HIV epidemie en evolutie HIV resistentie

Question 1

Waar komt HIV-1 vandaan?

Answer 1

Voor 1940 werd de mens voor het eerst besmet met HIV

Question 2

Infectie en verspreiding

Answer 2

1981 – Beschrijving eerste patiënten – AIDS.
1983 – Human immunodeficiency virus (HIV).
1984 – Identificatie van virus receptor – CD4.
1987 – 1ste anti-retroviraal middle - zidovudine
1992 – Pandemie.
1996 – Highly active antiretroviral therapy (HAART).

Question 3

Transmissieroutes

Answer 3

• Homoseksueel (MSM).
• Intraveneus drug gebruik.
• Blood transfusies.

Question 4

Therapie

Answer 4

Antivirale middelen
* Nucleoside RTI.
* Proteaseremmers.
* Fusion inhibitors.

Question 5

Huidige anti-HIV therapie (doel en therapievorm)

Answer 5

Doel:
* Maximale onderdrukking virus replicatie (ondetecteerbare virale load).
* Normalisatie CD4+ cel aantallen.
Therapievorm:
* HAART = 3 of meerdere middelen.
o 2 nucleoside reverse transcriptase inhibitor + 1 protease inhibitor.

Question 6

Monitoren van werkzaamheid van anti-HIV behandeling (viral load)

Answer 6

Virale load
* Initiële response (afname) hangt af van:
o Virale load voor aanvang
o Voorafgaande therapie.
* Tijdsduur tot ondetecteerbaar:
o <50 kopieën/ml: 24-32 weken

Question 7

Virale heterogeniteit

Answer 7

• Na besmetting ontstaat een viruspopulatie met extreem grote genetische diversiteit.
• Iedere denkbare mutatie is aanwezig = quasi species.

Question 8

Resistentie

Answer 8

verlies van replicatie vermogen. Bij resistent virus moet meer drug worden gegeven voordat de helft van de virus replicatie wordt geremd. Als virus resistent wordt moet die er een prijs voor betalen. Ontwikkeling van resistentie wordt vastgesteld door bepaling van specifieke mutaties in virus genoom.

Question 9

Genotypering

Answer 9

1. Verzameling plasma uit bloed.
2. Isoleren HIV-1 RNA uit plasma.
3. Reverse transcriptie van RNA in DNA en PCR amplificatie.
4. Sequencing van PCR-product.
5. Bepaling van aminozuur veranderingen t.o.v. wild-type HIV (dat gevoelig is voor medicijn).
6. Voorspellen mate van resistentie.

Question 10

Werking HIV protease

Answer 10

werkt in op protease van HIV

Question 11

Virale dynamiek bij monotherapie
Evolutie van resistent virus

Answer 11

1. Geneesmiddel oefent druk uit op virus om te ontsnappen aan remmer.
2. Door druk van geneesmiddel vindt selectie plaats van HIV met primaire (ontsnappingen) mutaties.
3. Door secundaire mutatie ontstaan HIV varianten met verbeterd replicatie vermogen.

Question 12

Welke HIV fenotype repliceert hier?
Het fenotype dat de eigenschap heeft verkregen van

Answer 12

• Een lagere replicatie capaciteit.
• Proteaseremmer resistentie mutaties.

Question 13

Primaire mutaties

Answer 13

• Worden vroeg gedetecteerd in het proces van resistentie mutatie accumulatie.
• Beinvloeden voornamelijk resistentie vermogen.
• Relatief specifiek voor remmers.
• Verdwijnen na stoppen van therapie vaak snel (binnen 2 weken) uit de populatie.

Question 14

Stapsgewijze evolutie van mutaties

Answer 14

• Door de specifieke ordening in het ontstaan van mutatie neemt de mate van resistentie tegen geneesmiddelen toe.
• De mate van resistentie correleert enigszins met het aantal mutaties.

Question 15

Welke HIV fenotype repliceert hier, t.o.v. mutant (36,54)?
Het fenotype dat de eigenschap heeft verkregen van:

Answer 15

• Een verhoogde replicatie capaciteit.

Question 16

Secundaire mutaties

Answer 16

• Kunnen ontstaan na primaire mutatie.
• Kunnen ook als natuurlijke polymorfisme voorkomen.
• Hebben zelf weinig tot geen effect op grootte van resistentie.
• Verbeteren virus conditie.
• Relatief onspecifiek voor remmer.

Question 17

Archivering van resistent HIV

Answer 17

• Proviraal DNA is ingebouwd in het gastheer DNA van (langlevende) CD4+ witte bloedcellen.
• Elke resistentie mutatie dat ooit in de patiënt is ontstaan is terug te vinden in hun DNA in ‘slapende’ geheugen T-cellen.
• Wanneer zo’n T-cel wordt geactiveerd wordt ook de replicatiecyclus van het resistente virus geactiveerd.

Question 18

Evolutie van resistent virus

Answer 18

Geneesmiddel oefent druk uit op virus om te ontsnappen aan remmer.
Door druk van geneesmiddel vindt selectie plaats van HIV met primaire (ontsnapping) mutaties.
Door secundaire mutaties ontstaan HIV mutaties met verbeterd replicatievermogen.