La réparation de l’ADN et la transposition

Question 1

Qu’est-ce que la cartographie de restriction vs cartographie des plasmides?

Answer 1

Cartographie de restriction : Un ADN coupé par une enzyme de restriction donne toujours les mêmes fragments de restriction ( sauf si mutation au niveau du site de restriction).

Cartographie des plasmides : Il est important de faire le lien entre le nombre de sites de restriction et le nombre de fragments produits.

Question 2

Définir CRISPR-Cas9. Type d’immunité ?

Answer 2

Clustered = Regroupés
Regularly = Régulièrement
Interspaced = Espacés
Short = Courtes
Palindromic = Palindromiques
Repeats = Répétitions d’ADN

o Palindromes répétés et régulièrement espacées
o Immunité adaptative : Défense contre les infections virales

Question 3

Quels sont les rôles des gènes Cas (2)?

Answer 3

• Hélicases (déroulement ADN)
  -Nucléases (couper)

Question 4

Que permet les mécanismes de réparation de l’ADN CRSPR-Cas9?

Answer 4

Système qui permet la reconnaissance de l’ADN viral et sa dégradation
—> Combattre l’infection

Question 5

Quelles sont les 2 composantes du système CRSPR-Cas9?

Answer 5

Système à deux composantes :

o Protéine Cas9 avec activité nucléase
o ARN guide

Question 6

Expliquer le système CRSPR-Cas9 (5 étapes).

Answer 6

1- Transcription et traduction des protéines Cas

2- Transcription de l’ADN spacer correspondant

—> À l’aide de l’ADN virale (provient d’un virus) et de crARN

3- Transcription et traduction d’une protéine Cas différente

4- Copie de l’ADN viral dans le système CRISPR et dégradation

Question 7

Qu’est-ce qui forme l’ARN guide?

Answer 7

Chimère crARN - tracrARN = ARN guide