imunologija k1 Flashcards
Antigen je
svaka tvar koja može biti prepoznata id strane specifičnog protutijela
T ili N svi imunogeni jesu antigeni
T
T ili N - svi antigeni su imunogeni
N
Imunogeni su
svaka tvar koja može potaknuti imunosni odgovor
Heteroantigeni
strani antigeni koji potiču imunosni odgovor
Aloantigeni
tkivni antigeni iste đivotinjske vrste presađeni u genski nesrodnu jedinku
Ksenoantigeni
tkivni antigeni druge vrste
autoantigeni
vlastiti tkivni antigen
kakve su bjelančevine s obzirom na antigenske osobine
bolje od lipida, ugljikohidrata, nukleinskih kiselina
epitop
antigenska determinantna - dio antigena koji potiče specifičnu imunosnu reakciju
hapten
samostalno nema osobine antigena
t ili n- hapten ima sposobnost potaknuti tvorbu protutijela, ali može specifično reagireti već sa stvorenim protutijelima
n (nema sposobnost potaknuti tvorbu
primjer haptena
penicilin
protutijela dolaze od
gama globulina=imunosni globulin
gdje se nalaze protutijela
u serumu, ali i drugim tjelesnim izlulevinama
koji oblici protutijela postoje
slobodna u tekučunu u vezana za površinu limfocita B (BCR)
promijenjiva regija
za specifično vezanje na antigen
konstantna regija
određuje imunobiološke osobine i razred imunoglonulina
Fab
fragment koji se veže na antigen
paratop
vezni mjesto
fc
vezanje na druge komponente imunosnog sustava
koji su oblici teških imunoglobulinskih lanaca
alfam delta, epsilon,gama, mi
oblici lakih imunoglobulinskih lanaca
kappa i lambfa
koliko razreda ima imunoglobulinski lanac
5
IgG
80% svih protutijela u serumu
sekundarni imunosni odgovor
IgG
primarni imunosni odgovor
IgM
pentamer
IgM, pet podjedinica međusobno povezanih disfluidnim vezama i J lancem
IgA
u obliku dimara i monomera
glavni imunoglobulin sekreta sluznica
IgA
IgA jedino može djelovati
intracelularno
nositelj lokalne imunosti
IgA
Koje tjelesne tekučune sadrže IgA
krvni serum, žuć, suze i mlijeko
t ili n IgD se otpušta u plazmi
N
IgD je
monomer i malazi se na površini B limfocita kao antigenski receptor
Gdje se nalazi Ig D
na povrpini limfocita B
antigenski receptor
IgD
IgE
važan u obrani od parazita, monomer
tko sudjeluje u anafilaksijskom tipu alergijskih reakcija
IgE
Gdje se veže IgE
Fc područjem na mastocite i bazofile
kako se vežu protutijela
ključ - brava
neutralizacija
vezanje specifičnih oritutijela na epitope virua, bakterija i toksina
t ili n - neutralizacija je onemogućeno vezanje na ciljne stanice domaćina
t
O čemu ovisi stanična citotoksičnost
o protutijelima (uništavanje antigena prevelikih za fagocitozu
Kako reagiraju protutijela
specifično reagorato samo s onim antigenom koji je potaknuo njihovu tvorbu
Koja protutijela su monomeri
IgG, IgD i IgE
Koja protutijela su dimeri
IgA
Koja protutijela su pentameri
IgM
IgD se otpušta u plazmi - t ili n
N
Što je titar protutijela
najveće razrjeđenje seruma u kojem je neka serološka reakcija još uvijek jasno vidljiva
t ili n - titar tijela je razina aktivnosti specifičnih protutijela prisutnih u uzorku
t
Kako se određuje titar tijela
serijskim razrjeđenjem pretraživanog seruna (u svako razrjeđenje unese se antigen, tj.
izvede se serološka reakcija)
Kako se izražava titar
stupnjem razrjeđenja seruma (1:2, 1:4, 1:8)
Što je serološka dijagnostika
dokaz seroloških reakcija u svrhu dijagnosticiranja zaraznih bolesti
Koje serološke dijagnostike postoje
dokaz protutijela i dokaz antigena
Što se određuje dokazom protutijela
titar protutijela
Gdje se radi dokaz protutijela
u krvnom serumu pomoću poznatog antigena
Gdje se radi dokaz antigena
U tkivu pomoću poznatih protutijela
Što je parni serum
dva uzorka seruma uzeti od iste životinje u razmaku od 7 do 14 dana
Što znači povišenje titra
trenutna infekcija
Što znači smanjenje titra
oporavak od infekcije
Četverostruko povišenje titra
upućuje na sadašnju infekciju
kad titar može rasti
samo ako je antigen prisutan
koliki razmak mora biti za uzimenje uzorka kod aornog seruma
7 do 14 dana (21)
¸Aglutinacija
serološka reakcija u kojoj protutijela unakrižno vežu antigene u hrpice vidljive golim okom
Najbolje sposobnost aglutinacije
IgM
antigen mora imati što
2 ista epitopa
Brza aglutinacija
- Identifikacija antigena pomoću poznatih
protutijela - Identifikacija protutijela u serumu ili krvi
KVALITATIVNA METODA
pozitivna reakcija brze aglutinacije
stvaranje aglutinata
(hrpica), suspenzija bistra
negativna aglutinacija
jednoliko zamućenje suspenzije
Rose Bengal test
određivanje prisutnosti protutijela
spora aglutinacija
Kvantitativna metoda – određuje se titar
protutijela (aglutinina) u ispitujućem serumu
kakko se izvodi spora aglutinacija
Izvodi se u nizu epruveta s dvostrukim serijskim
razrjeđenjima seruma
Najveće razrjeđenje seruma
u kojem je
reakcija aglutinacije još uvijek vidljiva
nazivamo titar aglutinina
pasivna aglutinacija
Za dokaz topljivih antigena koji se ne mogu
izravno dokazati (reakcija nije vidljiva)
Antigen se najprije veže na površinu neke
stanice ili veće čestice, Protutijela se vežu na takve vezane antigene i sve zajedno povežu u hrpice
Precipitacija
Serološka reakcija u kojoj protutijelo veže
topljive antigene u veće komplekse koji nisu
topljivi
IgG, IgM
Razlika između aglutinogena i precipitinogena
u veličini molekule
Dvosmjerna radijalna
imunodifuzija
Oba sudionika reakcije difundiraju kroz gel
U središnju jažicu ukapa se poznati sudionik,
a u okolne pretraživani
antiimunoglobulin
protutijela koje je proizvela neka jedinka kao
reakciju na globuline druge jedinke
imunofluorescencija
je serološka metoda u kojoj je protutijelo označeno fluorescirajućom tvari kako bi serološku reakciju učinili vidljivom.
protutijelo + fluorescirajuća tvar = konjugat
Konjugat može biti
Označeno protutijelo specifično za antigen kojeg dokazujemo
2. Označeni antiimunoglobulin
Najčešća tvar koja se koristi za izradu konjugata je
fluorescein izotiocijanat (FITC) - veže se za Fc područje protutijela
Direktna (izravna) imunofluorescencija
Koristi se za dokaz antigena poznatim označenim protutijelima
Za reakciju potrebno:
* Mikroskopski preparat od kulture nekog mikroorganizma ili tkiva životinje
* Konjugirani serum (konjugat) – sadrži poznata specifična protutijela označena fluorescirajućom tvari
kako ide postupak direktne imunofluorescencije
- Isječak tkiva ili razmazak koji sadrži antigen fiksira se
na predmetno stakalce, inkubira s označenim
antiserumom, a zatim se ispere kako bi se uklonila
nevezana protutijela - Pregledom pod mikroskopom s izvorom UV svjetla
može se uočiti zelena fluorescencija na tamnoj
pozadini (ukoliko je došlo do vezanja označenih
protutijela za antigen)
cilj direktne imf
moguće je dokazati vrlo malu količinu
antigena u tkivu
Posredna (neizravna, indirektna) imunofluorescencija
Može se koristiti i za dokaz antigena i za dokaz protutijela
prednosti neizravne imf
Na jedno specifično protutijelo može se vezati više označenih antiimunoglobulina pa je fluorescencija izraženija
Upotrebom označenih antiimunoglobulina specifičnihza pojedini razred protutijela može se odrediti kojem razredu istraživano specifično protutijelo pripada
IMUNOENZIMNI TEST
elisa
elisa
Serološka metoda u kojoj je protutijelo označeno enzimom čime serološku reakciju činimo vidljivom (enzim djeluje na odgovarajući supstrat koji se uvodi na kraju reakcije), najrašireniji serološki test (čini temelj iz kojeg su razvijeni noviji testovi poput western blottinga i imunokromatografije)
za što se koristi imunoenzimni test
1.Dokaz protutijela specifičnih za određeni antigen čime dokazujemo da je pretraživana
životinja bila u dodiru s tim antigenom
2. Dokaz antigena u pretraživanom tkivu ili sekretu životinje
dokaz protutijela
- Jažice se oblože antigenom (proteini se čvrsto vežu za
polistirensku površinu) – nakon ispiranja neće se ukloniti - Dodaje se ispitujući serum – tijekom inkubacije protutijela
specifična za antigen će se vezati → ispiranje će ukloniti
nevezana protutijela - Dodaje se konjugat (enzimom označeni antiimunoglobulini)
koji će se vezati na specifična protutijela → ispiranje će
ukloniti nevezane antiimunoglobuline - Dodaje se supstrat za enzim → promjena boje je potvrda
djelovanja enzima odnosno prisutnosti specifičnih protutijela
u ispitujućem serumu
dokaz antigena (sendvič ELISA)
- Jažice se oblože protutijelima specifičnim za antigen koji se
dokazuje - Dodaje se uzorak u kojem se dokazuje antigen → tijekom
inkubacije antigen (ako je prisutan u uzorku) se veže na specifična
protutijela – ispiranjem se uklanja sve što se nije vezalo - Dodaju se protutijela specifična za antigen kojeg dokazujemo
(protutijela za detekciju antigena) → protutijela mogu biti označena
enzimom (direktna sendvič ELISA) – inkubacija i ispiranje - Ukoliko protutijela za detekciju nisu označena enzimom nakon njih se
dodaju enzimom označeni antiimunoglobulini (indirektna sendvič
ELISA) - Nakon ispiranja dodaje se odgovarajući supstrat koji promjenom
boje ukazuje na pozitivnu reakciju (prisustvo antigena)
Vrste konjugata u imunoenzimskom testu
specifično protutijelo + enzim, antiimunoglobulin + enzim
konjugat imunofluorescencije
protutijelo + fluorescirajuća tvar
Konjugat direktne imunofluorescencije
konjugirani serum
Posredna (neizravna, indirektna) imunofluorescencija - konjugat
označeni antiimunoglobulini