Infektiøse dyremodeller Flashcards

1
Q

Hvad er en biofilm?

A

En aggretation af bakterier formende en matrix. Mere resistente overfor antibiotika end normale bakterier.
Ofte en self-produced matrix, men i infektioner kan bakterierne gå ind og bruge værtsmatrialet også.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Hvad står MBIC og MBEC for?

A

MBIC: Minimal biofilm inhibtory concentration
MBEC: Minimal biofilm eradication concentration

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Hvad er forskellen på biofilm i akutte og kroniske infektioner?

A

Aggregater i både akutte og kroniske infektioner. Forskellen: Hvor hurtigt de vokser. I de akutte er der meget høj væksthastighed og i den kroniske er der lav væksthastighed.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Hvilke fordele er der ved zebrafisken som model?

A
  • Vertebrae
  • 70% af de humane gener har orthologues i zebrafiskens genom
  • Genomet er kortlagt
  • Embryoer er transparente de første 24 timer, hvilket giver mulighed for nem genetisk manipulation
  • External embryoic udvikling
  • Hurtig udvikling (Indenfor de første 48 timer kan alle større vertebrae specifikke organer ses)
  • Gyder 300 æg af gangen (hver uge)
  • Transgenetisk linjer findes
  • Billige
  • Kan overleve ved 6-38 grader celcius
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Hvad mangler den transparente zebrafisk model, der gør at den er transparent? Og hvad kan den bruges til?

A

Der findes en transparent mutant, der mangler melanophores og iridophores, hvilket gør at man ved indgivelse af bakterier, kan følge deres vej – Kan bruges i viden om vacciner.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Hvilke sygdomme har zebrafisken allerede været brugt som model for?

A

Alzheimer, kræft, hjerte-karsygdomme, blodsygdomme, muskelsygdomme.
Antigen optag ved vaccination

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Hvad er en endoparasit?

A

Parasitter der lever inde i værten.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Hvilke to hovedgrupper kan endoparasitter inddeles i?

A

Enkeltcellede: Protozoaer
Flercellede: Helminther

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Nævn tre helminther

A

Bændelorm (cestoder), fladorm (trematoder) og spolorm (nematoder).

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Hvad kan vi bruge parasit modeller til?

A
  • Lære om parasitten (biologi, patogene, immunitet)
  • Model i forbindelse med andre sygdomme (cancer, allergi/astma, autoimmune sygdomme)
  • Øget viden om immunsystemet (Th1/Th2 balance, nedregulering af immunrespons, manipulation af immunsystemet)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Hvad går vaccination (sådan helt overordnet) ud på?

A

Ved vaccination indgives infektiøs matriale med henblik på at skabe immunitet (immun-hukommelse) uden at skabe sygdom. Det kræver dermed aktivering af det adaptive immunforsvar.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Hvad er memory celler?

A

Memory celler dannes under det primære immunforsvar. De kræver ingen/mindre co-stimulering end naive celler, og kræver ikke et antigen men kun cytokiner for at leve. Der findes flere memory-celler mod antigen end der findes naive celler mod antigen.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Hvad gør memory B-celler?

A

Inhibering af aktivering af naive B-celler mod samme antigen.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Hvorfor er det en fordel at Memory B-cellerne inhiberer aktiveringen af naive B-celler mod samme antigen?

A

IgG (som produceres af memory-cellerne) har en højere affinitet end IgM (som produceres af de naive B-celler), så vi får det mest effektive immunrespons fra memory cellerne.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Hvilke to typer Memory T-celler findes der og hvad gør de?

A

Der findes to former, hvoraf den centrale genoptager aktivering af lymfocytter i lymfeknude, og effector memory cellen virker på inflammationsstedet. Ligesom ved Memory B-celler, er Memory T-cellerne hurtigere og stærkere, men der er ingen ændring af affinitet ved memory T cellerne.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Beskriv “den gode vaccine”

A
  • Er ufarlig
  • Billig
  • Livsvarig immunhukommelse
  • Effektiv
  • Inducerer den rigtige form for immunitet
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

Hvilke to hovedgrupper kan vacciner deles op i?

A

Levende og døde vacciner

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

Hvilke to typer levende vacciner findes der?

A

Cross-species og attenuated

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
19
Q

Beskriv cross-species vacciner:

A

Laves på virus der har antigener tilfældes med den virus man ønsker at vaccinen skal være virksom imod.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
20
Q

Kom med et eksempel på en cross-species vaccine:

A

Small-pox vaccinen, der er baseret på cowpox. Dette er muligt fordi smallpox og cowpox har antigener tilfælles

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
21
Q

Beskriv Attenuerede vacciner og de to metoder hvorved de kan laves:

A

Her benyttes det virus man ønsker beskyttelse mod, men virusset svækkes. Dette kan gøres på to måder:

1) Genetisk: Patogene virus isoleres og herefter kan virulensfaktor muteres eller fjernes.
2) Dyrkning: Virus isoleres fra human patient, dyrkes i human cellekultur, hvorefter man inficere aber med det. For at virusset skal kunne sprede sig i aberne, er det nødt til at mutere for at tilpasse sig, og det virus man høster ud af aberne igen vil derfor være svækket.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
22
Q

Kom med mindst 1 eksempel på en attenuated vacciner:

A

Tuberkulose, mæslinger, hepatitis A, polio mm.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
23
Q

Hvilke 3 typer døde vacciner har vi?

A

Whole killed organism, toxoid-baseret, subunit.

24
Q

Døde vacciner: Definer whole killed organism:

A

Intakte, men ikke levende organismer.

25
Q

Fordele/ulemper ved whole killed organism:

A

Ulemper: Giver en dårligere immunitet, blandt andet pga. dårlig aktivering af CD8-celler.
Blanding af virus og bakterie komponenter kan indeholde endotoxiner eller give allergisk reaktion.

Fordele: Mere sikre for immunosuppresive patienter, idet virus ikke kan revertere.

26
Q

Kom med mindst 1 eksempel på en whole killed organism-vaccine:

A

Rabies, hepatitis A, polio, influenza.

27
Q

Beskriv toxin/toxoid vaccinen:

A

Inaktiveret toxin, som regel ved formalin behandling.

28
Q

Beskriv fordele og ulemper ved toxoid vaccinen:

A

De er ikke særlig immunogene og kræver adjuvans. Men derudover er de meget sikre, billige og nemme at opbevare.

29
Q

Hvad er den vigtigste toxoid vaccine vi har?

A

Stivkrampe vaccine

30
Q

Hvad er subunit bacerede vacciner?

A

Dele af infektiøs matriale er oprenset eller lavet syntetisk, primært via. Genetisk kloning.

31
Q

Fordele/ulemper ved subunit bacerede vacciner?

A

Fordele: Sikre, nemme at transportere, få bivirkninger.
Ulemper: Dyre, kræver stor biologisk viden om det infektiøse matriale, peptider og DNA er normalt dårligt til at inducere immunitet (kan dog ændres ved at koble det til immunogent matriale).

32
Q

Hvad er konjugat vacciner?

A

Kobling af vaccine-matriale til protein.

33
Q

Definer adjuvans i forhold til vacciner:

A

Aktiverer de antigen præsenterende celler så de effektivt kan aktivere CD4 T-celler.

34
Q

Influenza: Beskriv henholdsvis antigen drift og antigen shift

A

Antigen drift: Forekommer hele tiden når virus inficerer en vært, punktmutere og danner en anelse anderledes udgaver af virusset.
Antigen shift: Mere sjældne – Kræver at to virus inficerer den samme vært.

35
Q

Hvorfor kan influenza virus mutere virkelig meget?

A

Det er et RNA-virus. Disse mangler proof-reading system, hvilket gør at de muterer rigtig meget.

36
Q

Nævn nogle begrænsninger der findes specifikt for influenza virus:

A
  • Skal passe til de årlige variationer
  • Produktionskapacitet
  • Tid (4-6 måneder)
  • Kapacitet på verdensplan (1-2 milliarder doser per år/7 milliarder mennesker)
37
Q

Hvad er M2 protein?

A

M2 er et integreret membranprotein.

38
Q

Hvorfor er M2 proteinet interessant i forbindelse med influenza vacciner?

A

M2e proteiner er højt konserverede imellem humane strains, og antistoffer rettet mod M2e har i dyremodeller vist sig at nedsætte mortaliteten ved influenza. Vacciner rettet mod M2e har vist en bred beskyttelse mod forskellige influenza stammer.

39
Q

Beskriv T-celle baserede influenza vacciner:

A

De cytotoksiske t-celler er lavet til at slå virus ihjel, hvoraf man har undersøgt om man kan lave T-celler baserede vacciner. De kan ikke forhindre sygdommen, men de kan mildne forløbet og nedsætte mortaliteten. Adenovirus kan bruges til at inducere T-celle medieret beskyttelse.

40
Q

Beskriv Vektor baserede influenza vacciner:

A

Er en replikationsdefekt variant af naturlige organismer. Giver en god immunitet, der kræves kun små doser, og de er sikre for immunosuppressive patienter.

41
Q

Hvad er Nematode C. Elegans?

A

1 mm lang hemofroditisk nematode, der lever i jorden. Den lever af bakterier.

42
Q

Hvilke 3 stammer findes C. Elegans i?

A
  • C. elegans N2 (Vildttype)
  • C. elegans pha-1 (Steril mutant)
  • C. elegans esp-1 (Mutant udgave med øget susceptibility til patogener)
43
Q

Nævn mindst 4 fordele ved C. elegans som model:

A
  • Simple vækstbetingelser
  • Kort generationsinterval (levetid 3 uger)
  • Total genom sekvens (60-80% har humane counterparts)
  • Innate immunforsvar er godt konserveret
  • Transparent (mulighed for fluroscens markører)
  • Genetisk manipulerbar
44
Q

Nævn mindst 2 ulemper ved C. elegans som model:

A
  • Eksperimentelle temperature
  • Intet adaptiv immunforsvar
  • Ingen mobile fagocytoserende celler svarende til pattedyrenes makrofager (Relevans for pattedyr?
45
Q

Anvendelsesmuligheder for C. elegans som dyremodel:

A
  • Biokemiske pathway er velbevarede mellem mennesker og orme og den bruges derfor især til; indsigt i celledød, cellecyklus, kønsbestemmelse, neurologiske funktioner, humane degenerative neurologiske lidelser, kræft og alders-forskning.
  • Identificere værts targets ved brug af RNAi (gener der regulerer fedtdepoter, kan bruges til obesitystudier)
  • MOA studier (Mechanism of action)
  • Biologi i rummet (interplanetary transfer of life)
  • Værts-patogen interaktioner (virulensmodel)
  • Identificere anti-infective komponenter
46
Q

Bacterial killing of C. Elegans: Beskriv henholdsvis slow killing og fast killing (inkl hvor længe det tager at dræbe den ved de to metoder):

A

Fast-killing: Toxiner. Ormen dør indenfor 0-24 timer.

Slow-killing: Opformering af bakterier i ormens tarm. Ormen dør indenfor 4-10 dage.
- Den vil bevæge sig langsommere, lægge færre æg, få udvidede tarme, få ægophobning.

47
Q

Hvilke overvejelser skal vi gøre os ved design af et infektiøst studie?

A

1) Sygdomsproblem
Hvad er det naturlige/spontane problem i populationen?
Hvilket kliniske symptomer/patologi i inficerede dyr?
Har man identificeret en mikroorganisme, der er skyld i infektionen?

2) Ætiologi
3) Dyrevalg
Naturlig eller model
Alder, køn, art
Antal

4) Etik
5) Infektions rute
Naturlig rute af infektionen
Sørg for passende præsentation af det infektiøse agens
Find rette dosis
Anatomi og fysologi af værtsdyr

6) Pilot studie

48
Q

Hvad er de generelle steps for bakterielle infektioner?

A

Kommer ind i kroppen -> Lokal eller systemisk spredning -> multiplikation -> Evasion af værts forsvar -> Udskillelse fra kroppen -> Skade på værtsdyret/patologi.

49
Q

In vivo loop model - Hvad vil vi gerne undersøge med den?

A
  • Invasion i relation til Samonella
  • Invasion i relation til virulens (andre bakterier)
  • Patogenese generelt
  • Sammenligning med in vitro studier
50
Q

Hvilke dyr bruger vi til vores loopmodel (art, alder) og hvor længe er de anæsteseret?

A

Vi bruger 9-12 uger gamle høns, der kommer i fuld anæstesi i de 3 timer forsøget varer. Foruden forsøget har dyrene været fastet i 18 timer.

51
Q

Beskriv procedure for vores loop forsøg:

A

I jejenum laver vi 10 loops. Idéen er at man lægger små suturer i tarmen, for at skabe loops. Vigtigt med mellemrum mellem loops, da de skal kunne klippes ud efterfølgende!
Imens dyret er i anæstesi, sprøjtes forskellige samonella typer ind i de forskellige loops. Efter to timer sprøjtes gentamycin ind, for at undgå for mange andre tarmceller. Der ventes en time yderligere og dyrene aflives.
Efter aflivning tages biopsier og der ses på hvordan de forskellige samonella typer har invaderet tarmepithelet.

52
Q

Hvad er formålet med at lave loops?

A

De mindsker antallet af dyr der skal bruges i forsøget. Ved at lave 10 loops i en høne, behøves vi eksempelvis kun 1 høne i stedet for 10.

53
Q

Hvilke andre arter er der tidligere lavet loop forsøg på?

A

Grise og kalve

54
Q

Hvad indikerer tidligere loop forsøg om invasionen i forhold til retningen af hvor vi er i tarmen?

A

Indikerer at positionen af loop et linært fald af invasion i cranio-caudal retning.

55
Q

Hvilke 3 immunorganer har vi i fisk?

A

MALT: Mucosa associated lymphoid tissue
GALT: Gut associated lymphoid tissue
SALT: Skin associated lymphoid tissue

56
Q

Hvilke Immunoglobulin molekyler findes i fisk?

A

IgM, IgD, IgT, IgZ.

57
Q

Hvilke typer vacciner findes til fisk?

A

Orale, bad, immersion og injektion.