Immunologisk metodik

Question 1

Vad menas med isotyp?

Answer 1

Immunoglobulinklasserna.

Question 2

Vad menas med subklass?

Answer 2

Undergrupper av isotyperna.

Question 3

Vad menas med allotyp?

Answer 3

Variationer hos den konstanta delen i en antikropp bland individer inom samma art.

Question 4

Vad menas med idiotyp?

Answer 4

Variationer inom de variabla delarna hos en antikropp.

Question 5

Vad är Fab?

Answer 5

Den antigenbindande delen.

Question 6

Vad är Fc?

Answer 6

Den nedre halvan av antikroppen.

Question 7

Vad menas med monoklonal?

Answer 7

En klon, så en B-cell ger upphov till kloner som är identiska.

Question 8

Vad menas med oligoklonal?

Answer 8

Bara några få kloner (ca 2-4).

Question 9

Vad menas med polyklonal?

Answer 9

Några kloner har dragit igång.

Question 10

Hur kan antikroppar detektera antigen?

Answer 10

Via linjära epitoper eller via konformation.

Question 11

Hur kan TcR detektera antigen?

Answer 11

Bara via linjära epitoper.

Question 12

Hur kan en reaktion detekteras?

Answer 12

Genom att se vad som hänt – visuell metod – eller genom att detektera signalsubstanser.

Question 13

Vad är Kd?

Answer 13

Dissociationskonstant.

Question 14

Vad är KA?

Answer 14

Associationskonstant.

Question 15

Hur räknas Kd ut?

Answer 15

(AK)(Ag) / (AkAg)

Question 16

Hur räknas KA ut?

Answer 16

(AkAg) / (Ak)(Ag)

Question 17

Vad är det KA och Kd räknar ut?

Answer 17

Bindningsstyrkan, men i olika skalor.

Question 18

Vad innebär agglutination och varför är det relevant för den visuella metodiken?

Answer 18

Sammanklumpning av partiklar orsakat av antikropp-antigen-interaktion.

Question 19

Vad innebär precipitation?

Answer 19

Antigen och antikroppar bildar immunkomplex och dessa kan också ses på visuella tester.

Question 20

Vad är nefelometri?

Answer 20

Spridning av ljus p.g.a. antigen-antikropp-interaktion.

Question 21

Vad är turbidimetri?

Answer 21

Mäter ljus som passerar grumlighet (som uppstår p.g.a. antigen-antikropp-interaktion).

Question 22

Vad är grundprincipen för ELISA?

Answer 22

En antikropp eller antigen är kopplat till ett enzym och tillsammans kallas de konjugat.

Question 23

Hur går direkt ELISA antigencoatad metod till?

Answer 23

96 brunnar coatas med antigen. Konjugatet tillsätts. Enzymet färgförändrar ett kvantifierbart substrat.

Question 24

Hur går indirekt ELISA antigencoatad metod till?

Answer 24

Brunnarna coatas med antigen. Antikropp tillsätts utan enzym. Ett konjugat (antikropp + enzym) tillsätts. Enzymet färgförändrar ett substrat OM pat. har antikroppar mot antigenet.

Question 25

Varför tvättar man mellan stegen i ELISA?

Answer 25

För att man inte ska mäta de antikroppar som inte bundit in till antigen.

Question 26

Vad kan uppstå för problem med antigencoatad metod?

Answer 26

P.g.a. laddningsförhållanden kan antigenet binda in till plasten => negativt resultat.

Question 27

Hur kvantifierar man med hjälp av ELISA?

Answer 27

Med spektrofotometri där man mäter absorbansvärde (hur mycket ljus som absorberas vid en viss våglängd).

Question 28

Vad finns det mer för metoder med detektionsmarkör, än ELISA?

Answer 28

RIA, FEIA, CLIA.

Question 29

Vilka 5 punkter tar man hänsyn till när man designar detektionssystem?

Answer 29

Sensitivitet, specificitet, pålitlighet, tidsåtgång och kostnad.

Question 30

Hur kan man veta att man har 100 % specificitet?

Answer 30

Om man tar prover från individer som förväntas vara negativa och alla visar sig vara det.

Question 31

Vad är grundprincipen för flödescytometri?

Answer 31

Man möter celler i ett flöde som man skickar ljus till av en viss våglängd mot flurokromet som sitter fäst på en antikropp och flurokromet skickar då iväg en längre våglängd som man kan se/mäta.

Question 32

Vad är immunoblot?

Answer 32

Samma grundprincip som ELISA men antigenet har placerats ut på en pappersremsa.

Question 33

Vad innebär Western blot?

Answer 33

Då man detekterar protein.

Question 34

Vad innebär Southern blot?

Answer 34

Då man detekterar DNA.

Question 35

Vad innebär Northern blot?

Answer 35

Då man detekterar RNA.

Question 36

Vad bygger multiplexanalyser på?

Answer 36

Att man kan detektera många olika specificiteter hos antikroppar i ett och samma prov.

Question 37

Vad är ALBIA?

Answer 37

Flödesbaserat dubbellasersystem för identifiering och kvantifiering av upp till 100 olika analyter i ett prov genom användning av polystyrenkulor.