lab 2do parcial Flashcards
¿Cuál es la importancia de las bacterias? ¿Para qué sirven?
Las bacterias, estan presentes en casi todas partes y pueden sobrevivir a casi todo, incluso nuestro cuerpo.
Si bien algunas son responsables de causar enfermedades, la mayoría nos proveen muchos beneficios, ya que cuando están en perfecto equilibrio, las bacterias fermentan los residuos de nuestra dieta, transforman la energia, producen ácidos grasos, nos protegen de las bacterias que nos enferman incluso estimulando nuestras defensas o formando barreras, producen la vitamina By K y colaboran evitando lapérdida de minerales en nuestro cuerpo.
Efecto mutualista de las bacterias en el cuerpo humano
El mutualismo es una interacción biológica, entre individuos de diferentes especies, en donde ambos se benefician y mejoran su aptitud biológica.
Efecto patogénico de las bacterias en el cuerpo humano
El análisis de la infección y la enfermedad aplicando una serie de normas como los postulados deKoch, permite clasificar a las bacterias en patógenas, patógenas oportunistas o no patógenas.
Las bacterias virulentas tienen mecanismos que favorecen sucrecimiento en el hospedador aexpensas de los tejidos de este o de la función del Órgano, Las bacterias oportunistas aprovechanlas condiciones preexistentes que potencian la vulnerabilidad del paciente, como lainmunodepresión, para desarrollarse y originar una enfermedad grave.
Las características de lasbacteriaspatógenas son …..
transmisibilidad, adherencia a las células hospedadoras, persistencia, invasión de las células y tejidos hospedadores, toxigenicidad y capacidad para evadir o sobrevivir al sistema inmunitario del hospedador.
La capacidad de cualquier especie bacteriana para ocasionar enfermedades en unhospedador humano susceptible.
Patogenicidad.
Especie bacteriana capaz de ocasionar dichas enfermedades al presentarsecircunstancias favorables (para el organismo).
Patógeno(a).
Término que presume patogenicidad pero que permite la expresión de baja aextremadamente elevada.
Virulencia.
Preparación de la tinción de gram
- Colocar las láminas extendidas y fijadas en una bandeja adecuada y cubrir su superficie con cristal violeta por un minuto. Lavar con agua destilada y escurrir.
- Cubrir la superficie de la lámina con la solución de Lugol por un minuto. Lavar con agua destilada y escurrir.
- Colocar cada una de las láminas en posición inclinada y decolorarlas con alcohol a 95° hasta que el color libre deje de salir (aproximadamente 10-20 segundos). Lavar con agua destilada y escurrir.
- Cubrir las láminas con safranina por 30 segundos. Lavar con agua destilada y escurrir.
- Secar las láminas utilizando papel absorbente.
- Colocar una gota de solución salina en la láminautilizando el asa de platino.
- Tomar asépticamente con el filamento una pequeñamuestra del cultivo sólido suministrado y mezclar con lagota de solución salina para obtener unasuspensión.También puede utilizarse un cultivo líquido, en dichocaso, la muestra se toma con el asa de platino y no esnecesario colocar la gota de solución salina.
- Extender la suspensión con el asa de platinopreviamente esterilizada y enfriada.
- Dejar secar la lámina a temperatura ambiente.
- Fijar la muestra extendida a la lámina utilizando calor.
técnica de la tinción de gram
- Después de fijar la muestra mediante el calor, se añade violeta cristal para teñir todas las bacteriasGram + y Gram -.
- Se realiza un lavado con água.
- Fijamos la muestra con Lugol y se realiza otro lavado con agua.
- Utilizando alcohol-cetona se va a descolorir las bacteriasGram - .
- La Safranina va a teñir los Gram -.
- Se realiza un lavado con agua.
- Por fin, observamos las bacterias de color Gram + de color azul/violeta y las bacterias Gram – de color rosa.
¿Cómo se dividen las bacterias según la tinción de Gram?
El principio del método se basa en la tinción de todas las bacterias mediante cristal violeta o violeta de genciana y posteriormente decolorar los microorganismos con alcohol-acetona, lo que sucede con los Gram-, mientras que los Gram+ siguen manteniendo la coloración.
Los fundamentos de la diferenciación entre ambos grupos se basan exclusivamente en las características diferentes de las paredes celulares entre ambos grupos de bacterias. La clave es el peptidoglucano más conocido como mureina, uno de los principales constituyentes de la pared celular, formando una gruesa capa en los Gram+, mientras que tienen una delgada capa en los Gram-.
Tecnica de la tinción de Ziehl Neelsen
Reactivos a utilizar: colorante primario, solución decolorante ycolorante secundario.
- Preparado y secado del frotis bacteriano en un portaobjetos.
- Calentado de la muestra.
- Aplicación del colorante primario: carbol fuscina.
- Calentado de la muestra por 5 min a 60°C.
- Lavado muy cuidadoso de la muestra con agua 100% limpia únicamente.
- Aplicar solución decolorante: alcohol-ácido al 3% y durante 5 min.
- Nuevamente lavado con agua.
- Aplicar colorante secundario: verde malaquita o azul de metileno por 1 o 2 min.
- Lavado, secado y examinación en el microscopio.
¿Qué bacterias se pueden observar con esta tinción (Ziehl Neelsen)?
Es utilizado para la visualización debacterias ácido-alcohol resistentes. Principalmente para la observación de MycobacteriumTuberculosis yMycobacteriumLeprae.
Morfología bacteriana
Las bacterias son los organismos primeros y más pequeñoscapaces de vivir en forma independiente.Los individuos de diversas especiesbacterianas que colonizan o infectan a los humanos van de 0.1 a 10 μm.Las principales formas que adoptan son esferas, bastones, bastones doblados o curvos, y espirales.
Prueba bioquímica: Prueba de catalasa
¿En qué consiste?
La prueba se utiliza para comprobar la presencia de la enzima catalasa que se encuentra en la mayoría de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas que contienen el citocromo oxidasa. La principal excepción son los estreptococos (Streptococcus).
¿Qué grupos de bacterias gram positivas se diferencian con esta prueba?
Los siguientes géneros:Streptococcus (catalasa -) de Micrococcus (catalasa +) y/o Staphylococcus (catalasa +). Bacillus (+) de Clostridium (-). Lysteria monocytogenes (+) y/o Corynebacterium (+, con las excepciones de las especies C. pyogenes y C. haemolyticum, ambas -) de Erysipelothrix (-)
Prueba bioquímica: Prueba de oxidasa
¿En qué consiste?
Sirve para determinar la presencia de enzimas oxidasas. La reacción de oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromooxidasa que activa la oxidación del citocromo, el cual es reducido por el oxígeno molecular produciéndose agua o peróxido de hidrógeno según la especie bacteriana.
El reactivo de la oxidasa más recomendado es la solución acuosa al 1% de diclorhidrato de tetrametil-p-fenilendiamina (reactivo de Kovacs). Es menos tóxico y mucho más sensible que el correspondiente compuesto dimetilo (reactivo de Gordon y McLeod), pero es más caro.
¿Qué grupos de bacterias gram negativas se diferencian con esta prueba?
Identificar todas las especies de Neisseria (+), y diferenciar Pseudomonas de los miembros oxidasa negativos de las enterobacterias.
Este reactivo(reactivo de Gordon y McLeod)tiñe las colonias oxidasa positivas de color lavanda que vira gradualmente a púrpura-negruzco intenso.
Prueba bioquímica: Prueba de ureasa
¿En qué consiste?
Se cultiva el microorganismo en slant en agar urea de Christensen. Este medio se complementa después del autoclavado con 50 ml/l de urea. Ésta será degradada por aquellos microorganismos capaces de producir la enzima ureasa. Esta degradación produce amoniaco que hará variar el color del indicador de amarillo a rojo, poniéndose así de manifiesto la actividad ureasa.
¿Cuál es el producto final de esta reacción?
(NH2)2CO+H2O→CO2+ 2NH3dióxido de carbono y amoniaco
¿Qué especies de bacterias se diferencian con esta prueba?
Especies del género Proteus
Se emplea para la detección de la enzima coagulasa en microorganismos
Prueba de coagulasa
El plasma de conejo (o humano) citratado diluido 1:5 se mezcla con un volumen igual de cultivo en caldo o crecimiento de colonias en agar y se incuba a 37 °C. Se incluye un tubo de plasma mezclado con caldo estéril como control.
procedimiento de la Prueba de coagulasa
