du tissu en même temps au microtome
Quelle est la description de l’artéfact Noyaux colorés trop pâle
Noyaux trop pâles, manque de contraste
Quels sont les désavantages de la coloration Weigert Van Gieson
Faible coloration du cytoplasme
Quels sont les conditions pour la microtomie pour l’immunohistochimie:
- eau distillée propre seulement
- pas d’adhésif ou de substance ajouté au bain
- port de gants (particules de peau)
- pas de plis dans le tissu (provoque des artéfacts)
Quels sont les fixateurs utilisés pour les colorants lysochromiques (huile rouge O et noir soudan B):
- meilleur: congélation
- sinon: formaline
- jamais: alcool, carnoy, bichromate de potassium
- ne pas circuler les tissus
Quelle est la description de l’artéfact Image de fuite, images de polarisation, diffusion
Utilisation de fixateurs à éviter :
- chlorure mercurique : il détruit le glycogène
- Tetroxyde d’osmium : il produit de nouveaux groupes hydroxyles (faux positifs)
- glutaraldéhyde : possède 2 groupes aldéhydes (faux positifs)
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Ziehl-Neelsen
Histologique
Quelle est la cause de l’artéfact Coloration H&E irrégulière
- présence d’eau ou de liquide fixateur dans la paraffine lors de l’imprégnation
- contamination des réactifs dans un appareil à circulation de type fermée causé par un mauvais fonctionnement de l’équipement
- absorption d’eau présente dans l’atmosphère par les alcools servant à la déshydratation dans le cas d’un appareil à circulation de type ouvert
- si le niveau des solutions ne parvient pas à recouvrir toute la surface de la lame
Comment fait-on pour vérifier si la solution d’hématoxyline est bonne a utiliser:
Placer une goutte d’hématolique d’aluminium sur un papier filtre et la couleur deviendra marron avec une bordure violet.
Quels sont les composantes du tissu de soutient:
- collagène
- fibres élastiques
- fibres de réticuline
- membrane basale
- fibroblastes
- cellules adipeuses ou adipocytes
- mastocytes
Quels sont les résultats attendus de la coloration Mayer Mucicarmine
- mucines acides
- capsules du Cryptococcus
- noyaux
- autres éléments tissulaires
- rose foncé à rouge
- rose foncé à rouge
- noir
- bleu ou jaune
Pigment de carbone est quel type d’artéfact.
De coloration
Les mucines sont produits par quoi:
Épithélium, fibroblastes et les mastocytes.
Quelle est la cause de l’artéfact Tissu d’apparence molle
- sections trop épaisses à la salle de coupe
- compression entre le dessus et dessous de la cassette, les liquides ne pénètrent pas tout le tissu
Bleu de toluidine est quel type de coloration:
Démonstration des mastocytes dans les tissus
Quelle est la localisation de l’artéfact Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur
Partout dans les tissus
Pourquoi le glucose seul (monosaccharide) ne peut pas être démontré dans une section de tissu:
Car il est soluble dans l’eau et possède une petite taille mooléculaire.
Quelle est l’utilité de la coloration Bleu alcian pH 2.5
Démonstration des mucopolysaccharides acides et des glycoprotéines, les deux sulfatés et carboxylés
- glandes bronchiques
- glandes salivaires
- cellules caliciformes
- mucus
Quelle est l’utilité de la coloration Bleu alcian pH 1.0
- démonstration des mucopolysaccharides acides sulfatés et des mucines acides sulfatées et des glycoprotéines sulfatées
- ne colore pas celles qui sont carboxylés
Quels sont les résultats attendus de la coloration Bleu alcian pH 1.0:
- mucines acides sulfatés
- autres structures
- turquoise
- rose
Quelle est la description de l’artéfact Orientation incorrecte
À la microscopie (parfois à la microtomie), structures essentielles diffiliciles ou impossible à visualiser
Quelle est la cause de l’artéfact Noyaux colorés trop foncé
- séjour trop long dans la solution d’hématoxyline
- sections trop épaisses
- différentiation de l’hématoxyline insuffisante
Quelle est l’utilité de la coloration May-Grunwald Giemsa
- démonstration des bactéries, rickettsies et Toxoplasma gondii
- utilisée pour la différentiation de cellules présentes dans le tissu hématopoïétique
Comment peut on démontrer les cellules adipeuses:
Coupe à la congélation en utilisant des techniques spéciales de coloration.
Quel est le principe de la coloration Gram
La couche des Gram négatif (lipopolysaccharides) sera dissoute pendant le rinçage à l’acétone permettant au cristal violet de se retirer
Quelle type de réaction est la coloration APS:
Réaction histochimique
Quels sont les différents chromogènes utilisés dans la méthode de visualisation d’immunoperoxydase:
- DAB
- insoluble dans l’alcool et le xylène
- coloration brune
- extremement cancérigène
- AEC
- soluble dans l’alcool (donc seulement utilisé dans un milieu de montage aqueux)
- coloration rouge
- propriétés cancérigènes
Quelle milieu d’imprégnation faut-il utiliser pour l’immunohistochimieP:
La paraffine est dommageable pour les antigènes dont en utilisé un avec un bas point d’ébullition.
Quel est le meilleure fixateur pour les lipides:
Tetroxide d’osmium
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration May-Grunwald Giemsa
- Solution de travail de Jenner
- Solution de travail de Giemsa
- Acide acétique 1%: Différentiation
Qu’est ce qu’on fait si les tissus dans la méthode Warthin-Starry a été surdéveloppées (trop réduites):
Elles peuvent être traiteés avec une solution d’iode et de thiosulfate de sodium pour retirer la coloration et ensuite être recolorées.
Quel sorte de mucines s’y trouve dans l’intestin grêle:
Mucines acides carboxylés et neutres
C’est quoi les mucines:
Substances muqueuses qui ont un rôle de protection.
Quelle est la description de l’artéfact Artéfact d’éponge
Séparation du tissue de l’éponge
Pourquoi on utilise l’eau après le réactif de Schiff:
Retirer l’excès de réactif qui pourrait donner des faux positifs.
Réticuline de Gomori est quel type de coloration:
imprégnation métallique
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Pigment de mercure
Iode alcoolique (enleveur) + thiosulfate de sodium (enlève iode)
Quel est le principe de la coloration Grocott
La paroi des champignons a une teneur élevée en glucides. Il y a oxydation des glucides, production d’aldéhydes, suroxydation en carboxyles et mise en évidence des aldéhydes par méthénamine d’argent
Quel est le mécanisme en cause de la coloration APS fungi
Histochimie
Fouchet est quel type de coloration:
pigments et minéraux
Quels tissus se coupent mieux au cryostat de quelques degrés plus froid:
Tissu avec gras
Quels sont les désavantages de la coloration Fuschine paraldéhyde de Gomori
- méthode non spécifique
- peut colorer d’autres substances
- mucosubstances sulfatées
- granulation des cellules Bêta du pancréas
- mastocytes
- matrice du cartilage
Quelle est la cause de l’artéfact Morceaux de tissu manquants
- manque d’attention
- erreur à la salle de coupe
Qu’est ce qui se passe durant la première étape de la méthode APS (oxydation par l’acide périodique):
L’acide périodique rompt les liaisons entre deux carbones et il y a libération des aldéhydes réactifs (CHO).
Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur est quel type d’artéfact.
Circulation
Est-ce que l’azote liquide comme méthode de congélation est utilisé seul:
Rarement, elle est souvent accompagnée d’un médium comme l’isopentane dans lequel le tissu est placé avant de le plonger dans l’azote.
Quelle est la cause de l’artéfact Orientation incorrecte
Mauvaise orientation du morceau de tissu
Quelle est la cause de l’artéfact Eau et coupes d’aspect brumeux ou laiteux (dans le dernier bain de xylène avant de monter la lame)
Toujours présence d’eau sur les coupes. Étape de déshydratation n’a pas été complétée
Quels sont les caractéristiques de l’hémosidérine:
- granules bruns
- non biréfringents
- formes irrégulières
- groupés en amas
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Grocott
Imprégnation métallique
Quelle est l’utilité de la coloration APS fungi
Mise en évidence des champignons
Comment éviter l’artéfact Précipité dans la chambre et les tubulures du circulateur
- débuter la déshydratation avec alcool 70%
- pH formol-zinc doit demeurer sous 7
Quel est le principe de la méthode de visualisation immunoperoxydase dans l’immunoshitochimie:
L’enzyme, en présence d’un substrat et d’un chromogène, fournit un système qui permet de visualiser la localisation de l’anticorps sur le tissu, il y a développement d’une couleur.
Quel est le mécanisme en cause de la coloration Bleu de toluidine
Métachromasie
Quels sont les avantages du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie: Méthanol-Carnoy
bonne préservation des antigènes
Quel est le principe de la coloration Masson-Fontana
Mélanine est une substance argentaffine capable de réduire une solut9ion d’argent.
Manque de détails nucléaires est quel type d’artéfact.
Coloration H&E
Quelle est la description de l’artéfact Dessication accidentel du tissu
Visible lors de l’enrobage et sous forme de bloc (microtomie)
Quelle est l’utilité de la coloration Gram
Démonstration des bactéries dans les tissus
Quel est le métal le plus utiisées pour l’imprégnation métallique:
L’argent sous forme de nitrate d’argent
Quels sont les caractéristiques du fixateur suivant, utilisé avec l’immunohistochimie: Formaldéhyde
- non coagulant
- additif
Comment fait-on pour se débarrasser de l’artéfact Noyaux colorés trop foncé
- si la section n’est pas trop épaisse, décolorer et recolorer en s’assurant ou ajustant les temps dans l’hématoxyline et de différentiation
Quels sont les réactifs utilisés dans la coloration APS
- Acide périodique: Oxydation des groupes glucidiques pour former des aldéhydes
- Réactif de Schiff (fuschine basique): Le réactif de Schiff est un colorant dont le chromophore est détruit
- Hématoxyline: Contre colorant
- Diastase (PAS diastase): Enzyme digestive, qui digère le glycogène