immunologiska metoder Flashcards
vad är definitionen av en antikropp?
specifika molekyler som tillverkas av mogna B-celler mot främmande ämnen
vad är defintionen av ett antigen?
molekyler/organismer som uppfattas som främmande av immunförsvaret, kommer attackeras av antikroppar
vad finns det för olika isotyper av antikroppar? hur ser de ut?
IgG= monomer IgM=pentamer IgD=monomer IgA=dimer IgE=monomer
vad är ett epitop?
del av antigen/protein som känns igen av antikropp, olika epitoper känns igen av olika antikroppar
hur binder antikropp till antigen?
binder till den variabla delen av antikroppens Fab-del mha vätebindnigar, vdW och dipol-dipolbindningar
vad är en polyklonal AK? Hur tillverkas de?
djur injiceras med antigen, börjar producera AK mot antigen=> olika AK bildas som binder till olika epitop på antigenet, produceras av olika B-celler
Djuret töms sedan på blod
vad är en monoklonal AK? hur tillverkas de?
monoklonala antikroppar kommer endast från en B-cellslinje och kommer att reagera mot samma epitop på antigenet
tillverkas genom att injicera djur med antigen, en B-cell isoleras och hybridiseras med en cancercell=> flera hybridceller bildas som producerar samma AK=> monoklonala AK
vad är affinitet och avididet?
afiinitet=dragningskraften, antigen och AK
aviditet= styrkan av bindningen, påverkas av om AK är t.ex. monomer/pentamer
vad är cytokiner?
signalämnen som möjliggör kommunikation mellan olika celler
stimulerar differentiering av lymfocyter/makrofager
förklara immmunoprecipitation
AK tillsatts mot antigen av intresse
tillsätt protein (beads) som binder till komplexen
precipitera med magnet/centrifug
pipettera bort supernantanten
=> western blot, SDS-page, masspektrometri
förklara radial immunodiffusion
AK och Ag regarer och fälls ut i en lösning, fällningen är proportionell mot konc av antigen
mäts som radie
förklara ELISA (direkt/indirekt)
antigen adsorberas till ytan
primär AK tillsätts
ev. sekundär AK binder till komplexet
detektion mha enzymatisk reaktion
förklara sandwich-ELISA
Capture AK adsorberas till ytan av brunn antigen binder till capture AK primär AK binder till annat epitop på antigen sekundär AK binder till komplex detektion mha enzymatisk reaktion
vad är FACS?
cellsortering efter laddning vid flödescytometri
vad är luminex?
används för detektion av olika, multipla biomarkörer och intracellulära cellsignaler
för detektion används AK konjugerade med olika fluorokrom
många antigen kan analyseras samtidigt
