LAB 11 PRUEBAS RÁPIDAS PARA EL DIAGNÓSTICO EN EL PUNTO DE ATENCIÓN. INMUNOCROMATOGRAFÍA (VIRUS Y BACTERIAS ) Flashcards
Identificar los tipos de diagnòstico ràpido en serologìa (points of care) Conocer las caracterìsticas de las pruebas inmunocromatograficas Conocer las pruebas inmunocromatogràficas para el diagnòstico de infecciòn por el virus de inmunodeficiencia humano (VIH) Conocer la prueba inmunocromatogràfica para diagnòstico de Streptococcus pyogenes
Que es la IgM e IgG y porque importan en los ensayos?
Los anticuerpos o inmunoglobulinas son glucoproteínas gammaglobulinas, la IgM posee semivida de 10 días, es la mas antígua en el registro viviente y también la más grande pero solo siendo un 6% de todas las Ig; la IgG es la más pequeña(traspasando placenta), con una semivida de 21 días y más abundante con 80%.
La forma más rápida de orientar el diagnóstico por IFX aguda o activa es la detección de la respuesta IgM específica, esta se desvalora en las reactivaciones y reinfecciones debido a la fugacidad y a la baja intensidad de su presentación y que no necesariamente son del mismo patógeno. La alta cantidad de IgG explica una infección resuelta.
La seroconversión proporciona el diagnóstico definitivo, aunque retrasa el diagnóstico en el tiempo al ser necesario un estudio en paralelo de muestras obtenidas en la fase aguda y en la convalecencia.
Por último, la ausencia de respuesta IgM es posible en infecciones en pacientes con algún tipo de inmunodepresión, entre las que se puede considerar la infección congénita.
Que es una prueba serológica y que lo diferencia de los ensayos point of care?
La serología es e lanálisis de sangre para detectar la presencia de anticuerpos contra un microorganismo. Permitiendo determinar si una persona ha estado expuesta a un microorganismo particular.
Los ensayos Point-of-Care (PoC) son :
-Fuera del laboratorio central, próximos al paciente, con material fácilmente transportable, resultados disponibles en menos de una hora, no necesitan personal entrenado
En la actualidad, un ejemplo de ensayo PoC son las técnicas de IC, también llamadas de flujo lateral, se utilizan para la detección de anticuerpos IgM e IgG.
Que es una reacción cruzada? Importa la reacción cruzada en estas pruebas?
Es una reacción que se establece entre un determinante antigénico y el anticuerpo específico para otro antígeno.
Una prueba de su importancia es la consideración en procedimientos actuales para la detección de IgM como el uso factor reumatoide (autoanticuerpo tipo IgM con especificidad anti-IgG). Su uso recae en la eliminación de la reactividad con otro patógeno por la eliminación de la IgG de la muestra.
Ciertos virus pertenecientes al mismo grupo comparten determinantes antigénicos, lo que posibilita reactividad cruzada al medir IgM. Aun más complejo es cuando hay cuadros clínicos similares (virus Epstein Barr y el citomegalovirus en la mononucleosis infecciosa). La reactividad múltiple por estimulación policlonal de linfocitos B de memoria, da lugar a reactividad IgM no relacionada con infección aguda.
Hay reactividad IgM frente a patógenos que han infectado previamente al paciente (reinfección exógena o reactivación de virus latente) cursan frecuentemente con presencia de IgM lo que origina problemas de diagnóstico diferencial. Esta circunstancia plantea problemas importantes en determinadas situaciones, como es la infección por virus dengue o la infección por CMV en el embarazo; en este caso, la infección primaria produce infección congénita más frecuentemente que la reactivación,siendo de gran interés caracterizar el tipo de infección en presencia de IgM específica.
Todas las pruebas serológicas son igualmente eficientes?
Las técnicas serológicas clásicas (neutralización, fijación del complemento e inhibición de la hemaglutinación, entre otras) detectan anticuerpos totales, por lo que no proporcionan un diagnóstico rápido. En general, requieren de procesos preanalíticos para eliminar reactantes inespecíficos, y no están automatizadas, por lo que no son técnicas de rápida ejecución.
Por otra parte, las técnicas como el inmunoanálisis enzimático (ELISA), la inmunofluorescencia (IF), la inmunoquimioluminiscencia (IQL) o la inmunocromatografía (IC), permiten la identificación de anticuerpos específicos de clase, lo que las habilita para el diagnóstico rápido, mediante la detección de IgM. Los ensayos de ELISA e IQL están disponibles en formatos
automáticos que requieren equipamiento costoso.
Que es la inmunocromatografía?
Se le conoce como análisis de flujo lateral donde la muestra liquida es la fase móvil y la membrana de nitrocelulosa es la fase estacionaria, la capilaridad posibilita el flujo.
La muestra es colocada o sembrada en la zona del conjugado, la cual presenta un anticuerpo específico contra uno de los epítopos del antígeno a detectar (presente en una muestra positiva) y un reactivo de detección. Si la muestra contiene el antígeno problema, es decir, una muestra positiva, éste se unirá al conjugado formando un complejo inmune y migrará a través de la membrana de nitrocelulosa. Si no, migrarán el conjugado y la muestra sin unirse.
Cual es la estructura del OnSite HIV ½ Ab Plus Combo Rapid Test?
Inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral.
Hay antígeno VIH-1 recombinante (lina 1), antígeno VIH-2 (linea 2), y control de anticuerpo conjugado.
El conjugado es oro coloidal.
Tarda 15 min y el resultado puede ser positivo o reactivo si se muestra la coloración.
Cual es la estructura OnSite Strep A Rapid Test?
Inmunoensayo cromatográfico o de flujo lateral.
Una línea de prueba (T) y una línea control (C). La línea T esta recubierta con anticuerpos anti Strep A, y la línea C está preocupada con un anticuerpo control.
